- ￥1770
- Sino Biological
- 北京
- HG25445-CF
- 2025年08月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃ to -80℃
- 保质期：
12个月
- 英文名：
Human ARHGAP28 Gene ORF cDNA clone expression plasmid, C-Flag tag
- 库存：
99
- 供应商：
北京义翘神州科技股份有限公司
- 规格：
1 Unit
基因靶点：ARHGAP28
反应种属：Human
应用说明：Stable or Transient mammalian expression
GeneBank ID：NM_001010000.2
序列长度：1752
载体：pCMV3-C-FLAG
cDNA描述：Full length Clone DNA of Human Rho GTPase activating protein 28
标签序列：FLAG Tag Sequence: GATTACAAGGATGACGACGATAAG
酶切位点：KpnI + XbaI(6kb+1.75kb)
质粒：pCMV3-ARHGAP28-t1-Flag
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文献和实验作为细胞生物学专业的博士生，在基因功能研究上已经有五年的经验了，今天我给大家讲讲其中经常用到并且非常重要的一种技术--慢病毒包装的过表达体系。下面我就从引物设计，慢病毒表达质粒构建等方面详细讲述。下面以 plex-MCS 载体为例。1. 选择酶切位点，为了避免移码突变，上游的酶切位点选择起始密码子 ATG 前面的 spel，下游选择 xho1。2. 构建方法的选择。连接法对于连接法，首先设计引物将目的基因 PCR 出来，即酶切位点加基因引物，此时应注意，为了防止酶切将基因破坏，通常习惯在两端
酶位点)和Linker（102bp）序列。NusA可以让超过95%的外源蛋白获得可溶性的原核表达，但NusA不具有氧化性，分子伴侣的功能比较低。 四，真核表达质粒 PVAX1，pEGFP-N2，pGL-3control，pMir-reportpCMV-Myc在哺乳动物细胞中表达C端和Myc tag(Myc标签)融合的目的蛋白的表达质粒。QQ:2864609
从新鲜的培养基上挑选单克隆，少量培养后，2000倍稀释大量培养。 含有疏水基团的重组蛋白往往对宿主菌有毒性。因此，除非有特殊的意义，应当去除插入片段中编码信号肽序列或穿膜区的序列。然而，也有少数包含信号肽的蛋白可以在膜间质少量的表达。这种情况下，建议诱导前培养温度降低为25度。 有些蛋白，尤其是小于10KDa的蛋白在E. coli中不稳定，可能很快被细菌中的蛋白酶降解。克服这种困难的方法包括：降低培养温度到30度；使用一种或多种蛋白酶缺陷的宿主菌；使用QIAGEN公司的表达质粒pQE
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