镁检测试剂盒(Calmagite微板法)

镁检测试剂盒(Calmagite微板法)
产品简介：
镁是多种酶的辅助因子，存在于软组织和骨中，二者的分布大致相等，其代谢机制尚不清楚，镁增加会导致肌张力减弱，镁减少见于甲状旁腺功能减退、慢性肾衰竭等。

镁检测试剂盒(Calmagite微板法)是利用溶液中镁离子在碱性条件下能与钙镁试剂结合，生成紫红色的复合物，颜色深浅与镁离子浓度呈正比，通过酶标仪检测510nm处吸光度，根据公式计算出镁含量，溶液中含有钙离子螯合剂EGTA可消除钙的干扰，使用表面活性剂可使蛋白胶体稳定，不必去除血清蛋白质而直接测定镁。该试剂盒仅用于科研领域，不适用于临床诊断或其他用途。


自备材料：
1、离心管或试管
2、96孔板
3、酶标仪
4、去离子水

操作步骤(仅供参考)：
1、制备样品：
①血浆、血清样品：血浆、血清按照常规方法制备，可以直接用于该试剂盒的测定，-20℃
冻存，用于Mg的检测。
②细胞或组织样品：取恰当细胞或组织进行匀浆，低速离心取上清，-20℃冻存，用于Mg
的检测。
③高浓度样品：如果样品中含有较高浓度的Mg，可以使用ddH2O稀释，不宜使用普通蒸馏水稀释。
④(选做)样品准备完毕后可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度，以便于后续计算单位蛋白重量组织或细胞内的Mg含量。
2、配制Mg显色工作液：临用前，按Calmagite显色液：MgAssayBuffer：Calmagite基液：去离子水=10:10:1:80的比例混合，用1M氢-氧化-钾溶液调整pH值为11.3～11.7，即为Mg显色工作液；4℃避光保存，2周有效。
3、Mg加样：选用经稀盐酸处理及去离子水清洁的96孔板，按照下表设置空白孔、标准孔、测定孔，溶液应按照顺序依次加入，并注意避免产生气泡；如果样品中的镁离子含量过高，可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定，样品的检测能设置平行孔。
4、Mg测定：混匀，以空白孔调零，酶标仪测定标准孔、测定孔510nm处吸光度(记为A
标准、A测定)。
计算：血清、血浆中镁(mmol/L)=(A测定/A标准)×0.823
组织中镁(mmol/mg)=(A测定/A标准)×0.823/待测样品蛋白浓度(mg/L)
式中：A测定=测定孔的吸光度
A标准=标准孔的吸光度
单位换算：mg/dl=mmol/L/0.411
参考区间：成年健康人血清镁浓度：0.7~1.1mmol/L



注意事项：
1、溶血样品对检测有干扰，尽量避免采用溶血样品。
2、脂血样本对检测也有干扰，样本应去脂处理后再进检测。
3、在该试剂盒条件下，建议待测样品中镁离子浓度应大于0.08mmol/L为宜，否则有可
能造成检测误差。
4、本法能够用于自动生化分析仪终点检测法。
5、如果样品浓度过高，应用蒸馏水稀释后重测，结果乘以稀释倍数。
6、注意避免Mg2+的污染，以免影响检测结果。

附录：参考标准曲线范围：测定镁标准在0.823mmol/L时，通过分光光度计测定其吸光度多在0.1~0.3之间。测定镁标准在0.082、0.165、0.412、0.823、1.646mmol/L时吸光度，据此作出其标准曲线如下：

注意：由于检测仪器和操作手法等条件的不同，参考值范围会有波动，该值仅供参考，对于要求精确计算镁含量的，可以进行多点测定；根据测定经验显示标准品浓度在0.08mmol/L以下，标准品浓度在1.6mmol/L以上，标准曲线会有偏差。