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- 博尔森/BIOESN
- BES21191KB
- 中国
- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
50
- 英文名：
CTAB Solution（RNase free）
- 保质期：
2年
- 供应商：
上海博尔森生物科技有限公司
- 保存条件：
常温
- 规格：
500mL
CTAB裂解液（RNase Free）
储存条件：常温保存，保质期 2 年。
产品内容：
产品说明：
CTAB(hexadecyltrimethylammonium bromide,十六烷基三甲基溴化铵)，是一种阳离子去污剂,具有从低离子强度溶液中沉淀核酸与酸性多聚糖的特性。在高离子强度的溶液中(0.7mol/L NaCl),CTAB 与蛋白质和多聚糖形成复合物，只是不能沉淀核酸.通过有机溶剂抽提，去除蛋白、多糖、酚类等杂质后加入乙醇沉淀即可使核酸分离出来。
使用方法：
一、试剂准备
1、氯仿-混合液(24:1)。96mL 氯仿加 4mL 混匀（自备或购买套装）。
2、65℃预热 CTAB 提取液。每 15mL CTAB 提取液加入 300uL 的还原剂。
3、无水乙醇。
二、操作步骤（需要两天时间）
1、离心管中加入 15mL 预热的 CTAB 提取液（已加入 300uL 还原剂）。
2、液氮研磨 2-3 g 植物组织，转移到 CTAB 提取液中，涡旋震荡 1min 后置于 65℃ 水浴中 5 min。
3、水浴完成后冷却 2min，加入 15 mL 的氯仿-混合液，剧烈震荡混匀。9,000 rmp 离心 15 min。
4、取上步离心管中上清液到新的离心管中，加入 15 mL 的氯仿-混合液，剧烈震荡混匀。9,000 rmp离心 15 min。
5、取上步离心管中上清液到新的离心管中，加入等体积的 4M LiCl（终浓度 2M），4℃沉淀过夜（12-16h）。
6、9,000 rmp，4℃离心 60 min 沉淀 RNA，弃上清。
7、在沉淀中加入 500 uL 的 70% 乙醇洗涤沉淀，9,000 rmp 离心 10 min，弃上清。
8、在沉淀中加入 500uL 的 SSTE 溶解沉淀，转移至 1.5mL 的离心管中，加入 500uL 的氯仿-混合液，震荡混匀，12,000 rmp 离心 1min，将上清小心转移至新的离心管中。
9、在上清中加入 1/10 体积的 3M 乙酸钠溶液，2 倍体积的无水乙醇，置于-20℃沉淀 2h 或-80℃沉淀 30min。
10、沉淀用 400uL 的 70%乙醇洗涤沉淀，12,000 rmp 离心 5min，小心吸弃上清，再加入 400uL 无水乙醇（无需吹打），12,000 rmp 离心 5min 后，小心吸弃上清。
11、乙醇挥发，RNA 干燥后加入 50-100 uL DEPC 水溶解 RNA。电泳检测后置于-80℃保存。
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