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- 博尔森/BIOESN
- BES2AC5040
- 中国
- 2025年07月13日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
50
- 英文名：
Yeast Nucleoside diphosphokinase
- 保质期：
3年
- 供应商：
上海博尔森生物科技有限公司
- 保存条件：
-20°C
- 规格：
1000U
酵母核苷二磷酸激酶
描述：核苷二磷酸激酶(Nucleoside diphosphate kinase, NDPK) 催化腺苷三磷酸（ATP）和核苷二磷酸（NDP） 之间高能磷酸基团的转移，在体内负责合成除 ATP 以外 的其它核糖核苷酸的生成。由二核糖核苷酸生成三核糖核 苷酸：(d)XDP+(d)YTP(d)XTP+(d)YDP。另外,该酶还 具有 NDP 激酶活性和蛋白磷酸转移酶活性,并参与转录 调控和信号转导。该蛋白来源于 S. cerevisiae，通过重组 表达而得。
活性定义： 每单位指 37 度条件下，在 ATP 存在条件下每分钟转化 1.0 μmol TDP 到 TTP 所 需 酶 量 。 该 酶 比 活 为 2X10e5U/mg，制品浓度约 200 ng/μl。
储存：-20℃可保存 3 年。
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文献和实验由 T偶数噬菌体所感染的大肠杆菌分离出来的酶，能催化 ATP的γ -磷酸转移到 DNA或 RNA的 5′ -OH末端生成 ADP的反应。 EC2． 7． 1． 78。因为此酶的催化反应特异性很高，可用 32 P标记的 ATP特异地标记多核苷酸的 5′末端。广泛应用于多核苷酸的链长的测定和 5′末端核苷酸排列的确定等核酸结构的研究。
用 T4 标记的 5’ 末端 1． 无菌的 1.5ml 为了离心管置冰浴上顺序混合下列组分： 50 pmol 合成的寡核苷酸 2.5 μ l 10 ×反应缓冲液 10 μ l γ -[32 P]ATP （ 33pmol ） 1.5 μ l T4 多核苷酸激酶（ 15U ） 灭菌双蒸水加至 25 μ l 2． 37 ℃温育 30min 。 3． 当反应物正温育时，以 2000 × g 离心 2min 制备
32 P]ATP(比活度5000Ci/mmol;10mCi/ml水溶液)(10pmol) 5.0 μl水 11.4 μl 10xT4噬菌体多核苷酸激酶缓冲液 0.5mol/L Tris.Cl(pH7.6) 0.1mol/L MgCl2 50mol/L 二硫苏糖醇(DTT) 1mol/L 盐酸亚清胺 1mol/L EDTA(pH8.0)充分混匀，在一装有10 μl 10mol/L Tris.Cl(pH8.0)的反应管内加入0.5 μl上述反应混合液，搁置一旁留备步骤3）中
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