- ￥600 - 3200
- mlBio/酶联生物
- mlE6051
- 国内
- 2025年07月12日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
999
- 英文名：
T4 RNA连接酶1
- 保质期：
1年
- 供应商：
上海酶联生物科技有限公司
- 保存条件：
避光低温保存
- 规格：
1000U/10KU
| 规格： | 1000U | 产品价格： | ￥600.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 10KU | 产品价格： | ￥3200.0 |
描述：
催化 3’→5’磷酸二酯键的形成，使核苷酸的 5’-磷酸末端和 3’-羟基末端连接，伴随着 ATP 水解为 AMP 和 PPi。作用底物包括单链 RNA、DNA 及二核苷焦磷酸，它可催化ssDNA 和 RNA 的连接，相对于 ssDNA，该酶对 RNA 分子的连接和环化效率更高。
应用
连接单链 RNA 和 DNA
RNA 3’末端标记
RNA 和 DNA 分子内和分子间连接
合成单链寡脱氧核苷酸
蛋白质中掺入非天然氨基酸
储存：-20℃可保存 3 年。
活性定义：1 单位指在 1×T4 RNA Ligase Buffer 中，37℃条件下，30 分钟内将 1nmol 的 5’-[32P]rA16 转化为磷酸盐不溶物质所需要的酶量。
使用注意事项
（1）1×T4 RNA Ligase Buffer：50 mM Tris-HCl pH 7.5，10 mM MgCl2，1 mM DTT。该酶反应时需要加入终浓度 1mM ATP。
（2）佳反应温度 37℃，65℃ 10min 可使该酶失活。
（3）该酶的连接底物无论是 ssDNA 还是 ssRNA 均需要 5’-磷酸化或预腺苷化。
（4）该酶不能连接双链 DNA 或 RNA。
（5）加入终浓度 5~10% PEG 8000 或增加孵育时间可提高连接效率。
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文献和实验相关专题 重组DNA技术工具酶 T4 DNA Ligase即T4 DNA连接 酶，可以催化粘端或平端双链DNA或RNA的5’-P末端和3’-OH末端之间以磷酸二酯键结合，该催化反应需ATP作为辅助因子。同时T4 DNA连接酶可以修补双链DNA、双链RNA或DNA/RNA杂合物上的单链缺刻(single-strand nicks)。
【交流】关于NEB的T4 DNA连接酶和快速连接试剂盒的常见问题及解答
因为看到园子中使用NEB T4 DNA连接酶的老师和同学比较多，也经常就一些连接的问题进行讨论和沟通。今天发一个关于NEB T4 DNA连接酶的一个专题，就使用过程中一些常见问题跟大家讨论一下。也希望各位老师同学能够踊跃参与，如果大家有什么疑问或者好的建议欢迎。 一、关于NEB M0202 T4 DNA 连接酶的使用方法和常见问题及解答 1、产品特性和使用方法 产品说明：该酶催化契合的双链DNA或RNA的5'-磷酸末端和3'-羟基末端形成磷酸二酯键。该酶不仅能够催化平滑
使RNA的 3′－ OH末端与 5′ - 磷酸末端以磷酸二酯键而连结的酶。 EC 6． 5． 1． 3．是 J． Hurwitz等（ 1972）从感染 T4 噬菌体的大肠杆菌中提取的，与促进该噬菌体尾部纤维结合的基因 63的蛋白质为同一物质。作为其反应机理，首先是酶与 ATP形成酶 - AMP复合体，复合体的 AMP与 RNA的 5′ - 磷酸末端形成焦磷酸键，它与 RNA的 3′－ OH末端形成磷酸二酯键将 AMP游离出。一个 RNA链的 5′与 3′末端结合则生成一个环状分子。对基质
