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糖原磷酸化酶b(GPb)测试盒_分光光度法(稳定高效灵敏)

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  • 江蓝纯生物
  • 国内
  • JLC-G8056
  • 2025年07月13日
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    • 保存条件

      低温保存

    • 保质期

      6个月

    • 英文名

      GPb测试盒

    • 库存

      796

    • 供应商

      江西江蓝纯生物有限公司

    • 规格

      50管/24样

    中文名称:糖原磷酸化酶b(GPb)测试盒
    测定方法:分光光度法
    测定规格:50管/24样
    保存条件:低温避光保存

    测定意义:
    糖原磷酸化酶(Glycogen phosphorylase,GP,EC 2.4.1.1))是糖原分解代谢的关键酶,使糖原分子从非还原端逐个断开α-1,4-糖苷键移去葡萄糖基,释放1-磷酸葡萄糖,直至临近糖原分子α-1,6-糖苷键分支点前4个葡萄糖基处。GP分为有活性的糖原磷酸化酶a(GPa)和无活性的糖原磷酸化酶b(GPb)两种形式。GPb在一定浓度的腺苷酸(5,-AMP)存在下可被激活。

    产品细节图片1

    测定原理:
    GP催化糖原和无机磷产生葡萄糖残基生成糖原和1-磷酸葡萄糖,磷酸葡萄糖变位酶和6-磷酸葡萄糖脱氢酶进一步依次催化NADP还原生成NADPH,在340nm下测定NADPH上升速率,即可反映GP活性。添加一定浓度的腺苷酸(5,-AMP)时测定GP(GPa和GPb)活性,未添加腺苷酸(5,-AMP)时测定GPa活性,GP活性-GPa活性得到GPb活性。

    需自备的仪器和用品:
    紫外分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

    测定步骤:
    1、分光光度计预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零;
    2、工作液的配制:临用前将试剂二转移到试剂一中混合溶解待用;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
    3、试剂三的配制:临用前在试剂三瓶中加入2.5mL蒸馏水充分溶解待用;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
    4、试剂四的配制:临用前在试剂四瓶中加入2.5mL蒸馏水充分溶解待用;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

    5、试剂五的配制:临用前在试剂五管中加入1.25mL蒸馏水充分溶解待用;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
    6、将工作液、试剂三、试剂四和试剂五置于37℃预热5分钟;
    7、1mL石英比色皿中加入50μL样本、50μL试剂三、50μL试剂四、50μL蒸馏水和800μL工作液,立即混匀,记录340nm处5min后的A1和10min后的吸光值A2,计算ΔAGPa=A2-A1。
    8、在1mL石英比色皿中加入50μL样本、50μL试剂三、50μL试剂四、50μL试剂五和800μL工作液,立即混匀,记录340nm处5min后的A3和10min后的吸光值A4,计算ΔAGP=A4-A3。

    注    意:正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定

    产品细节图片2

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