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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
100
- 英文名:
pBV220
- 保质期:
90天
- 供应商:
优利科(上海)生命科学有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
质粒干粉
产品名称:pBV220质粒
产品规格:质粒干粉
有效期:90天,请尽快转化。
保存温度:一般在-20℃,置于-80℃保存时间更长。
运输方式:常温运输,1周内。
应用领域:科研
生长条件:LB +氨苄青霉素,37℃(克隆菌株DH5α,3666bp)
注意事项:转化前请准确查找该质粒相应的抗性、感受态和培养温度。(请向客服QQ索要质粒信息目录)


1.溶解: 收到质粒干粉后,请加入 20μl 无菌水至管底,溶解质粒,室温静置 1min;
2.混合(吸附质粒): 200μl 感受态细胞 + 质粒 DNA 5~10μl 混匀,冰上放置 30min;
3.热激导入: 42℃静置 90s;
4.收缩膜孔: 冰浴 2min;
5.修复培养: 毎管加 800μl LB 液体培养基,37 ℃培养 1h 150 r/min;
6.筛选培养: 将适当体积(100 μl)的复苏细胞,涂布在相应抗性的 LB 平板上,正置平皿 30min(琼脂面务必干燥后), 倒置培养 12-16h,出现菌落。
7.提取: 挑取单克隆菌落至相应抗性 LB 液体培养基中,震荡培养 12-16h,根据试验需要提取质粒。
pBV220质粒培养基:LB+50mcg/ml氨苄青霉素:酵母膏 5.0g,蛋白胨 10.0g,NaCl 10.0g,蒸馏水 1.0L,pH 7.0。121℃,15min灭菌。灭菌结束后,培养基冷却至40-50℃时加入氨苄青霉素,浓度50mcg/ml。
| pET28a-EGFP大肠绿色荧光表达质粒 |
| L4440载体 |
| pLAMP1-mCherry质粒 |
| pGADT7-Rec质粒 |
| pREDKI质粒 |
| pTRE3G质粒 |
| pEnCMV-KRAS WT-3×FLAG质粒 |
| pCMV-HA-Ub质粒 |
| pMDLg-pRRE质粒 |
| pTRIP-SFFV-mtagBFP-2A STING质粒 |
| pgr107质粒 |
| pACT1:Cas9-GFP, U6:sgTK质粒 |
| PL6-CS-WR质粒 |
| pShuttle质粒 |
| pBiT1.1-N [TK-LgBiT]质粒 |
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文献和实验【求助】哪里能买到含有人干扰素alpha-2b cDNA序列的质粒pBV889
baiguo861029 各位前辈好 本人是个新手,听很多师兄师姐说丁香园很好,这儿的人都很热情帮助他人。我现在研究生在读,因为课题需要,急需购买这个质粒pBV889,试了好多方法都没找到。这个质粒含有人干扰素alpha-2b编码序列,即cDNA序列。非常希望知道的前辈给予我帮助,非常感谢!! woxingwosu 用google搜索了一下,发现很多文章都有,国内发表的也很多。其实你或者你老板可以写信去要一下就方便多了,还不用
温度诱导型原核表达载体pBV220工作原理及全序列 实验原理 PLPR启动子是大肠杆菌l噬菌体中控制早期转录的启动子,具有极强的起始RNA转录的功能,基因工程中常用它来构建高效表达载体,它受抑制物CI蛋白的负调控。在实际中CI蛋白被改造成温度敏感型(CIts),由DNA片段CIts857(857bp长)编码。CIts在30℃时具有抑制启动子的活性,在42℃时失活而失去抑制启动子的活性,因此,改变工程菌的培养温度即可控制目的基因的表达,这一点比用诱导剂诱导表达的系统要节省操作步骤和成本
用于克隆筛选).因为引物上带了EcoRV位点,又可以进一步做成T载体,再把基因克进去,如此反复... 关键是T载体要制备的好,筛选的时候多挑几个克隆,如果需要定向克隆基因的话可利用载体上的引物筛选之,然后利用基因内部合适的酶切位点来验证... 欢迎交流! qianjing930 我做过三段重复片段的串联,用的是pBV220载体. 第一对引物为EcoRI_KpnI_____BamHI;第一段单体插入pBV220载体中的EcoRI










