- ￥667
- mlBio/酶联生物
- mlE3272
- 国内
- 2025年07月13日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
72
- 英文名：
天冬酰胺合成酶asparagine synthetase，AS活性测定试剂盒
- 保质期：
12个月
- 供应商：
上海酶联生物科技有限公司
- 保存条件：
避光 , 低温保存
- 规格：
50管/48样
天冬酰胺合成酶asparagine synthetase，AS活性测定试剂盒
分光光度法
注 意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义：
天冬酰胺合成酶是广泛存在于生物体内的一类氨基转移酶，催化谷氨酞胺的氨基向天冬氨酸转移。当植物处于氨毒时天冬酞胺的形成是一种解毒反应。
测定原理：
AS催化L-天冬酰胺水解成L-天冬氨酸和氨，利用奈氏试剂检测氨增加的速率，即可计算其酶活性。
需自备仪器和用品：
台式离心机、可见分光光度计、水浴锅、1mL玻璃比色皿、可调式移液枪、研钵、冰和蒸馏水。
试剂组成和配制：
试剂一×1瓶，60 mL，4 ℃保存；
试剂二×1瓶，20 mL，4 ℃保存；
试剂三×1瓶，30 mL，常温保存；
试剂四×1瓶，10 mL，常温保存；
试剂五×1瓶，6 mL，常温保存；
试剂六×1瓶，6 mL，常温避光保存。
粗酶液提取：
1、细菌、细胞或组织样品的制备：
细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：试剂一体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL试剂一），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
组织：按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL试剂一），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
2、血清（浆）样品：直接检测。
测定步骤：
1、分光光度计预热30min以上，调节波长至420nm，蒸馏水调零。
2、样品测定（在EP中加入下列试剂）：
| 试剂名称（uL） | 测定管 | 对照管 |
| 样本 | 25 | |
| 蒸馏水 | 25 | |
| 试剂一 | 100 | 100 |
| 试剂二 | 400 | 400 |
| 试剂三 | 525 | 525 |
| 上清液 | 650 | 650 |
| 试剂四 | 150 | 150 |
| 试剂五 | 100 | 100 |
| 试剂六 | 100 | 100 |
注意：试剂六如出现沉淀，静置后取上清使用。
天冬酰胺合成酶asparagine synthetase，AS活性测定试剂盒
计算：
标准条件下测定的回归方程为y = 0.662x -0.0434；x为标准品浓度（μg/mL），y为吸光值A。。
1、血清（浆）AS活性
单位定义：每mL血清（浆）每小时产生1μg 氨定义为一个酶活力单位。
AS（μg/h/mL）＝(ΔA+0.0434) ÷0.662×V反总÷V样÷T=31.722×(ΔA+0.0434)
2、组织、细菌或细胞中AS活力的计算:
（1）按样本蛋白浓度计算：
单位的定义：每mg组织蛋白每小时产生1μg 氨定义为一个酶活力单位。
AS活力（μg/h/mg prot）＝(ΔA+0.0434) ÷0.662×V反总÷(V样×Cpr)÷T =31.722×(ΔA+0.0434) ÷Cpr
（2）按样本鲜重计算：
单位的定义：每g组织每小时产生1μg氨定义为一个酶活力单位。
AS活力（μg/h/g 鲜重）＝(ΔA+0.0434) ÷0.662×V反总÷(W× V样÷V样总)÷T =31.722×(ΔA +0.0434) ÷W
（3）按细菌或细胞密度计算：
单位的定义：每1万个细菌或细胞每小时产生1μg 氨定义为一个酶活力单位。
AS活力（μg/h/104 cell）＝(ΔA+0.0434) ÷0.662×V反总÷(500×V样÷V样总) ÷T=0.0634×(ΔA+0.0434)
T：反应时间，1h； V反总：反应体系总体积：0.525mL；V样：加入反应体系中样本体积，0.025mL；V样总：提取液体积，1mL；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL； W：样本质量， g；500：细菌或细胞总数，500万
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文献和实验α -氨基酸的一种，即天冬氨酸的β -酰胺。最初是从天门冬属中发现的。广泛分布于植物界，甜菜根、发芽的豆类、马铃薯等含量高。 D-天冬酰胺可以从窄叶野豌豆中得到。天冬酰胺在生物体内，是从天冬氨酸、氨和 ATP由天冬酰胶合成酶（ asparagi－ ne synthetase， EC6． 3． 1． 1．）合成的，似乎与谷氨酰胺一样参与氨基氮的贮存和供给。
酰胺酶的一种。是催化 L-天冬酰胺水解生成天冬氨酸与氨反应的酶。 EC 3． 5． 1． 1。底物特异性高，但也有作用谷氨酰胺的。广泛分布于酵母、细菌、霉菌、高等植物、动物的肝脏和肾脏等。从一种酵母（产朊圆酵母 Torula utilis）提取的酶在酸性条件下（ pH＜ 5.5）客易失活，可为微量的 Ag＋ 、 Hg2 所抑制。在鼠的肝脏提取液中有在 50℃加热 10分钟失活的天冬酰胺酶Ⅰ（最适 pH=7.5）和不失活的天冬酰胺酶Ⅱ（最适 pH=8）。据认为它与谷氨酰胺酶
大鼠尿微量白蛋白 (ALB) 酶联免疫吸附测定试剂盒 使用说明书 本试剂盒仅供体外研究使用 ! 预期应用 ELISA 法定量测定大鼠尿液或其它相关生物液体中 ALB 含量。 实验原理 用纯化的抗体包被微孔板，制成固相载体，往包被抗 ALB 抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗 ALB 抗体、 HRP 标记的 亲和素 ，经过彻底洗涤后用底物 TMB 显色
