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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
避光,-20℃
- 保质期:
1年
- 英文名:
One-Step qRT-PCR kit (SYBR Green)
- 库存:
999
- 供应商:
百生跃
- 规格:
100T/500T/1000T
| 规格: | 100T | 产品价格: | ¥625.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 500T | 产品价格: | ¥2391.0 |
| 规格: | 1000T | 产品价格: | ¥4760.0 |
BR1000207遵循cGMP规范生产。本产品是采用SYBRGreenI嵌合荧光法进行一步法实时荧光定量检测的专用试剂盒,非常适合于RNA病毒等微量目标基因的检测。本试剂盒以总RNA为模版,反转录和qPCR检测在同一反应管内进行,可最大限度地减少人为操作误差、节约PCR实验操作时间、并能有效防止污染。除此之外,本产品的每个批次均进行严格校准,保证了批次间一致性。
本产品含有高效的反转录酶、抗体型热启动TaqDNA聚合酶、RNase抑制剂、SYBRGreenI、dNTPs、dUTP、不耐高温的UNG、Mg2+、反应缓冲液、稳定剂和ROX等成分。高效的反转录酶是一种经过改造和优化的M-MLV反转录酶,可在55℃条件下10min精准合成长达12kbcDNA。抗体型热启动TaqDNA聚合酶是一种与抗体结合的高品质热启动酶,高温加热前,抗Taq单克隆抗体与热启动TaqDNA聚合酶结合,抑制其活性,从而有效避免低温条件下由引物和模板非特异性杂交或引物二聚体引起的扩增。抗Taq单克隆抗体在PCR反应的预变性过程中完全失活,不会阻碍之后Taq酶聚合反应,从而大大提高了PCR反应的特异性、灵敏度和定量检测的准确性。
此外,所有通过Taq酶扩增反应合成的“DNA链”中都会掺入dUTP。在预变性开始前,预混液中的UNG会将这些掺入了dUTP的“DNA链”降解,以防止他们影响基础荧光信号的准确性。预变性程序开始后,UNG将会彻底失活,因此不影响后续扩增程序。
运输与保存:
本品使用冰袋运输;-20℃避光保存,1年有效。
注意事项:
1.本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
2.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验光染料可以作为你初步的选择对象。老实说,荧光染料法实质上无非就是常规的PCR反应中添加了荧光染料,借助染料和双链DNA的结合所发出的荧光实时监控反应的进程。由于不需要设计序列特异性探针和优化反应条件,价格低廉,通用性强,而且荧光染料法可用于任何一种型号的定量PCR仪,因而同样得到广泛采用。荧光染料法的专一性和PCR没有本质的区别---但是作为“失之毫厘,谬之千里”高度精确的实验,你依然可以选择更好的荧光染料、更严谨专一的PCR酶、更好的缓冲体系来提高反应的可靠程度。 在荧光染料法的定量PCR反应试剂中
了我的扩增曲线呢? 其实,这种现象并不是偶发的,有很多原因可能导致,并且有个专属名称「Hook Effect」,翻译过来叫「鱼钩效应」。「鱼钩效应」指在荧光定量 PCR 过程中,DNA 扩增到指数增长期后出现的一种荧光信号不能保持稳定(或者上升)而出现下降的现象 [1]。 导致扩增曲线出现这一现象的因素比较复杂,这里我们分别从嵌入性染料法与探针法两种定量方式的角度为大家解释: 嵌入性染料法: 嵌入性染料法(例如 SYBR Green I)产生「鱼钩效应」主要是由于模板序列混杂,在 PCR
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