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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
50
- 英文名:
PEG/LiAC Transformation Solution
- 供应商:
上海博尔森生物科技有限公司
- 保存条件:
2-8℃
- 规格:
5mL /100mL/50mL/5mL×10
| 规格: | 5mL | 产品价格: | ¥188.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 100mL | 产品价格: | ¥938.0 |
| 规格: | 50mL | 产品价格: | ¥578.0 |
| 规格: | 5mL×10 | 产品价格: | ¥698.0 |
酵母转化PEG/LiAC混合液
一、使用方法:
1.5mL体系:
1. 在含有约100ng质粒的1.5mL无菌离心管中,加入5uL预变性的 Carrier DNA,50uL酵母感受态细胞,500uL LiAc/PEG3350混合液轻柔混匀。
2. 30℃水浴30 min,每10 min 混匀一次。
3. 每管加入20 uL DMSO,轻柔混匀。
4. 42℃水浴热激15 min,每5 min上下颠倒混匀一次。
5. 700 g离心5min。
6. 弃掉上清,用1 ml YPD Plus液体培养基重新悬浮,30℃摇床震荡培养30-60min。
7. 700 g 离心5min。加入1mL无菌0.9%NaCl重悬菌体。
8. 分别稀释10倍,100倍后涂布于相应的缺陷型培养基上。
9. 30℃恒温培养3-5天。
15mL体系:
1. 在含有约5-15ug质粒的15mL无菌离心管中,加入20uL预变性的 Carrier DNA,600uL酵母感受态细胞,2.5mL LiAc/PEG3350混合液轻柔混匀。
2. 30℃水浴 45 min,每10 min 混匀一次。
3. 每管加入160uL DMSO,轻柔混匀。
4. 42℃水浴热激20 min,每5 min 上下颠倒混匀一次。
5. 700 g 离心5min。
6. 弃掉上清,用3 ml YPD Plus 液体培养基重新悬浮,30℃摇床震荡培养90min。
7. 700 g 离心5min。加入15mL无菌0.9%NaCl重悬菌体。
8. 分别稀释10倍,100倍后涂布于相应的缺陷型培养基上。
9. 30℃恒温培养3-5天。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
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文献和实验, resuspend in 2 ml 1 x LiAc/ 0.5 x TE incubate at RT for 10 min combine in tube: 100 µl cells, 10 µl salmon sperm DNA (10 mg/ml), up to 15 µl DNA to be transformed add 700 µl 1 x LiAc / 1 x TE / 40 % PEG mix incubate for 30 min
High Efficiency Yeast Transformation (Gietz Long Protocol)
and remove the LiAc with a micropipette. 11. The basic "transformation mix" consists of: 240 µl PEG (50% w/v) 36 µl 1.0 M. LiAc 50 µl SS-DNA (2.0 mg/ml) X µl Plasmid DNA (0.1 - 10 µg) 34-X µl Sterile ddH2O 360 µl TOTAL Carefully add these ingredients
Yeast Transformation Using Frozen Competent Cells and Single-stranded DNA as a Carrier
2-3 more doublings.) Note: The cells must be grown in glycerol if you are going to freeze them. Glucose-grown cells lose competence upon freezing. 2. Pellet cells gently (~800 x g). Resuspend in 7-8 ml of 1X TE-LiAc . 3. Pellet cells gently. Resuspend in 1 ml
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