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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温保存
- 保质期:
6个月
- 英文名:
过氧化氢酶活性含量测试盒
- 库存:
157
- 供应商:
上海机纯实业有限公司
- 规格:
100管/96样

测定意义:
CAT(EC 1.11.1.6)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,是主要的 H2O2 清除酶,在活性氧清除系统中具有重要作用。
测定原理:
过氧化氢能氧化 MoO42-成 MoO52-,MoO52-接受氢氧根的电子成键,分子间立即脱水缩合,得到稳定的复合物(H2MoO4·XH2O)n 在 405nm 处有强烈吸收峰,其吸光值和过氧化氢浓度成线性关系。测定出体系剩余过氧化氢在 405nm 的吸光值即可反映 CAT 的催化活性。
需自备的仪器和用品:
酶标仪、台式离心机、可调式移液器、96 孔板、研钵、冰和蒸馏水
试剂组成和配制:
提取液:液体 100 mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体 5 mL×1 瓶,4℃避光保存;
试剂二:液体 15 mL×1 瓶,常温保存;(过饱和试剂,如有结晶析出,可 37℃加热搅拌溶解)试剂三:液体 30 mL×1 瓶,4℃保存;(过饱和试剂,如有絮状沉淀,可 37℃加热搅拌溶解)
粗酶液提取:
1、细菌、细胞或组织样品的制备:
细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104 个):提取液体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 20%或 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次); 8000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL 提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
2、血清(浆)样品:直接检测。
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文献和实验酶能将淀粉水解成麦芽糖,由于麦芽糖能将3,5-二硝基水杨酸试剂还原成3-氨基-5-硝基水杨酸的橙红色化合物,且在一定范围内还原糖的浓度与反应液的颜色成正比,故利用比色法可求出麦芽糖的含量。以5分钟内每克样品水解产生麦芽糖的毫克数表示酶活性的大小。 植物淀粉酶可分为α-淀粉酶和β-淀粉酶两种,其中β-淀粉酶不耐热,在温度70℃以上易钝化:而α-淀粉酶不耐酸,在pH3.6以下则发生钝化。根据以上特性,可分别测定这两种淀粉酶的活性。如测定α-淀粉酶和β-淀粉酶的活性,即为淀粉酶总活性
过氧化物酶活性的测定(比色法) 原理 过氧化物酶广泛分布于植物的各个组织器官中。在有过氧化氢存在下,过氧化物酶能使愈创木酚氧化,生成茶褐色物质,可用分光光度计测量生成物的含量。 仪器药品 721型分光光度计 离心机 秒表 天平 研钵 磁力搅拌器 愈创木酚
此抗原的材料中提取等(例如AFP从脐带血或胎肝中提取)。重组抗原是抗原基因在质粒体中表达的蛋白质抗原,多以大肠杆菌或酵母菌为质粒体。重组抗原的优点是除工程菌成份外,其他杂质少,而且无传染性,但纯化技术难度较大。以大肠杆菌为质粒体的重组抗原如不能充分除大肠杆菌成份,用于ELISA,在反应中可出现假阳性,因不少受检者受大肠杆菌感染而在血清中存在抗大肠杆菌抗体。重组抗原的另一特点是能用基因工程制备某些无法从天然材料中分离的抗原物质。例如丙型肝炎病毒(HCV)尚不能培养成功,而且丙肝病人血清中HCV抗原含量











