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单细胞制备仪是一种集成金属浴消化与温和剪切组织的新一代细胞悬液制备设备,应用于流式细胞术/单细胞测序/原代细胞培养等实验,具有起始组织量小,时间短,细胞得率高,细胞活性高的特点。采用国际DIN方法设计,低噪音,使用方便,性能稳定,带加热功能,对样品的消化处理过程始终处在恒温状态。

工作原理:
样品与高密度氧化锆剪切磁珠与消化酶混合,通过恒温消化,组织剪切,得到高浓度的活细胞悬液。后续经过消化终止,过滤洗涤,必要时加以红细胞裂解等步骤,可得到千万到百万级别的活细胞,不同的组织均可以达到90%以上的细胞得率。
样品范围:

应用领域:肿瘤研究 心血管研究 干细胞研究 免疫研究 神经科学研究
产品应用:
单细胞测序(Single-Cell RNASeq)
多色流式分析(Multicolor Flow Cytometry)
质谱流式细胞计数(Mass Cytometry)
原代细胞分离培养(Primary Cell Isolation And Culture)
细胞治疗CAR-T
优势:
组织高利用率、单细胞化过程高效、单细胞高产出
针对临床穿刺样本,使组织的利用率达到100%,细胞产量可达10万个以上
针对原细胞培养样本,在15min内完成组织到单细胞过程,降低细胞逆境时间,提高细胞存活率
针对组织单细胞测序,快速完成单细胞化处理,获得高产且活率在85%以上的单细胞,以小鼠组织为例:


技术参数:
| 主要参数 |
参数范围 |
| 温度可调: |
22℃-56℃ |
| 高通量处理样品: |
同时处理4个2ml离心管 |
| 操作简单: |
制备流程全自动,仅需30min即可获得大量单细胞悬液 |
| 高细胞活性: |
细胞活性可达85%以上 |
| 重复性稳定: |
相同制备程序获得相同近似效果 |
| 程序: |
6组预设程序(可升级) |
| 低噪音: |
<50db,使用无刷电机 |
| 安全设置: |
无易损件设计,电磁锁定保护,不锈钢内腔,有效抑菌 / 全铝合金cnc内腔,经久耐用 |
| 样本量: |
5mg-1000mg |
| 操作时间: |
10分钟左右 |
| 转速: |
0-4000rpm |
| 工作时间: |
20-300min |
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文献和实验之一,其制备方案需根据脑区、发育阶段和疾病模型进行精细化调整和优化。如对于胚胎或者新生脑组织,其髓鞘化低、ECM 松散以透明质酸为主,需要注重解离过程的温和处理。而成年神经组织因髓鞘致密,ECM 交联显著。必须采用更高强度、多酶联合且配合机械剪切和密度梯度去髓鞘的策略,以兼顾解离效率与细胞存活。 针对不同肿瘤类型,单细胞悬液制备需「因瘤施策」:血液瘤离心即可。实体瘤则先机械剪切,再以胶原酶、透明质酸酶和 DNA 酶破除致密细胞外基质,其中富含纤维和 ECM 胶原的胰腺癌或乳腺癌需更长酶解。对于常规
? (1)对于罕见组织(如临床活检样本、胚胎组织、罕见病变组织等),这类稀有,微量,难获得的组织解离,在解离方案没有优化出来的情况下,建议选择类似的模式生物样本进行解离方案的优化,而不是直接用珍贵的罕见组织进行试验。 (2)可以选择通用型组织解离试剂盒,通过机械分离与酶消化相结合的方式,将组织分解成单细胞悬液,这种处理方式能够保持组织的结构完整性。其操作温和、快速且效果显著,能够解离后保持细胞活性。 (3)针对小鼠前列腺,小鼠耳部,发炎神经组织,大鼠肺部,成年小鼠/大鼠心脏等组织,结合通用的组织解离试剂盒,使用
多,影响FCM分析结果,太厚易造成脱蜡不净;注意掌握消化时间,避免已释放的细胞被消化。 (二)直接免疫荧光标记的样品制备 用标有荧光素的特异抗体对细胞进行直接染色,然后用流式细胞仪检测,阳性者即表示有相应抗原存在。实验步骤如下: 1. 每份取100μl单细胞悬液(细胞密度约1×106个细胞)。 2. 一份加入相应量的FITC或PE标记的特异性荧光直标单抗,另一份加入荧光标记的无关单抗,作为同型对照样品。 3. 室温下避光反应一定时间(时间长短根据试剂说明书要求进行),一般在室温
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