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- 技术资料
- 保存条件:
4°保存
- 保质期:
6个月
- 英文名:
Tissue Total Iron Content Colorimetric Assay Kit
- 库存:
大量
- 供应商:
北京普利莱基因技术有限公司
- CAS号:
//
- 规格:
100次/300次
| 规格: | 100次 | 产品价格: | ¥780.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 300次 | 产品价格: | ¥1580.0 |
(Intracellular Iron Colorimetric Assay Kit) E1050
描述:铁是人体必需的元素之一,对人体的新陈代谢和身体健康具有重要作用,血液中铁的含量不足,就会造成缺铁性贫血。铁存在于人体所有的细胞内,各组织、器官包括各内分泌腺都含有铁。肝脏、脾脏和肺组织内含量较为丰富。成人体内含铁3~5克,大部分都以蛋白质复合物形式存在,极少部分以离子的形态存在。本试剂盒采用亚铁嗪比色法可以定量动物实体组织中铁离子,线性范围5~300uM。产品包括标准品和空白对照,本试剂盒可进行100个样品的检测。
原理:
铁与蛋白结合成复合物,在酸性介质中铁从复合物中解离出来,再被还原剂还原成二价铁,并与亚铁嗪生成紫红色化合物,在540-580nm处可比色测定。 其反应如下图所示:
组成:
1. 组织裂解液: 60 ml
2. 缓冲液: 5ml
3. 检测剂: 3ml
4. 标准品: 1ml
5. 稀释用液: 20ml
储存:4℃保存,6个月有效。
适用范围:该试剂盒可用于动物实体组织中铁离子定量检测。
操作步骤:
1. 样品准备:
离心管精确称重,加入组织块后再称重,二者相减(即减量称重法)计算组织重量(约20mg-50mg)。建议按比例每50mg组织加200µl-400µl裂解液。用电动高速匀浆器或手动玻璃匀浆器破碎组织(不推荐超声方法,因其不能完全和均匀破碎。应根据预实验调整初始的组织加入量)。匀浆后置于摇床裂解2h,之后室温12000rpm离心5分钟,上层清液即可用于测定。
2. 标准品的稀释:用试剂盒提供的稀释用液将3mM 的标准品母液稀释为:300 uM、150uM、75uM、37.5uM、18.75uM、9.38uM、4.69uM。注意倍比稀释并设置0浓度对照反应管。
4. 参考下表使用1.5ml离心管,设置空白对照管、标准品管和样品管。如果样品中的铁元素含量过高,用裂解液适当稀释后再进行测定。
| 空白对照 | 稀释后的标准品 | 裂解的样品 | |
| 稀释用液 | 100μl | - | |
| 混液A | 100μl | 100μl | 100μl |
| 样品 | - | - | 100μl |
| 标准品工作液 | - | 100μl | - |
6. 冷却至室温,将管盖与管壁上的液滴离心入管底。
7. 加入30ul 铁离子检测剂,混匀,室温孵育,30min。此步可能产生络合物沉淀,用移液器轻轻吹打即可溶解,若沉淀不溶,12000rpm离心5分钟,取上层清液即可。
8. 取200ul 于96孔板,在550nm测定吸光度。如果不能测定550nm,也可以在540nm~580nm范围内检测。
9. 绘制标准曲线并计算铁离子浓度。
说明:
1. 本试剂盒不受锰离子、镁离子、镍离子和锌离子等的干扰。
2. 操作过程中,样品与试剂等避免与铁器接触,以防污染。
3. 所测样本的值高于标准曲线的上限,应稀释样品后重新测定。
4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作,检测试剂有腐蚀性,请小心操作,若不慎沾到皮肤上请马上用清水冲洗干净。
5. 该试剂盒仅供科学研究使用。
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文献和实验免疫球蛋白 E(immunoglobulin E, IgE)
血清中含量最少,发现最晚的一种抗体,仅占血清中免疫球蛋白总含量的0.001%。这类免疫球蛋白的构形与IgG相似,不耐热,56℃30分钟可灭活。由鼻咽、扁桃体、支气管、胃肠道粘膜等处固有层的浆细胞产生,一般分布在血管外,正常血清中很少。是亲细胞抗体,能与血液中的嗜碱性粒细胞、组织中的肥大细胞结合,导致I型变态反应的发生。骨髓瘤、肝脏疾病、慢性寄生虫病或细菌感染,以及自身免疫病患者,体内IgE含量增加。
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小鼠 免疫球蛋白E ( IgE ) 酶联免疫 分析( ELISA ) 试剂 盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定小鼠血清,血浆及相关液体样本中 免疫球蛋白E(IgE) 含量。 实验原理 : 本试剂盒应用双抗体夹心法测定 标本 中 小鼠 免疫球蛋白E ( IgE ) 水平。用纯化的 IgE 抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入 小鼠 免疫球蛋白E ( IgE ) ,再与HRP











