快速动物组织直扩 PCR 试剂盒

这几类 PCR 技术你知道吗？

引物： (1)上下游引物设计在跨内含子的两个外显子的 3’ 端和下一个外显子的 5’ 端，这样不会在基因组上扩出来。 (2)设计在两个离得远的外显子上，这样从基因组和 cDNA 上得到的片段长度不一样，可以一引两用。 Random 9mers 适用于长的及具有 Hairpin 构造的 RNA。适用于 rRNA、mRNA、tRNA 等所有 RNA 的反转录反应 (用 Random 9mers 合成 cDNA 后，任何特异性的 Primer pair 都可用于 PCR 反应)。 Oligo dT

动物组织或材料中盐酸克伦特罗残留的快速ELISA检测

性的兴奋剂和激素，具有水解脂肪、合成代谢和对非条纹肌肉组织的松弛作用。进年来被一些人非法添加到饲料中以提高脂肪型动物的瘦肉率和加速动物的生长。当用作生长调节剂时，其添加量是治疗量的5—10倍，常在动物体内残留而给消费者带来危害。 通常，HPLC或GC-MS是克伦特罗残留检测的确证方法，但是其前处理步骤费用昂贵，而ELISA快速检测试剂盒因成本低、操作简便、速度快、一次检测样本量大、仪器化低，现已成为常规的筛选方法。 1.检测原理： 测定的基础是抗原 抗体反应。微孔板上包被有针

PCR 问题整理及提高 PCR 扩增特异性的方法总结

buffer，摸索镁离子浓度或适当加入 DMSO（小于 0.3%） · 提高退火温度，增加延伸时间（反应条件参照试剂盒说明书） 问题 2：假阳性 现象：空白对照出现条带 可能原因： · 引物设计不适，与目的序列具有同源性 · 试剂污染：水、移液枪等被核酸污染 · 样品间出现交叉污染 解决方法： · 实验仪器高压灭菌 · 实验试剂（酶除外）高压灭菌，离心管枪头一次性使用 · 规范实验操作 · 假阳性可通过巢式 PCR 解决，或者使用特异性较高的试剂盒扩增 问题 3：拖尾、弥散 现象：电泳出现拖尾、涂抹