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- 文献和实验
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-20℃ to -80℃
- 保质期:
12个月
- 英文名:
Human HDAC6 Gene ORF cDNA clone expression plasmid, C-GFPSpark tag
- 库存:
99
- 供应商:
北京义翘神州科技股份有限公司
- 规格:
1 Unit
基因靶点:Hdac6
反应种属:Human
应用说明:Stable or Transient mammalian expression
GeneBank ID:BC069243.1
序列长度:4377
载体:pCMV3-C-GFPSpark
cDNA描述:Full length Clone DNA of Human histone deacetylase 6
标签序列:GFPSpark: GTGAGCAAGGGC……GAGCTGTACAAG
酶切位点:HindIII + XbaI(6kb+4.38kb)
质粒:pCMV3-HDAC6-GFPSpark
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文献和实验表观遗传修饰:想要改变基因表达?不只有 DNA,染色体也可以!
Section.01 表观遗传学 表观遗传学 (Epigenetics) 是指研究通过改变染色体而非 DNA 序列而产生的、可遗传且稳定的基因表达变化的学科。 表观遗传的机制是通过 DNA 碱基的化学修饰和染色体超结构的改变来调节基因表达。表观遗传学的图谱日益复杂,它不仅包含 DNA 甲基化、组蛋白密码、非编码RNA (ncRNA) 和核小体定位,还与 DNA 序列共同构成一个完整的调控体系。表观遗传图谱的紊乱与多种人类疾病的发病机制紧密相关[1]。 图
决定簇标记进行原位固定。这种方法既不需要对不同的蛋白分别进行表达和纯化,又可以在使用前才产生蛋白,从而解决了保持蛋白稳定的难题。具体说,为了既能够附着DNA,又能够保持DNA的构向以利于转录和翻译,研究者利用紫外线将补骨脂素-生物素(psoralen-biotin)和DNA表达质粒接合在一起。而且,每一个被表达的蛋白的碳端都标记了一个谷胱甘肽S- 转移酶(Glutathione S-transferase,GST),能够通过和预先印记在表达质粒旁边的GST抗体作用,从而使表达的蛋白固定在阵列
从新鲜的培养基上挑选单克隆,少量培养后,2000倍稀释大量培养。 含有疏水基团的重组蛋白往往对宿主菌有毒性。因此,除非有特殊的意义,应当去除插入片段中编码信号肽序列或穿膜区的序列。然而,也有少数包含信号肽的蛋白可以在膜间质少量的表达。这种情况下,建议诱导前培养温度降低为25度。 有些蛋白,尤其是小于10KDa的蛋白在E. coli中不稳定,可能很快被细菌中的蛋白酶降解。克服这种困难的方法包括:降低培养温度到30度;使用一种或多种蛋白酶缺陷的宿主菌;使用QIAGEN公司的表达质粒pQE
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