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D-荧光素钾盐,D-虫荧光素钾盐

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  • 乾图生物
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  • 2025年07月15日
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      上海乾途生物科技有限公司

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      1g///5g

    分子式:C11H7KN2O3S2    分子量:318.41 一:背景简介:哺乳动物发光,一般是将萤火虫荧光素酶(firefly luciferase)基因整合到需观察细胞的染色体DNA上,以表达荧光素酶,培养出能稳定表达荧光素酶的细胞株,当细胞分裂、转移、分化时,荧光素酶也会得到持续稳定的表达。标记后的荧光素酶只有在活细胞内才会产生发光现象,并且发光强度与标记细胞的数目呈线性相关。除萤火虫荧光素酶外,有时也会用到海肾荧光素酶(renilla luciferase)。二者的底物不同,萤火虫荧光素酶的底物是荧光素(D-luciferin,常见钾盐或者钠盐)。二者的发光波长也不一样,前者发光波长在540-600 nm,后者发光波长在460-540nm。荧光素所发的光更容易透过组织,在体内代谢较慢,而且特异性好。所以大部分活体成像实验采用萤火虫荧光素酶基因作为报告基因。 D-荧光素(D-Luciferin)是荧光素酶(Luciferase)的常用底物,普遍应用于整个生物技术领域,特别是体内活体成像技术。其作用机制是在ATP和荧光素酶的作用下,荧光素(底物)能够被氧化发光。当荧光素过量时,产生的光量子数与荧光素酶的浓度呈正相关性(见下图)。将携带荧光素酶编码基因(Luc)的质粒转染入细胞后,导入研究动物如大、小鼠体内,之后注入荧光素,通过生物发光成像技术(BLI)来检测光强度变化,从而实时监测疾病发展状态或药物的治疗功效等。也可以利用ATP对此反应体系的影响,根据生物发光强度的变化来指示能量或生命体征。   D-荧光素也常用于体外研究,包括荧光素酶和ATP水平分析;报告基因分析;高通量测序和各种污染检测。目前有三种产品形式:D-荧光素(游离酸),D-荧光素盐(钠盐和钾盐)。主要差别在于溶解特性:前者的水溶性以及缓冲体系的溶解性都较弱,除非溶于弱碱如低浓度NaOH和KOH溶液。可溶于甲醇和DMSO;后者能够易溶于水或缓冲液中,使用方便,溶剂无毒性,特别适合体内实验。配成溶液后的这三种产品,在绝大多数的应用上都没有实质性的差别。  根据文献及客户使用习惯,目前使用荧光素钾盐的较为常见。 D-荧光素钾盐,具有纯度高,溶解性好,发光强度高衰减慢等特点 产品用途:D-Luciferin作为荧光素酶的底物,存在于多种发光生物体中。在ATP和荧光素酶的催化作用下,荧光素被氧化,产生蓝绿色的光(560nm),当底物过量时,产生的光量子数与荧光素酶的浓度呈正相关。编码荧光素酶的Luc基因是植物、细菌、哺乳动物细胞的常见报告基因。由于没有背景干扰,因此可以很容易检测出低至0.02 pg水平的荧光素酶。广泛应用与活体成像报告基因检测等领域。

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      荧光素酶的发光是酶促反应产生的自发光,不需要激发光,但需要底物荧光素。不同的荧光素酶所需的底物不同。例如,萤火虫荧光素酶的底物是 D-荧光素,海肾荧光素酶的底物是腔肠素。其中,D-荧光素的使用频率最多,荧光素在氧气、ATP 存在的条件下和荧光素酶发生反应,生成氧化荧光素,并产生发光现象。 目前市场上 D-荧光素主要有三种形式,D-荧光素(游离酸)、D-荧光素(钠)和 D-荧光素(钾盐)。这三种形式主要区别在于溶解特性,配成溶液后,其在绝大多数应用上都没有实质性的差别,整体来看,钾盐在活体

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