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- SAIOS（赛奥斯）
- 中国武汉
- CL-271h
- 2025年12月17日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
Human Normal Prostate Epithelial Cells
- 库存：
999
- 供应商：
-
- 肿瘤类型：
-
- 细胞类型：
详见说明书
- 品系：
详见说明书
- 组织来源：
详见说明书
- 相关疾病：
-
- 物种来源：
人
- 免疫类型：
详见说明书
- 细胞形态：
详见说明书
- 是否是肿瘤细胞：
-
- 器官来源：
详见说明书
- 运输方式：
常温/干冰
- 年限：
详见说明书
- 生长状态：
详见说明书
- 规格：
1×10⁶cells
一.细胞介绍
该细胞来源于54岁白人男性。源于正常成人前列腺周边组织的上皮细胞经过转染HPV-18后建系得到该细胞株。在三维基质胶培养时，在雄激素作用下，RWPE-1细胞形成腺胞并向培养基中分泌PSA（kallikrein 3, KLK3）。来源于RWPE-1的细胞再用Kirstin鼠类肿瘤病毒转染Ki-ras基因，建立了能成瘤的RWPE-2细胞株和 RWPE2-W99细胞株。同时，用N-甲醇-N-N-Nitrocarbamide 处理RWPE-1，建立了一系列模拟前列腺癌进程中不同时期的成瘤细胞株， 分别是 WPE1-NA22, WPE1-NB14, WPE1-NB11 和 WPE1-NB26 细胞株。 据提供者报道，RWPE-1 细胞株经过检测，乙肝、丙肝、人免疫缺陷病毒都呈阴性。
二.细胞特性
（1）来源：前列腺正常细胞
（2）形态：上皮细胞样，贴壁生长
（3）含量：>1x10⁶cells
（4）规格：T25瓶或者1mL冻存管包装
（5）用途：仅供科研使用。
三.培养基及培养冻存条件准备
（1）准备 角质细胞无血清培养基 (包含两个组份：基础培养基1瓶+生长因子1管）或者 Defined K-SFM (part of kit NO:,10744-019) ，添加对应因子，1% P/S 来培养细胞。备注:Defined K-SFM (part of kit NO:,10744-019)培养液包含两个组份：基础培养基1瓶（货号10785-012）+生长因子1管( 货号10784-015）。
（2）备注:Defined K-SFM (part of kit NO:,10744-019)培养液包含两个组份：基础培养基1瓶（货号10785-012）+生长因子1管( 货号10784-015）。
（3）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
（4）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。
四.运输和保存
（1）冻存细胞：1mL冻存管包装干冰运输，收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。
（2）复苏好的活细胞：T25瓶复苏的存活细胞常温发货，收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
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细胞接收后的处理：
（1）收到细胞后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请拍照后及时联系我们。
（2）请在4或5x显微镜下确认细胞状态，同时给刚收到的细胞拍照（10×，20×）各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存，作为售后时收到时细胞状态的依据。
（3）贴壁细胞：细胞在37℃培养箱中放置2-3h，显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况，有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下，可去除培养瓶中灌液培养基（若有未贴壁的细胞需要离心回收，重悬打入到原培养瓶中）,加入新配制的完全培养基6-8mL，放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上，可以对细胞进行传代处理。传代过程中，若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。
（4）注意：运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1：2传代。
细胞处理：
（1）冻存细胞的复苏：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8mL完全培养基的培养瓶（或皿）中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
（2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞传代可以参考以下方法：
1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加入0.25％（w/v）胰蛋白酶-0.53mM EDTA于培养瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培养箱中消化1-2分钟（难消化的细胞可以适当延长消化时间），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3-4mL含10%FBS的培养基来终止消化。
3.轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8mL按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
（3）细胞冻存：收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。
下面以T25瓶为例：
（1）细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中，可使用血球计数板计数，来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10⁶~1×10⁷个活细胞/mL。
（2）1000rpm离心3-5min，去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞，按每1mL冻存液含1×10⁶~1×10⁷个活细胞/mL分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中，标注好名称、代数、日期等信息。
（3）将要冻存的细胞置于程序降温盒中，-80℃冰箱中过夜，之后转入液氮容器中储存，同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。
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文献和实验Immortalized and tumorigenic adult human prostatic epithelial cell lines: characteristics and applications. Part I. Cell markers and immortalized nontumorigenic cell lines.
Prostate 29:386-394(1996)
正常前列腺液的性状和参考值如图医学教育|网搜集整理： 颜色 淡乳白色 性状 稀薄液体，半透明 pH 6.3～6.5 红细胞 ＜5个／HP 白细胞 ＜10个／HP
阴道可见的正常脱落上皮细胞： 1.鳞状上皮细胞：从外阴向内直至子宫颈外口的黏膜均被覆鳞状上皮。在其脱落细胞中可见底层、中层、表层3层细胞，细胞形态与正常脱落的鳞状上皮细胞基本相同。阴道上皮细胞形态变化与卵巢激素关系密切相关。 （1）底层细胞：分为内底层和外底层细胞。阴道涂片一般不见内底层细胞，仅在哺乳期、闭经后，阴道高度萎缩或糜烂、创伤时才见。 外底层细胞根据来源不同，分为3型：①宫颈型外底层细胞；②产后型外底层细胞；③萎缩型外底层细胞。 （2）中层细胞
实验材料： 1. 2—3月龄的家兔胆囊； 2. 不含Ca2+ 和Mg2+ 的1×PBS，添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素，pH7.2； 3. 培养用液：以DMEM/F12为基础培养基，添加10%的胎牛血清、2 mmol/L谷氨酰胺、2μg/ml胰岛素、10 ng/ml表皮生长因子以及100 IU/ml青霉素和100μg/ml链霉素。酶消化液为0.125%Ⅳ型胶原酶溶液。组织清洗液为DMEM培养液，并添加200 IU
