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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
负20℃
- 保质期:
1年
- 英文名:
参考说明书
- 库存:
Q:2102485102
- 供应商:
上海羽哚生物
- 规格:
1mL
上海羽哚生物科技有限公司所提供的产品有单克隆抗体和抗原:
抗生素类;农药残留类;霉菌毒素类;色素类;动物疾病类;乳品添加物类;农药类;水产类;过敏原/营养抑制因子类;抗病毒类;重金属类;激素;消炎镇痛类;保健品非法添加物;塑化剂类;生理活性物类等等;
生物素标记抗体;亲和素标记抗体;碱性磷酸酶标记抗体;辣根过氧化物酶标记等各种标记物标记的抗体,同时生产常用的免疫佐剂;
1 RNA纯化系列
2 DNA纯化系列
3 电泳及回收系列
4 PCR及克隆系列
5 柱式DNA提取系列产品
6 柱式RNA提取系列(包括动物,血液,植物,细菌RNA提取)
7 SuperBuffer-2,5分钟超快DNA电泳液
8 载体,带自杀基因的低背景克隆载体
9 一步式质粒DNA提取系列产品(单菌落微量提取)
10 miRNAout(沉淀法和离心吸附法)
上海羽哚生物还将源源不断地推出更多的价廉物美的试剂精品,包括:蛋白质纯化系列产品 蛋白质电泳系列产品 更多RT-PCR系列产品 RNA干扰系列产品 核酸非同位素标记及杂交系列产品
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文献和实验浓度不佳:适当降低引物的浓度,并注意上下游引物的浓度配比。镁离子浓度过高:适当降低镁离子浓度,或选择更合适的mix试剂盒。模板有基因组的污染:RNA提取过程中避免基因组DNA的引入,或通过引物设计避免非特异扩增。5. 溶解曲线不止一个主峰引物设计不够优化:应避免引物二聚体和发夹结构的出现。引物浓度不佳:适当降低引物的浓度,并注意上下游引物的浓度配比。镁离子浓度过高:适当降低镁离子浓度,或选择更合适的 mix 试剂盒。模板有基因组的污染:RNA提取过程中避免基因组DNA的引入,或通过引物设计避免非特异
几个复孔,选择重复性好的 CT 值参与计算。 (2)CT<30,重复性较差。这种情况一般同操作有关。 解决办法:从以下几个方面进行问题的排查:①加样准确度;②移液器吸取液体的准确度;③定期校准 qPCR 仪。 ①加样准确度 避免小体积加样,减少加样误差。可以将引物、SYBR Green Mix、ddH2O 配置成混合体系,并且增加模板的稀释梯度,大体积加样。如:原液 cDNA 添加 1μl,可以更改为原液 cDNA 稀释 5 倍,添加 5μl,使用 ddH2O 补齐体系至 20μl 即可
装备很重要:做出心中的梦中情图,最基本的一步就是拥有一把好用的移液枪,保证其量程是准确的,且每次做 RT-qPCR 的时候要固定使用那一把移液枪,避免造成因枪的不同带来的误差。 保证 RNA 质量:A260/A280要在 2 左右;不同组的样品 cDNA 的浓度也要一致,只有这样你所要扩增的模板的基线才是一致的,后续出来的 CT 值才有参考意义。 反复确认引物种属:很多刚接触实验的小白们,拿着 human 的引物在鼠样本上做 RT-qPCR,,也许跑到天荒地老这个结果也无法得到,既浪费
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