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- Xybio
- 上海
- P1543
- 2025年07月15日
企业认证
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- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20
- 保质期：
2年
- 英文名：
ATCC25922 Strain
- 库存：
100
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格：
干粉/液体
名称：ATCC25922大肠埃希菌
别称: ATCC25922 Strain
培养基：LB
菌株类别：标准菌株
培养条件：37℃，有氧，LB
保存方式：20%甘油，-20℃
基本应用：质检或其他用途
质粒简介
大肠埃希菌株
质粒图谱
质粒序列：详询
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
| P1514/EBY100酿酒酵母展示菌 |
| P1520/Y1HGold酵母单杂交菌 |
| P1515/Y187菌株双杂交菌 |
| P1516/Y2HGold酵母双杂交菌 |
| P1517/EGY48酵母双杂交菌 |
| P1518/NMY51酵母双杂交菌 |
| P1519/AH109酵母双杂交菌菌 |
| P1521/产朊假丝酵母菌 |
| P1524/A4发根农杆菌 |
| P1525/LBA9402发根农杆菌 |
| P1526/ATCC15834发根农杆菌 |
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- 内容
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文献和实验常用固体培养基的质控菌株及标准 培养基 质控菌株 鉴定标准 营养琼脂 福氏志贺菌ATCC12022 中度到大量生长 血琼脂 金黄色葡萄球菌ATCC25923 中度到大量生长 化脓性链球菌ATCC19615 生长,β-溶血 肺炎链球菌ATCC6305 生长,α-溶血 大肠埃希菌ATCC25922
试验菌株的血平板上轻压,使刀口均匀地沾上试验菌株。注意不要划破琼脂表面。然后将刀口向下,垂直插入已涂布试验菌株的MH平板。刀口插入后位置不要移动。再轻轻拔出刀片使MH平板上的刀口切割线自然闭合。刀口菌量不宜过多,以免溢出琼脂表面。随后在切割线中心,距切割线3mm处贴上头孢西丁纸片。将MH平板放入35℃孵箱过夜。 2.间接法:将ATCC25922大肠埃希菌制成0.5麦氏单位的菌悬液,均匀涂布于MH平板。其他操作同直接法。 结果判断:如果试验菌切割线附近的抑菌圈缩小或变形均提示头孢西丁失活
1.试剂 各种试剂配好后，均应注明试剂名称、配制日期、有效期及配制者，并作记录，商品试剂亦应注明购入日期及有效期。配制好的试剂均应用标准菌株作性能测试，不合格者不能使用。性能测试间隔可根据试剂的稳定性和使用频率而定，如氧化酶试剂每天用前测试，靛基质试剂每周测试1 次。试剂须根据不同要求作适当的贮存，如氧化酶试剂应置棕色瓶中4 ℃冰箱保存。 2.染色液 常用染色液如革兰染色液在每次配制后并常规至少每周检测1次，用标准菌株金黄色葡萄球菌（ATCC25923）和大肠埃希菌
