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50
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12.5% PAGE Gel Preparation Kit
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上海博尔森生物科技有限公司
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125T
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文献和实验蛋白质印迹(Western blotting)方法原理和优化
胶。例如:4-12%Tris-glycine凝胶适合于30-200KD蛋白质的分离,而10-20%凝胶则能成功地分离6-15KD的蛋白质。SDS-PAGE凝胶通常为1.0到1.5mm厚;但蛋白转印最好使用更薄的胶。 凝胶电泳缓冲液 最常见的凝胶电泳缓冲液由Tris-甘氨酸或Tris-tricine组成。缓冲液可以包含0.1%去污剂,通常是SDS。Tris-甘氨酸凝胶可用于分离很宽分子量范围(6-200KD)的蛋白质,并可与变性或非变性条件相容。Tris-tricine最适于分离小分子蛋白质(
或多或 少地影响其空间构象,使构象发生改变,空间构象有差异的单链 DNA 分子在聚丙烯酰 胺凝胶中受排阻大小不同。因此,通过非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 (PAGE),可以非常 敏锐地将构象上有差异的分子分离开。作者称该方法为单链构象多态性 (Single-Strand Conformation Polymorphism,SSCP) 分析。在随后的研究中,作者又将 SSCP 用于检查 PCR 扩增产物的基因突变,从而建立了 PCR-SSCP 技术,进一步提高了检测突变方法的简便性和灵敏性。其基本过程是:①
Nucleoprotein Protein Extraction Kit 产品说明:本试剂盒提供独特的组份,采用特殊的非离子型去污剂,以及焦磷酸钠等数种蛋白磷酸酶和蛋白酶抑制试剂,能够在非变性和低渗的条件下裂解细胞,经过洗涤去除大部分胞质蛋白和膜蛋白,释放的细胞核能够保持完整,再用Lysis Buffer对细胞核蛋白质进行抽提的同时可以保持核蛋白质的活性,因此该产品可合适用于SDS-PAGE电泳、Western Blot、免疫共沉淀,EMSA,Pull Down, 转录调控等后续蛋白质或分子生物学相关实验
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