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生物碱含量测试盒

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  • 2025年07月16日
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      生物碱含量测试盒

    • 保质期

      12个月

    • 供应商

      上海酶联生物科技有限公司

    • 保存条件

      避光,低温保存

    • 规格

      100管/96样

     
    生物碱含量测试盒
    微量法
    注    意:
    正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

    生物碱含量测试盒

    测定意义:
    生物碱存在于自然界(主要为植物,但有的也存在于动物)中的一类含氮的碱性有机化合物, 大多数有复杂的环状结构,氮素多包含在环内,有显著的生物活性,是中草药中重要的有效成分之一。

    测定原理:
    生物碱与溴钾酚绿指示剂反应,生成绿色化合物,在 416nm 处有大吸收峰。

    需自备的仪器和用品:
    酶标仪、水浴锅、超声波清洗器、可调式移液器、96 孔板、研钵、80%乙醇、氯仿和蒸馏水。

    试剂的组成和配制:
    试剂一:液体 12mL× 1 瓶,4℃保存; 试剂二:液体 30mL × 1 瓶,4℃保存;
    试剂三:液体 15mL × 1 瓶,4℃避光保存;

    生物碱的提取:
    样本烘干粉碎,过 80 目筛。称取约 0.1g 样本,加入 0.1mL 试剂一,再加入 0.9mL80%乙醇, 充分混匀后转移到EP 管中,超声波提取 60min, 8000 g,25℃离心 10 min,取上清液待测。另取空 EP 管,加入 0.1mL 试剂一和 0.9mL80%乙醇,混匀后作为空白液。

    测定步骤:
    1、酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 416nm 处。
    2、操作表:在EP 管中加入如下试剂
    试剂名称(µL  空白管 测定管
    样本   50
    空白液 50  
    试剂二 250 250
    试剂三 100 100
    混匀,室温静置 5min
    氯仿 500 500
    剧烈振荡混匀,室温静置 40min,吸取下层氯仿层 200µL 于 96 孔板,416nm 处读取吸光值
    A,ΔA=A 测定-A 空白,空白管只要做一管。

    生物碱含量测试盒

    生物碱含量测试盒
    生物碱含量计算:
    标准条件下测定的回归方程为 y = 1.915x - 0.0005,R2 = 0.9942;x 为标准品浓度(mg/mL),
    y 为 ΔA。
    生物碱含量(mg/g 干重)=(ΔA+0.0005)÷1.915×V 样总÷W= 0.522×(ΔA+0.0005) ÷W
    V 样总:加入提取液体积,1mL;W:样本鲜重,g。
     

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