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- BestBio-贝博
- BB-4104
- 中国
- 2025年07月14日
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BestBio-贝博
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BestBio-贝博
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一年
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50 assays
贝博® BBcellProbe® 细胞周期检测试剂盒是利用细胞内DNA能够和荧光染料结合的特性，细胞各个时期其DNA含量不同从而结合的荧光染料不同，流式细胞仪检测的荧光强度也不一样来检测细胞周期。 细胞周期（cell cycle)是指细胞从前一次分裂结束起到下一次分裂结束为止的活动过程，通常由G0/G1期、S期、G2期和M期组成。G1期：细胞开始RNA和蛋白质的合成，但DNA含量仍保持二倍体。S期：DNA开始合成，这时细胞核内DNA的含量介于G1期和G2期之间。当DNA复制结束成为4倍体时，细胞进入G2期。
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文献和实验1. 收集样本细胞，细胞数量在5-10X106个。
2. 用冷PBS洗涤细胞两次。
3. 在15ml离心管中，用500 μl PBS重悬细胞。
4. 滴加2-5ml冷乙醇4℃固定过夜或-20℃固定1小时。
5. 取5X106细胞，在15ml锥形离心管中1000×g离心10分钟，弃上清，收集细胞。
6. 用冷PBS洗涤细胞两次。
7. 用500 μl冷PBS重悬细胞。
8. 加入Rnase A溶液20 μl， 37℃水浴30分钟。
9. 用400目细胞筛网过滤。
10. 在1000×g离心10分钟，弃上清，收集细胞。
11. 加入400 μl PI染液重悬细胞，轻轻混匀后4℃避光孵育30分钟-1小时。
12. 流式检测结果。激发波长为488nm。采用适当分析软件进行细胞DNA含量分析和光散射分析。
一、反应曲线 首先，我们了解一下化学反应的时间与吸光度一个曲线图，可以划分为四个区：延迟区、等速区、过渡区和平衡区，如下图所示： 二、反应原理 对于延迟区来讲，无规律可寻，对于指标检测没有意义。 等速区对应的指标检测方法是速率法。速率法又称连续监测法，是在测定酶活性或用酶法测定代谢产物时，连续选取时间-吸光度曲线中线性期内4个以上测光点作为读数点，并以单位时间吸光度变化值计算结果。线性期就是此期间内各测光点之间的吸光度差值相等，此线性期对酶促反应的底物来说属于零级反应。其测光点一般设置在加入
chenjun98ji 谁有关于CDC25C在细胞周期调控的线路图 lwjssry ......................... lwjssry .......................... 本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴 师兄微信号：shixiongcoming
yanjing2001 我用药物处理细胞后，流式检测细胞周期，G1期增加，S期减少，G2基本没有什么变化 问题一：这是说明药物把细胞阻滞在G1期吗？ 问题二：把细胞阻滞在G1期与G1/S期阻滞是相同的意思吗？ 问题三：想进一步通过western blot 检测cyclin确定G1期阻滞，应该检测cyclin d,还是cyclin d1呢，为什么 请大家帮忙！ sunzhihong490
