- ¥350
- LMAI Bio
- LMDC006
- 中国/上海
- 2025年07月10日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 英文名：
HB-PET Auto-Indection Medium
- 保质期：
3年
- 供应商：
上海联迈生物工程有限公司
- 保存条件：
常温、避光、防潮保存
- 规格：
250g
| 名称 | 英文名称 | 编号 | 规格 | 价格 |
| HB-PET自诱导培养基 | HB-PET Auto-Indection Medium | LMDC006 | 250g | 350元 |
| 产品说明及用途:.用于基因工程菌大肠杆菌自诱导蛋白表达培养 | ||||
用途:用于基因工程菌大肠杆菌自诱导蛋白表达培养。
用法
称取本品 27.5g,另取甘油 5g,加热溶解于 1000ml 蒸馏水中,分装,121℃高压灭菌 15分钟,冷却,临用前加入卡那霉素(终浓度为 100ug/ml)。
简述培养基制备的要求使用脱水培养基和其他含有有害物质（胆盐或其它选择剂）的成分时，应遵守良好实验室规范和生产厂商提供的使用说明配制。如质量/体积、pH、制备条件、灭菌条件和操作步骤等，并做好记录。
水
配制培养基使用蒸馏水或相同质量的水，以排除测试条件下抑制或影响微生物生长的物制。如果蒸馏水的用氯消毒的水制备的，在蒸馏前应先对氯进行中和（见GB/T6682）。盛放蒸馏水的容器最好是由中性材料制成的（如中性玻璃、聚乙烯等）。在初次使用前要确认容器中不含任何抑制因子。
HB-PET自诱导培养基为保证蒸馏水的质量，电阻率应至少达到300000Ωcm。
警告：采用离子交换器（去离子）生产的去离子水，微生物含量较高，这种水在过滤灭菌后仍可能带有细菌生长的抑制因子。所以配置培养基时最好不要使用这种方法生产的去离子水而应使用蒸馏水。
称量和复水
称量所需的脱水培养基（注意缓慢操作，必要时佩带口罩或在通风柜中操作，以防吸入含有毒物质的培养基粉末），HB-PET自诱导培养基先加入少量的水，充分混合（注意避免培养基结块），然后再加入至所需的量。
溶解
脱水培养基加水后适当加热，并不停搅拌使其快速溶解，必要时，重新溶解。含琼脂的培养基在加热前应先浸泡几分钟。用各别成分制备的培养基应将不同成分分别加入适量的水中，并充分溶解，然后再加入到所需的量。
pH值的测定和调整
用pH计测pH，必要时进行调整。在实验室用各别成分制备培养基，除特殊说明外，培养基灭菌后冷却到25℃时，pH的变化不应超过0.2个单位。一般使用浓度约为40g/L（约1mol/L）的氢氧化钠溶液或浓度为36.5g/L（约1mol/L）的盐酸溶液调整培养基的pH。
HB-PET自诱导培养基注：商品化的培养基高压灭菌后pH值可能变化很大，但采用优质蒸馏水或去离子水配配制时，灭菌前无需调节pH值。
分装
将制配制好的培养基分装到适当的容器中，根据不同用途，容器的体积可为培养基的1倍、2倍或3倍。
灭菌
培养基和试剂应采用湿热灭菌或过滤灭菌。亮绿培养基等特定的培养基中含有对光和热敏感的物质，只能煮沸灭菌。煮沸后应迅速冷却，避光保存（参见相关标准或供应商使用说明）。
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文献和实验。 过氧化氢酶试验：滴加3% 过氧化氢试液，若菌落表面有气泡产生，为过氧化氢酶试验阳性，否则为阴性。本菌为阴性反应。 3、需购买试剂： 菌株 培养基及试剂 金黄色葡萄球菌 HB8278革兰氏染色液试剂盒、HB4117 兔血浆、HB0109-7营养琼脂培养基 大肠埃希氏菌 HBIG13 HBI大肠杆菌生化鉴定条、HB8280
真DNA聚合酶可能会导致此问题。大肠杆菌 BL21（DE3）中的蛋白质表达重组pET-32α（+）载体可以表达所需的蛋白质，其在被异丙基β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）诱导后与大肠杆菌 BL21（DE3）中的109aa Trx•Tag TM融合。首先，将含有100μg/ ml氨苄青霉素的10ml LB培养基与含有重组pET-32α（+）载体的新鲜细菌菌落一起接种37℃过夜; 然后，将500-μl过夜培养物加入到含有100-μg/ ml氨苄青霉素的30-ml新鲜LB培养基中，在37℃接种直至OD 600
最近在做原核表达，包涵体。以前也做过，但经验不多。一点失败的教训以及纯化过程中的体会，贴出来与大家共享，同时希望得到同行们的指正。 1. 首先介绍一下背景。载体是invitrogen公司的pET22b，Amp抗性。菌株是该公司的BL21 star DE3，是一个蛋白降解酶突变菌株，也就是说是一种优化表达菌株。 2. 第一次失败。第一次做诱导的时候，重复了很多次，但总是诱导不出来。PCR，酶切都正确。但没等测序结果出来就开始做了。失败了。曾在园子求助。后来证明是引物
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