非变性Tris-乙酸-PAGE凝胶制备试剂盒

手把手教你跑的一手好胶

通常跑胶分为跑琼脂糖胶和 SDS-PAGE 胶，当然也还有非变性胶，这里主要说明上面两种。琼脂糖凝胶电泳一、原理琼脂糖是 D - 和 L - 半乳糖残基通过糖苷键交替构成的线状聚合物，且琼脂糖凝胶具有三维网络结构，物质分子通过时会受到阻力，不同的大小的带电物质在电场下涌动时受到的阻力不同，因此在凝胶电泳中，带电颗粒的分离不仅取决于净电荷的性质和数量，而且还取决于分子大小，这就大大提高了分辨能力。一般用于分离核酸分子，同时不同构象的核酸的迁移速率也不一样，超螺旋环状＞切口环状＞线状。不同浓度的胶

蛋白质印迹（Western blotting）方法原理和优化

胶。例如：4-12%Tris-glycine凝胶适合于30-200KD蛋白质的分离，而10-20%凝胶则能成功地分离6-15KD的蛋白质。SDS-PAGE凝胶通常为1.0到1.5mm厚；但蛋白转印最好使用更薄的胶。 凝胶电泳缓冲液 最常见的凝胶电泳缓冲液由Tris-甘氨酸或Tris-tricine组成。缓冲液可以包含0.1%去污剂，通常是SDS。Tris-甘氨酸凝胶可用于分离很宽分子量范围（6-200KD）的蛋白质，并可与变性或非变性条件相容。Tris-tricine最适于分离小分子蛋白质（

非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳

? 非变性的PAGE buffer就是0.5xTBE,上样缓冲液可以用普通的loading buffer,含有Tris,溴芬兰以及甘油即可,甘油是主要的沉淀作用成分.都可以自己配.细胞超声即可,超声后离心取上清.也有配NATIVE-PAGE gel所用buffer为1*TBE,用的running buffer也是1*TBE.还有一点就是要在配gel时考虑能使蛋白多聚体稳定的因素. 4、做了naive---PAGE没有条带,蛋白质是纯品,分子量很大,怎么回事呢? 因为分子