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上海科渊生物技术有限公司
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文献和实验体提取实验。 6、细胞培养过程中的死细胞是否会影响外泌体的提取? 会的。在收获细胞时,应确定死亡细胞占比不超过 5%。细胞凋亡/死亡过程中会释放大量囊泡,它们在外泌体的提取纯化过程中会污染活细胞产生的外泌体,同时易堵塞 EPF 纯化柱。 7、准备做细胞外泌体 Small RNA 的 NGS 测序,初始样品量需要准备多少? 普通肿瘤细胞系推荐使用 50mL 以上的初始样品量。由于某些细胞(如悬浮细胞、干细胞、免疫细胞、神经细胞等)中外泌体含量比较低,建议先通过 10 kD~ 100 kD 的超滤浓缩离心管
/L的NaOH溶液调节pH值至7.4,9500r/min下均质5 min,水浴加热至35℃~37 ℃,6000 r/min下离心10 min。收集全部上清液,待净化。4. 乳粉和粉状婴幼儿配方乳制品5. 称取10 g(精确至0.01 g)样品置于250 mL烧杯中,加入50 mL约50 ℃的水于乳粉中,玻璃棒搅拌均匀。溶解后冷却至室温,移入100 mL容量瓶中,水洗烧杯并转移洗涤液,用PBS定容至刻度后装入离心管6000转/分钟下离心15 min,混合上清液,取50mL上清液待净化。 干酪
RNA操作区,离心机、移液枪、试剂等均应专用。RNA操作区应保持清洁,并定期进行消毒。 2.操作过程中应自始至终佩戴抛弃式橡胶或乳胶手套,并经常更换,以避免将手、臂上的细菌和真菌以及人体自身分泌的RNA酶带入试管或污染用具。尽量避免使用抛弃式塑料手套。塑料手套不贴身,常常造成操作不便,而且多出部分还容易在器具上遭RNA酶污染并向未污染处传递,扩大污染。 3.尽量使用一次性枪头、离心管等塑料制品,尽量避免与其它实验共享器具,以防止交叉污染。推荐使用出厂前已经灭菌的枪头和离心管,大多
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