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文献和实验真香!用 qPCR 做外泌体研究,南京医科大学拿下 41 分 SCI
方法 1. 外泌体 RNA 如何提取? 外泌体 RNA 可以用专用的外泌体 RNA 提取试剂盒提取,也可以用 Trizol 法提取,建议 Trizol 与外泌体的体积比不小于 4:1(也可以用 Trizol 直接裂解外泌体沉淀)。 2. 外泌体 RNA 如何定量? 外泌体 RNA 含量很低,不建议使用微量紫外分光光度计定量,可以使用 Agilent 2100 生物分析仪等定量,也可以直接按最大体积进行逆转录实验。 3. 外泌体做 qPCR 检测应该选什么参照? 外泌体没有通用的内参选择,可以使用外参(cel
、 实验流程 1、 总DNA提取 使用DNA提取试剂盒提取植物基因组DNA,通过紫外分光光度计检测或用标准品跑胶检测。一般来说,100ng的基因组DNA作为反应模板是足够的。 2、 EcoR1酶消化(20ul体系/样品) 3、Mse1酶消化(20ul体系/样品) 5、 预扩增(20ul体系/样品) sample 4ul Primer
一、原理在酸性条件下( pH4.5),非1gG的蛋白成份(包括白蛋白,部分Ig),能被辛酸等短链脂肪酸沉淀,上清中剩余的蛋白主要为IgG,再用硫酸铵沉淀上清,即可获得纯度较高的IgG。辛酸/硫酸铵法比硫酸铵法能够获得更高纯度的IgG。二、材料与方法1、材料(1)动物腹水(2)辛酸(caprylic acid,CA),化学纯(3)硫酸铵,分析纯(4)SPA Sepharose 4FF亲合层析柱2、操作方法(1)蛋白含量测定紫外分光光度法测样品在波长260nm,280nm处的I及收光度(A 260
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