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- Xkbio
- XK-P0408
- 国产
- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
100
- 英文名：
HB-PET Auto-Indection Medium
- 保质期：
三年
- 供应商：
上海晅科生物科技有限公司
- 保存条件：
2-8℃
- 规格：
250g-1kg
HB-PET自诱导培养基
英文名称：HB-PET Auto-Indection Medium
用于基因工程菌大肠杆菌自诱导蛋白表达培养
用法
称取本品 27.5g,另取甘油 5g,加热溶解于 1000ml 蒸馏水中,分装,121℃高压灭菌 15分钟,冷却,临用前加入卡那霉素(终浓度为 100ug/ml)。
HB-PET自诱导培养基微生物灵敏度试验:
按标签用法制备培养基，接种以下质控菌株
| 麦康凯琼脂平板（含结晶紫） | MacConkey Agar Plate | |
| 沙氏琼脂平板（含氯霉素）9cm | Sabouraud’s Glucose Agar Plate | |
| 紫红胆盐葡萄糖琼脂平板 | Violet Red Bile Glucose Agar Plate | |
| LB营养琼脂平板9cm | LB Nutrient Agar Plate | |
| 锰盐营养琼脂平板9cm | Mn2+Nutrient Agar Plate | |
| 碱性琼脂平板9cm | ||
| 马铃薯葡萄糖琼脂（PDA）平板 | Potato Dextrose Agar Plate | |
| 哥伦比亚琼脂平板 | ||
| 硫酸锰营养琼脂平板 | Manganese Nutrient Agar Medium Plate | |
| 含225ml磷酸盐缓冲液均质袋 | Phosphate Buffered Saline | |
| 含90ml磷酸盐缓冲液均质袋 | ||
| 含225ml 缓冲蛋白胨水（BPW）均质袋 | Buffered Peptone Water | |
| 含900ml缓冲蛋白胨水（BPW）均质袋 | Buffered Peptone Water | |
| 含90ml 缓冲蛋白胨水（BPW）均质袋 | Buffered Peptone Water | |
| 含100ml 缓冲蛋白胨水（BPW）均质袋 | Buffered Peptone Water | |
| 含225ml 3%氯化钠碱性蛋白胨水均质袋 | 3% NaCl Alkaline Peptone Water | |
| 含225ml mEC+n肉汤均质袋 | mEC+n Broth | |
| 新生霉素 | Novobiocin | |
| 含225ml LB1肉汤均质袋 | ||
| 萘啶酮酸（5.0mg） | ||
| 吖啶黄素（3.0mg） | Acridine Flavin | |
| 含225ml FB1增菌液均质袋 | FB1 Broth |
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文献和实验。 过氧化氢酶试验：滴加3% 过氧化氢试液，若菌落表面有气泡产生，为过氧化氢酶试验阳性，否则为阴性。本菌为阴性反应。 3、需购买试剂： 菌株 培养基及试剂 金黄色葡萄球菌 HB8278革兰氏染色液试剂盒、HB4117 兔血浆、HB0109-7营养琼脂培养基 大肠埃希氏菌 HBIG13 HBI大肠杆菌生化鉴定条、HB8280
真DNA聚合酶可能会导致此问题。大肠杆菌 BL21（DE3）中的蛋白质表达重组pET-32α（+）载体可以表达所需的蛋白质，其在被异丙基β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）诱导后与大肠杆菌 BL21（DE3）中的109aa Trx•Tag TM融合。首先，将含有100μg/ ml氨苄青霉素的10ml LB培养基与含有重组pET-32α（+）载体的新鲜细菌菌落一起接种37℃过夜; 然后，将500-μl过夜培养物加入到含有100-μg/ ml氨苄青霉素的30-ml新鲜LB培养基中，在37℃接种直至OD 600
最近在做原核表达，包涵体。以前也做过，但经验不多。一点失败的教训以及纯化过程中的体会，贴出来与大家共享，同时希望得到同行们的指正。 1. 首先介绍一下背景。载体是invitrogen公司的pET22b，Amp抗性。菌株是该公司的BL21 star DE3，是一个蛋白降解酶突变菌株，也就是说是一种优化表达菌株。 2. 第一次失败。第一次做诱导的时候，重复了很多次，但总是诱导不出来。PCR，酶切都正确。但没等测序结果出来就开始做了。失败了。曾在园子求助。后来证明是引物
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