- ￥2000 - 5000
- KEMOBio
- 进口/国产
- KM0300417
- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃
- 保质期：
一年
- 英文名：
/
- 库存：
10~100
- 供应商：
科淼生物
- 规格：
25T/50T
| 规格： | 25T | 产品价格： | ￥2000.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 50T | 产品价格： | ￥5000.0 |
温州科淼生物科技有限公司(Whenzhou KeMiao Biological Technology Co.,Ltd)是一家专业从事“产品研发生产，市场销售，技术服务”为一体的高科技生物技术公司，致力于为科研实验服务，主要产品为试剂盒、抗体、蛋白、相关溶液等其他相关试剂。
PCR技术定义
聚合酶链反应技术（Polymerase chain raction ,PCR）是一种在体外扩增特定DNA片段的方法，具有特异、敏感、产率高、快速、简便、重复性好、易自动化等突出优点，可用很短时间使目的基因或某一片段扩增十万乃至几百万倍。
检测原理
PCR（Polymerase chain raction ），又称聚合酶链反应技术，是一种类似于DNA的 天然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成：
①模板DNA的变性：模板DNA经加 热至93℃左右一定时间后，使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离，使之成为单链，以便它与引物结合，为下轮反应作准备；
②模板DNA与引 物的退火(复性)：模板DNA经加热变性成单链后，温度降至55℃左右，引物与模板DNA单链的互补序列配对结合；
③引物的延伸：DNA模板--引物结合 物在TaqDNA聚合酶的作用下，以dNTP为反应原料，靶序列为模板，按碱基配对与半保留复制原理，合成一条新的与模板DNA 链互补的半保留复制链重复循环变性--退火--延伸三过程，就可获得更多的“半保留复制链”，而且这种新链又可成为下次循环的模板。每完成一个循环需 2～4分钟，2～3小时就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍。到达平台期(Plateau)所需循环次数取决于样品中模板的拷贝。
试剂盒组成
| 名称 | 50T配置 | 保存 |
|---|---|---|
| 2×Probe qPCR MagicMix | 500μL | -20℃ |
| 荧光 PCR 专用模板稀释液 | 1mL | -20℃ |
| 探针法 qPCR 引物-探针混合液 | 150μL | -20℃ |
| qPCR 阳性 对照(1×10E7 拷贝/μL) | 50μL | -20℃ |
| 说明书 | 50μL | / |
试验所需自备物品
样品DNA或RNA
操作步骤
1.稀释阳性对照制备标准曲线样品
2.制备样品DNA或RNA(可以用自选方法纯化样品的DNA或RNA，也可以咨询客服推荐)
3按照说明书制备Probe qPCR反应。
PCR程序（三步法）
第一步：94℃变性30s；
第二步（循环30-35次）：94℃变性30s，55-60℃退火30s，72℃延伸24s（时间按照合成速度和长度来计算）；
第三步：72℃终止延伸5-10min。
PCR试剂盒特点
1.操作简单，即开即用，用户只需提供样品模板；
2.专一性好，特异性强；
3.提供阳性对照，便于区分假阴性样品；
4.一管式闭管操作，降低了交叉污染；
备注：1.本公司提供各类指标的PRC试剂盒，包括染料法和探针法，另提供相关试剂。
2.需详细说明书请联系客服。
联系方式如下：
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联系电话：13997448220(同微信) QQ：1750215841
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文献和实验大肠埃希菌的简介： 大肠杆菌（Escherichiacoli，E.coli）革兰氏阴性短杆菌，大小0.5×1～3微米。周身鞭毛，能运动，无芽。能发酵多种糖类产酸、产气，是人和动物肠道中的正常栖居菌。大肠埃希菌的致病物质之一是血浆凝固酶。根据致病性的不同，致泻性大肠埃希菌被分为产肠毒素性大肠埃希菌、肠道侵袭性大肠埃希菌、肠道致病性大肠埃希菌、肠集聚性黏附性大肠埃希菌和肠出血性大肠埃希菌5种。部分埃希菌菌株与婴儿腹泻有关，并可引起成人腹泻或食物中毒的暴发。肠出血性大肠埃希菌O157
大肠杆菌（Escherichia coli，E.coli） 革兰氏阴性短杆菌，大小0.5×1～3微米。周身鞭毛，能运动，无芽。能发酵多种糖类产酸、产气，是人和动物肠道中的正常栖居菌。大肠埃希菌的致病物质之一是血浆凝固酶。根据致病性的不同，致泻性大肠埃希菌被分为产肠毒素性大肠埃希菌、肠道侵袭性大肠埃希菌、肠道致病性大肠埃希菌、肠集聚性黏附性大肠埃希菌和肠出血性大肠埃希菌5种。医学教育|网搜集整理部分埃希菌菌株与婴儿腹泻有关，并可引起成人腹泻或食物中毒的暴发。肠出血性大肠埃希菌O157：H7
大肠杆菌中毒表现： 不同的致泻性大肠埃希菌引起的中毒，症状各不相同。 ①产肠毒素性大肠埃希菌引起的中毒主要症状是水样腹泻、腹痛、恶心、低热。每天腹泻可达8～12次。 ②肠道侵袭性大肠埃希菌的中毒症状与志贺菌引起的痢疾相似，发热、剧烈腹痛、水样腹泻、粪便中有少量粘液和血。 ③肠道致病性大肠埃希菌引起的中毒主要症状是发热、不适、呕吐、腹泻、粪便中有大量粘液但无血，有约20%患者由呼吸道症状，感染的症状通常比较严重。 ④肠集聚性黏附性大肠埃希菌引起的中毒
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