- ￥618
- 博尔森/BIOESN
- BES21354KB
- 中国
- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
50
- 英文名：
Lowry Protein Assay Kit
- 保质期：
12 个月
- 供应商：
上海博尔森生物科技有限公司
- 保存条件：
-20℃
- 规格：
1000T
Lowry法蛋白浓度测定试剂盒
储存条件：BSA 蛋白标准液-20 ℃保存，其它室温保存，保质期 12 个月。
产品内容：
产品说明：
Folin 酚试剂法包括两步反应：第一步是在碱性条件下，蛋白质与铜作用生成蛋白质-铜络合物；第二步用此络合物还原 Folin 试剂，样品溶液变为深蓝色，颜色深浅与蛋白质含量成正比。蛋白质定量范围为5-100 μg/mL。Folin 试剂显色反应由酪氨酸、色氨酸和半胱氨酸引起，因此样品中若含有酚类、柠檬酸和巯基化合物均有干扰作用。此外，不同蛋白质因酪氨酸、色氨酸含量不同而使显色强度稍有不同。
使用说明：
制备工作液
1. 根据用量，取适量 Folin 酚甲试剂 A 和 Folin 酚甲试剂 B 按 50:1 混合，即为 Folin 酚甲试剂，有效期 24小时。
2. 根据用量，取适量 BSA 标准液，用 PBS 稀释液稀释 10 倍至浓度 0.5 mg/mL，即为 BSA 蛋白标样。试管法（分光光度计法）
1. 将 BSA 蛋白标准样按 0、2、4、6、8、12、16、20 μL 加到 96 孔板中，加 PBS 稀释液补足到 20 μL。
2. 将蛋白样品作适当稀释（建议多做几个梯度），加 20 μL 到 96 孔板中。
3. 将配好的 Folin 酚甲试剂每孔加入 200 μL，轻轻震动混匀，室温放置 10 min。
4. 每孔加入 Folin 酚乙试剂 20 μL，迅速混匀，室温放置 30 min。用酶标仪测定 A650 光度值，绘制标准曲线并计算蛋白浓度。
注意事项：
1. Folin 酚乙试剂只在酸性条件稳定，故当其加到碱性的铜-蛋白质溶液中时，必须立即混匀，以便在磷钼酸-磷钨酸试剂被破坏前，还原反应即能发生。
2. 为了保证反应进行完全，反应可在 25-30 ℃水浴中进行，反应 30 min 后准时比色。
3. 还原物质会干扰本实验。
4. Lowry 法的呈色物质组成尚未确定，它在红外区呈现较宽吸收峰。在 550-750 nm 间吸光度均与蛋白质浓度成正比。
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文献和实验文献中常用的分离外泌体的方法主要是超离法和试剂盒法，那这两种方法研究人员该如何选择呢？为了解决大家的疑惑，我们专门做了对比实验进行阐述。 四、超速离心法与试剂盒法比较 （一）实验分组和开展实验确定： 此实验共分为 3 组，每组设置 2 个重复，所选原始样本是 293T 细胞培养上清。 组1：超离法分离（UC-1，UC-2）； 组2：使用某国外试剂盒 SXX（SXX-1，SXX-2）； 组3：使用某国内试剂盒 UXX（UXX-1，UXX-2）。 开展
目前常用比色法测定样品蛋白的含量：Bradford法（考马斯亮蓝法）、Lowry法（Folin-酚试剂法）、 BCA法等。但各有优缺点，大家可以根据具体情况选取。按相应蛋白质定量试剂盒操作说明操作，测定样品浓度。收集完蛋白样品后，为确保每个蛋白样品的上样量一致，需要测定每个蛋白样品的蛋白浓度。根据所使用的裂解液的不同，需要采用适当的蛋白浓度测定方法。因为不同的蛋白浓度测定方法对于一些去垢剂和还原剂等的兼容性差别很大，大家可以根据具体情况选取。Bradford法（考马斯亮蓝法）:考马斯亮蓝G
不管是临床医生和科研工作者，我觉得二者的共同敌人都是一致的，那就是时间。作为一个临床医生，没（zen）事（me）儿（ke）的（neng）时候搞搞科研，必须想尽一切办法对付（挤出）时间。在开始 WB 之前的蛋白定量耗费时间有点长，如果用 BCA 法的话光孵育就需要半个小时，整个过程耗时接近 1 小时。因此为了配合快速 WB，我们同样需要一个快速蛋白定量的方法。因此今天我们来聊聊如何 1 分钟测出蛋白浓度。蛋白定量法开始之前我们有必要复习一下理论知识。蛋白定量至少有 5 种方法： BCA
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