粪便样品DNA保存液

粪便样品DNA保存液

保存：室温保存，保质期 3 年。

产品内容：

产品简介：

粪便样品 DNA 保存液可以在室温条件下保存 DNA 样品。它能迅速渗入细胞内，通过抑制 DNase 的活性而达到保护 DNA 的完整性的目的。

适用于不能及时进行 DNA 提取的粪便样品的采集。

保存液使用方法：

一：批量自采：

1：采便管准备

1）患者采样盒中包括：采便管 2 管（每管装有 7.5ml 保护液以及 6-8 颗玻璃珠），冰袋 3 个。

2）患者回家后，需将冰袋放入冰箱冷冻层，并在送样当天进行采便。

2：采便方式：

1）准备一张纸在排便时将大便与便池水隔绝；

2）采便时取中部未沾染便池水和尿液的大便；

3）用采便管中的小勺挖取粪便，放入采便管中，盖紧管盖，放入采样盒中；

注意：2 个采便管都需要挖取粪便，每管挖取 3-4 勺粪便；

4）从冰箱冷冻层中取出冻好的冰袋，放入蓝色采样盒中，以保持样品低温环境，并尽快送回医院。

二：少量自采

1：在粪便样品中加入 3-5 倍体积的粪便样品 DNA 保存液。

保存时间说明：

1:实测粪便样品 DNA 保存液，于 4℃可稳定保存 DNA 15-30 天；于室温（≤30℃）可稳定保存 DNA 7-15天。

2:如需长期保存，可在粪便 DNA 提取步骤 3 中弃上清后直接-20℃或-80℃长期冻存。

粪便 DNA 提取：

1：取 200μL 样品匀浆至拧盖的 2mL 离心管。

样品匀浆制备：

1）将采便管用用漩涡震荡器，混匀至无块状；

2）用 1mL 注射器接 1mL 枪头搅拌；

3）枪头（1mL）减去 1cm 左右，吸之前摇匀，尽量吸取内容物，否则提取的 DNA 量过少；

2：加入 1 mL PBS，用旋涡振荡器混合均匀，离心（15000rpm,5min,4℃） 。

3：弃 1mL 上清，重复 2 一次。

4：弃 950μL 上清后，加入 300μL Tris-SDS,500μL Tris-饱和酚，移入已加入 0.33-0.35g 玻璃珠（φ0.1mm）的 2mL 圆底离心管中。

5：震荡呈乳白色，在均质(Beat-Bitter)中均质 45s，离心（15000rpm,5min,4℃）。

6：将上层悬浊液 400μL（2×200）转移到一个新的离心管中（圆头），加入 200μL Tris-酚，200μL 氯仿/异丙醇（24：1）注：中间白色为变性蛋白相不能碰。

7：手摇（10-20 次）（上下颠倒即可，轻柔），混匀呈白色，离心（15000rpm,5min,4℃）。

8：将 250μL（2×125）上层悬浊液转移到新的 1.5mL 离心管中，加入 25μL 3M 的乙酸钠（pH=5.2）,加入

300μL 异丙醇，手摇混匀后离心（15000rpm,5min,4℃）。-20℃静置 20min. 9： 弃上清 （直接倒掉即可），加入 500μL 70% 乙醇，手摇混匀，离心15000rpm,5min,4℃）。

10：弃上清（直接倒掉即可），离心（12000rpm,1min,常温），用枪头（斜）吸去多余液体，开盖，室温干燥 15min。

11：加入 100μL TE, 5μL RNA 酶，轻弹混匀，小离心机轻微离心（到 6000rpm 立即停止），37℃恒温箱静置 10min. 12：测定浓度及电泳。

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！