- 询价
- 上海
- 2026年04月20日
企业认证
相关产品推荐更多 >
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 提供商：
君礼生物
- 服务名称：
定量检测
1) 交联：在65℃下5分钟,使mRNA变性以破坏RNA中的二级结构。变性后立即在冰上冷却，以防止mRNA的二级结构重新形成。将2 μl的mRNA直接滴加到Immobilon-Ny+尼龙卷膜上，在紫外线交联剂中进行交联。轻轻振荡5分钟，洗涤未结合的mRNA。
2) 封闭：在室温下温和摇动，将膜在10 ml封闭缓冲液（5%脱脂奶粉）中孵育1小时。
3) 一抗孵育：将膜置于5ml抗体稀释缓冲液（1:250稀释; 2 μg/ml）中，于4℃温和摇动过夜孵育膜。
4) 清洗：于洗涤缓冲液中轻轻洗涤3此，每次5分钟。
5) 二抗孵育：将膜置于5ml Goat anti rabbit IgG-HRP（1：10,000稀释; 20 ng/ml）二抗稀释缓冲液中，在室温下温和摇动孵育膜1小时。
6) 清洗：于洗涤缓冲液中轻轻洗涤3此，每次10分钟。
7) 在室温下在黑暗中将3 ml Western Blotting底物孵育5分钟。于天能全自动化学发光图像分析系统记录斑点印迹结果。
结果参考下图所示：
【实验服务流程】
联系我们
◆电话：021-55089063
◆邮箱：service@genelily.com
◆地址：上海浦东新区康新公路3377号2幢
风险提示：丁香通仅作为第三方平台，为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全，合理判断，谨慎选购商品，商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品，请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
- 作者
- 内容
- 询问日期
文献和实验Northern Blot继分析DNA的Southern杂交方法出现后，1977年Alwine等人提出一种与此相类似的、用于分析细胞总RNA或含poly A尾的RNA样品中特定mRNA分子大小和丰度的分子杂交技术，这就是与Southern相对应而定名的Northern杂交技术。这一技术自出现以来，已得到广泛应用，成为分析mRNA最为常用的经典方法。与Southern杂交相似，Northern杂交也采用琼脂糖凝胶电泳，将分子量大小不同的RNA分离开来，随后将其原位转移至固相支持物（如尼龙膜、硝酸
磷酸氢二钠和90ml 水混合，用DEPC处理上述溶液后高压灭菌。每一泳道至多可分析10μg RNA，通常用10- 20 μg 细胞总RNA进行Northern杂交，可以检测高丰度mRNA（占mRNA总量的0.1％以上），如等测RNA含量极微，每个泳道应加0.5-3。0μg poly(A)+RNA。2、将微量离心管盖严，将RNA溶液置于50℃温育60分钟后， 用冰水浴冷却样品，离心5秒钟，使管内所有液体沉降至管底。3、于50℃温育RNA溶液的同时，灌制琼脂糖水平凝胶，用1.4 ％琼脂糖分析1kb
氢二钠和90ml 水混合，用DEPC处理上述溶液后高压灭菌。每一泳道至多可分析10ug RNA，通常用10－20 ug 细胞总RNA进行Northern杂交，可以检测高丰度mRNA（占mRNA总量的0.1%以上），如等测RNA含量极微，每个泳道应加0.5－3.0ug poly（A）+RNA。2、将微量离心管盖严，将RNA溶液置于50℃温育60分钟后，用冰水浴冷却样品，离心5秒钟，使管内所有液体沉降至管底。3、于50℃温育RNA溶液的同时，灌制琼脂糖水平凝胶，用1.4 %琼脂糖分析1kb 以下的RNA样品
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
