两性电解质（pH6-9）

两性电解质（pH6-9）

产品储存：2-8℃、避光

产品名称：Ampholyte

产品内容：

产品说明：

两性电解质就是既能当酸又能当碱用的电解质。通常为两性元素的氧化物的水合物、氨基酸等。两性电解质在大于其等电点的 pH 环境中解离成带负电荷的阴离子，向电场的正极泳动；在小于其等电点的 pH环境中解离成带正电荷的阳离子，向电场的负极泳动。这种泳动只有在等于其等电点的 pH 环境中，即蛋白质所带的净电荷为零时才能停止。两性电解质适用于植物蛋白的等电聚焦。

凝胶溶解：

1. 30%酰胺（Acr-Bis）：30 g 酰胺+1.5 g 烯酰胺加水至 100 mL，定溶后过滤。

2. 甘-T：23mL 丙三醇+0.5 mL TRITON 加水至 100 mL。

3. 1%四甲基（TEMED）：1 mL TEMED 加水至 100 mL。

4. 1%酸铵（AP）：1 g 酸铵加水至 100 mL。

5. 顺丁烯二酸缓冲液：3.08 g 化钠+5.8 g 顺丁烯二酸加水至 100 mL。

6. 1%α-萘脂：1 g 醋酸-α-萘脂加 100 mL 正丁醇。

7. 7%冰乙酸：70 mL 冰乙酸加水至 1000 mL。

电泳操作：

（1）样品处理

浸泡：先将所需鉴定的种子浸泡一段时间，以备取胚使用。

取胚：用镊子把种子的胚取出，放入 0.5 或 1.5mL 离心管内。

研磨：在离心管内加入 0.1 mL 蔗糖提取液，然后将胚研成匀浆，放入冰箱保存。

（2）凝胶制备

1. 配制凝胶前，应把玻璃板准备好。即将两块干净的玻璃板叠放在一起，之间夹上所需凝胶厚度的胶条进行四边密封，一端留有小口用来凝胶。然后用文具夹奖玻璃板四周固定好。注意夹子作在胶条正中，以防漏胶。

2. 配制凝胶时，先将所需贮备液自冰箱中取出放置室温。

3. 将各种贮备液体按一定比例混合（见表 1）最后加入 0.5 mL 1%过铵，搅拌均匀。然后用注射器吸净混合液，排除气泡，缓缓注入玻璃板的夹隙内。

4. 将注入混合液的玻璃板静置放好，隔夜使用。

电泳：

1. 制胶板：将胶板取出，揭去上层的玻璃板和胶条，然后用蒸馏水轻轻冲洗一下胶面。

2. 点样：将浸入电极的滤纸条取出，压半较胶放在胶板上，然后放入电泳槽内，注意正负极相吻合。将电泳槽平置于冰箱内（电泳时的温度一般在 0~4℃冰箱中进行），接通电源，把电泳仪调至电压 50 V，电泳以每板胶不超过 17 mA 为准，然后开始电泳。进样时间一般在 1.5~2 小时。

3. 揭样纸：待电流降至每板胶 3 mA 以下时，切断电源取出胶板，揭去样纸 200-320V 继续电泳。

4. 加压：当电泳降至每板胶 3 mA 以下时，升高电压至 500 V，继续电泳 1.5 小时左右。

5. 电泳降至每板胶 3 mA 以下时，切断电源结束电泳。

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！