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- 2025年07月12日
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建立永生化细胞株
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1g;5g;10g
正常组织来源的细胞,体外常规培养条件下,经过有限次的细胞传代后,就会停止增殖,发生衰老和死亡,这给进一步研究细胞的生物学特性带来了极大限制。因此,建立永生化细株不羁成为研究者的必然选择,利用病毒或质粒基因转染技术建立永生化细胞株,使体外培养的细胞具有无限增殖能力且细胞集群的表型并无明显差异并可完成上述目标的达成。
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文献和实验一、试剂 1. 淋巴细胞分离液：避光4度保存，用前在37度水浴中加温。整个分离过程中，温度应控制在8-28度，温度过高或过低均影响分离质量。 2. 全培养基（用前配置）：RPM1640培养基，内含20%胎牛血清（Gibco）{56 ℃灭活30分钟}，1.6-1.8% 1M的HEPES，1.2% 0.2 mol/L谷氨酰胺，1%青霉素和链霉素。 3. 环胞酶素A（CyA）：5 ml(250 mg)/瓶，用1640培养基稀释成0.2 mg/ml，使用时
Stem Cell Rep：北大向宽辉/时艳/李彤等利用干细胞分化技术建立静息态肝星状细胞，可体外模拟早期肝纤维化过程
的遗传背景差异大）和细胞处于激活状态（原代分离存在机械剪切和酶解处理）等诸多因素限制，不能大规模用于实验，特别是无法研究肝星状细胞在肝纤维化早期是如何活化的机制。体外构建的永生化细胞由于存在基因表达和信号通路异常，染色体异常和处于激活状态等原因也不能满足实验需求。干细胞分化技术可以克服这些问题。因此，利用干细胞分化技术体外构建出处于静息状态，来源充足和遗传背景一致性好的 HSCs 具有重要意义。 2022 年 10 月 20 日，北京大学基础医学院庄辉/李彤/向宽辉研究组和邓宏魁/时艳研究
日前，北京大学生命科学学院魏文胜课题组在 Cell 杂志上在线发表题为“Circular RNA Vaccines against SARS-CoV-2 and Emerging Variants”的研究论文。 魏文胜团队首先建立了体外高效制备高纯度环状 RNA 的技术平台，针对新型冠状病毒及其变异株，设计了编码新冠病毒刺突蛋白（Spike）受体结构域（RBD）的环状 RNA 疫苗。 该项研究中制备的针对新冠病毒德尔塔变异株的环状 RNA 疫苗（circRNARBD
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