探针法和染料法的区别: 探针法荧光定量PCR由于探针序列可以特异识别靶分子而更特异。而SYBR Green I染料法当有引物二聚体或者非特异性扩增时,该染料也可以和这些非特异性扩增产物结合,发出荧光,从而干扰对特异性产物的准确定量。因此相比染料法,探针法更特异。同时,若体系中靶分子很少的时候,由于探针法特异性结合靶分子的能力更强,因此可以准确检出;但染料法由于非特异结合导致本底信号高,很可能检测不到靶分子或者检测的靶分子信号会被背景信号掩盖。
参考文献
A signature of saliva-derived exosomal small RNAs as predicting biomarker for esophageal carcinoma: a multicenter prospective study. Mol Cancer. 2022 Jan 18;21(1):21.