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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 形态:
Liquid
- 保存条件:
负20℃
- 标记物:
FITC标记
- 适应物种:
Homo sapiens (Human)
- 保质期:
Aliquot and store at -20ºC for 12 months
- 应用范围:
WB; IHC; ICC; IF.
- 浓度:
200μg-1mg/ml
- 抗体英文名:
FITC-Linked Polyclonal Antibody to Fibroblast Growth Factor 2, Basic (FGF2)
- 规格:
20-100μl
[ PROPERTIES ]
Source: Antibody labeling
Purification: Antigen-specific affinity chromatography followed by Protein A affinity chromatography
Label: HRP
Original Antibody: Rab(P)12288
Traits: Liquid
Concentration: 0.5mg/ml
UOM: 200μl
Cross Reactivity: Mouse; Rat
Applications: WB; IHC; ICC.
[ APPLICATIONS ]
Western blotting: 0.5-3μg/mL
Immunohistochemistry: 5-30μg/mL
Immunocytochemistry: 5-30μg/mL
Optimal working dilutions must be determined by end user.
[ FORMULATION ]
Form & Buffer: Supplied as solution form in 0.01M PBS, pH7.4, containing 0.05% Proclin-300,
50% glycerol.
[ STORAGE AND STABILITY ]
Storage: Avoid repeated freeze/thaw cycles.
Store at 4ºC for frequent use.
Aliquot and store at -20ºC for 12 months.
公司所有产品仅供科研,不作临床诊断、医药或者其他用途。
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文献和实验(一) 原理 目前用于抗体标记的荧光素主要有异硫氰酸荧光素(Fluorescein isothiocynate,FITC)或罗 达明(Lissamine rhodamine B200, RB200)。在硷性条件下FITC的碳酰胺键可与抗体赖氨酸的ε 氨基共价结合,标记后的抗体仍保持与相应抗原结合的能力。在荧光灯源紫外线或兰紫光 激发下产生黄绿色荧光,通过在荧光显微镜下观察或流式细胞仪分析可对相应抗原进行定 性、定位或定量
的机理如下: 连接反应进行的条件: (1)Buffer体系。上述两个连接反应都应该在碱性环境下进行。pH宜在8-10之间,推荐使用Na2CO3-NaHCO3体系,pH尽量偏离蛋白的等电点,但不可高于10,否则填料很容易水解。pH也不能过低,否则抗原的氨基或巯基会被质子化,无法与beads结合。也可以考虑用其它的缓冲体系,但是绝对不可引入带有游离氨基或者巯基的化合物。为了防止蛋白类抗原的聚集,体系中还可以加入0.5M NaCl以提高盐离子浓度。 (2)蛋白质浓度
蛋白质印迹分析(Western Blot Analysis)
缓冲溶液中,转移时间可从45分钟延长到过夜进行。 由于湿法的使用弹性更大并且没有明显浪费更多的时间和原料,因此我们在这里只描述湿法的基本操作过程。 对于目的蛋白的识别需要采用能够识别一抗的第二抗体。该抗体往往是购买的成品,已经被结合或标记了特定的试剂,如辣根过氧化物酶。这种标记是利用辣根过氧化物酶所催化的一个比色反应,该反应的产物有特定的颜色且固定在固相载体上,容易鉴别。因此可通过对二抗的识别而识别一抗,进而判断出目标蛋白所在的位置。其他的识别系统包括碱性磷酸酶系统和 125
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