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- QIAGEN/凯杰
- 原装进口
- 301705
- 2026年01月05日
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- 详细信息
- 文献和实验
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- 保质期：
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- 英文名：
HiPerFect Transfection Reagent (1 ml)
- 库存：
以实际库存为准
- 供应商：
QIAGEN/凯杰
- 规格：
(1 ml)
特点
- 低浓度条件下的siRNA高效转染
- 高效转染原代细胞，细胞存活率高
- 高效转染悬浮细胞和巨噬细胞
- TransFect Protocol Database中有针对特殊细胞类型的实验方案
- 高效转染miRNA模拟物或抑制剂
产品详情
绩效
各种悬浮细胞系以及分化和未分化的巨噬细胞已进行过检测，通过使用HiPerFect Reagent进行siRNA转染检测。许多细胞系可成功转染，并有效敲减靶基因表达（见表1）。使用HiPerFect Reagent转染对于一些需电穿孔转染的细胞类型来说是最佳选择。
| 细胞系 | 细胞类型 | siRNA的浓度 | 敲减 |
|---|---|---|---|
| K562 | 人慢性髓性白血病 | 5 nM | 85% |
| Jurkat | 人T细胞 | 75 nM | 83% |
| D1.1 | 人T细胞 | 50 nM | 84% |
| RAW 264.7 | 小鼠巨噬细胞 | 25 nM | 77% |
| J774.A1 | 小鼠巨噬细胞 | 50 nM | 97% |
| PMA-differentiated THP-1 | 人急性单核细胞白血病 | 5 nM | 82% |
| MEL | 鼠红白血病 | 5-20 nM | 50-70% |
HiPerFect Reagent不适合转染的细胞系（见表2）。
| 细胞系 | 细胞类型 |
|---|---|
| Raji | 人B细胞 |
| U937 | 人巨噬细胞 |
| Molt4 | 人T细胞 |
| Molt14 | 人T细胞 |
| HL60 | 早幼粒细胞系 |
| E6.1 | 人T细胞 |
当siRNA的浓度在1–50 nM之间时，可有效敲除（>80%）（参见" HiPerFect Reagent provides effective CDC2 knockdown"）。使用1 nM siRNA转染的敲除率为86%，而5 nM siRNA转染的敲除率可达96%。最佳的siRNA使用浓度为1 nM（最少的脱靶效应并有效敲除，参见" Efficient transfection of NHEK"）或5 nM（更高的敲除效率）。
原理
siRNA转染可能发生脱靶效应，即siRNAs影响非同源或部分同源靶基因的表达，但在很大程度上可通过使用低浓度的siRNA避免。使用HiPerFect Transfection Reagent，可高效的转染和沉默基因，在某些情况下可使用10 pM siRNA。使用HiPerFect Transfection Reagent可在很宽的siRNA浓度范围内高效转染siRNA，可使研究者选择他们所需的siRNA浓度。可用于转染多种类型的细胞，包括：HeLa、HeLa S3、HEK 293、NIH/3T3、Huh-7、HepG2、MCF-7、HUVEC和NHLF。
miRNA研究
micro RNAs（miRNAs）是一类内源性小分子RNA，与siRNAs特点相同。miRNAs在多种生物过程中有重要作用，如生长、分化和调亡。转染合成的miRNA模拟物和抑制剂，是一种用于解释特定miRNAs的靶标和作用的技术。miRNA模拟物是一种化学合成的miRNAs，模拟转染细胞的自然产生的miRNAs。miRNA抑制剂是一种单链修饰RNAs，能够特异性抑制miRNA的功能。转染miRNA模拟物抑制基因的表达，或转染miRNA抑制剂增强基因的表达，由此证明目的miRNA调节该基因的表达。而且，miRNAs在各种信号通路中的作用也可通过检查转染miRNA模拟物或抑制剂后特异性的基因表型来确定。筛查实验也可通过检查转染大分子量miRNA模拟物或混合物后的基因表型来进行。HiPerFect Transfection Reagent用于真核细胞siRNA的高效转染，也可用于miRNA模拟物或抑制剂的低通量或高通量转染。
程序
HiPerFect Transfection Reagent是一种即用型溶液，只需将其加入已稀释的siRNA/miRNA溶液、混合、孵育并将混合物转移到细胞即可。转染可在有血清的条件下进行，无需去除细胞中的其他物质。除了HiPerFect Transfection Reagent Handbook中的实验方案，您可以在TransFect Protocol Database中找到适合您的细胞类型和培养瓶/培养皿的实验方案。该数据库提供您所需的确切的实验方案，而不是调整已有的实验方案，节省时间和精力。只需输入细胞类型、核酸和培养瓶的类型即可打印或下载QIAGEN转染实验方案的PDF格式。TransFect Protocol Database是免费的，且无需注册。
HiPerFect Transfection Reagent转染，可使用常规的转染步骤，在转染前24小时种细胞。同时也提供使用96孔板和384孔板反转染的实验方案（见HiPerFect Transfection Reagent Handbook）。这些实验方案，可在同一天种细胞和进行转染。加入HiPerFect Reagent后，将siRNA/miRNA加入孔中。混合均匀后，将细胞加入孔中（参见" Reverse transfection using HiPerFect Transfection Reagent"）。反转染实验方案快速、方便、可实现自动化，通常用于高通量实验。
应用
即使siRNA浓度较低，HiPerFect Transfection Reagent也能够高效进行siRNA转染，适合多种应用，如：
- RNA干扰研究
- miRNA研究
- 基因表达和功能研究
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文献和实验使用，不要用于其它实验。【试剂配制】用于RNA实验的试剂，须使用干热灭菌（180℃，60分钟)或使用上述方法进行DEPC水处理灭菌后的玻璃容器盛装(也可以使用RNA实验用的一次性塑料容器)，使用的无菌水须用0.1%的DEPC处理后再进行高温高压灭菌。RNA实验用的试剂和无菌水都应专用，避免混用后交叉污染。2. 实验样品的研磨和匀浆。 A. 贴壁培养细胞 ① 倒出培养液，用1×PBS清洗一次。 ② 每10 cm2 生长的培养细胞中加入2 ml的RNAiso Reagent，水平放置片刻
Cationic Liposome-Mediated Transfection with Lipofectin Reagent
Since their original description, liposomes have been discussed as vehicles that could be used as carriers of pharmaceutically active agents (1 ), and their potential for use as carriers of genetic information has been examined
isolated from the other components. PCR products should be analyzed in an area separate from the reaction assembly area. 1) Add the following components to a sterile 0.5-mL microcentrifuge tube on ice: 2) Cap the tubes and centrifuge briefly
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