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pEU-E01-MCS无细胞类表达质粒

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  • ¥100 - 1000
  • Xybio
  • 上海
  • P0760
  • 2025年07月12日
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    • 详细信息
    • 文献和实验
    • 技术资料
    • 保存条件

      -20

    • 保质期

      2年

    • 英文名

      pEU-E01-MCS

    • 库存

      100

    • 供应商

      上海烜雅生物科技有限公司

    • 规格

      干粉/液体

    基本信息
    名称:pEU-E01-MCS无细胞类表达质粒
    别称: pEU-E01-MCS
    复制子: pUC
    质粒分类: 无细胞表达质粒
    质粒大小: 3747bp
    原核抗性: Amp
    克隆菌株: DH5a
    培养条件: 37度
    5'测序引物: Sp6:ATTTAGGTGACACTATAGAA


    质粒属性
    载体宿主: 无细胞类
    载体用途: 蛋白表达
    基因种属: 空载体
    基因类型: ORF
    原核抗性: Amp
    筛选标记:  
    荧光蛋白:


    质粒简介
     pEU-E01-MCS质粒由上海烜雅生物科技有限公司提供

    质粒图谱
    产品细节图片1

    质粒序列
    OCUS       Exported                3747 bp ds-DNA     circular SYN 11-SEP-2016
    DEFINITION  synthetic circular DNA
    ACCESSION   .
    VERSION     .
    KEYWORDS    pEU-E01-MCS
    SOURCE      synthetic DNA construct
      ORGANISM  synthetic DNA construct
    REFERENCE   1  (bases 1 to 3747)
      AUTHORS   .
      TITLE     Direct Submission
      JOURNAL   Exported Sunday, September 11, 2016 from SnapGene Viewer 3.1.4
                http://www.miaolingbio.com
    FEATURES             Location/Qualifiers
         source          1..3747
                         /organism="synthetic DNA construct"
                         /mol_type="other DNA"
         promoter        1..19
                         /note="SP6 promoter"
                         /note="promoter for bacteriophage SP6 RNA polymerase"
         primer_bind     complement(834..850)
                         /note="M13 rev"
                         /note="common sequencing primer, one of multiple similar 
                         variants"
         protein_bind    858..874
                         /bound_moiety="lac repressor encoded by lacI"
                         /note="lac operator"
                         /note="The lac repressor binds to the lac operator to 
                         inhibit transcription in E. coli. This inhibition can be 
                         relieved by adding lactose or 
                         isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside (IPTG)."
         promoter        complement(882..912)
                         /note="lac promoter"
                         /note="promoter for the E. coli lac operon"
         protein_bind    927..948
                         /bound_moiety="E. coli catabolite activator protein"
                         /note="CAP binding site"
                         /note="CAP binding activates transcription in the presence 
                         of cAMP."
         rep_origin      complement(1236..1824)
                         /direction=LEFT
                         /note="ori"
                         /note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of 
                         replication"
         CDS             complement(1995..2855)
                         /codon_start=1
                         /gene="bla"
                         /product="beta-lactamase"
                         /note="AmpR"
                         /note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and
                         related antibiotics"
                         /translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
                         ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIRYSQNDLVEYS
                         PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW
                         EPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
                         LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
                         LIKHW"
         promoter        complement(2856..2960)
                         /gene="bla"
                         /note="AmpR promoter"
    ORIGIN
            1 atttaggtga cactatagaa ctcacctatc tccccaacac ctaataacat tcaatcactc
           61 tttccactaa ccacctatct acatcaccaa gatatcacta gttctcgagc tcggtacctg
          121 tccgcggtcg cgacgtacgc gggcggccgc cataaattgg atccatatat agggcccggg
          181 ttataattac ctcaggtcga cgtcccatgg ttttgtatag aatttacggc tagcgccgga
          241 tgcgacgccg gtcgcgtctt atccggcctt cctatatcag gcggtgttta agacgccgcc
          301 gcttcgccca aatccttatg ccggttcgac gactggacaa aatactgttt atcttcccag
          361 cgcaggcagg ttaatgtacc accccagcag cagccggtat ccagcgcgta tataccttcc
          421 ggcgtacctt tgccctccag cgatgcccag tgaccaaagg cgatgctgta ttcttcagcg
          481 acagggccag gaatcgcaaa ccacggtttc agtggggcag gggcctcttc cggcgattct
          541 tactagctag tatgcatagg tgctgaaata taaagtttgt gtttctaaaa cacacgtggt
          601 acgtacgata acgtacagtg tttttccctc cacttaaatc gaagggtagt gtcttggagc
          661 gcgcggagta aacatatatg gttcatatat gtccgtaggc acgtaaaaaa agcgagggat
          721 tcgaattccc ccggaacccc cggttggggc ccacgcctcg atcgagcaaa aaaaaaaaaa
          781 aagaaaaaaa aaaaaaaaaa aagctttccc gcggccagct tggcgtaatc atggtcatag
          841 ctgtttcctg tgtgaaattg ttatccgctc acaattccac acaacatacg agccggaagc
          901 ataaagtgta aagcctgggg tgcctaatga gtgagctaac tcacattaat tgcgttgcgc
          961 tcactgcccg ctttccagtc gggaaacctg tcgtgccagc tgcattaatg aatcggccaa
         1021 cgcgcgggga gaggcggttt gcgtattggg cgctcttccg cttcctcact cactgactcg
         1081 ctgcgctcgg tcgctcggct gcggcgagcg gtatcagctc actcaaaggc ggtaatacgg
         1141 ttatccacag aatcagggga taacgcagga aagaacatgt gagcaaaagg ccagcaaaag
         1201 gccaggaacc gtaaaaaggc cgcgttgctg gcgtttttcc ataggctccg cccccctgac
         1261 gagcatcaca aaaatcgacg ctcaagtcag aggtggcgaa acccgacagg actataaaga
         1321 taccaggcgt ttccccctgg aagctccctc gtgcgctctc ctgttccgac cctgccgctt
         1381 accggatacc tgtccgcctt tctcccttcg ggaagcgtgg cgctttctca tagctcacgc
         1441 tgtaggtatc tcagttcggt gtaggtcgtt cgctccaagc tgggctgtgt gcacgaaccc
         1501 cccgttcagc ccgaccgctg cgccttatcc ggtaactatc gtcttgagtc caacccggta
         1561 agacacgact tatcgccact ggcagcagcc actggtaaca ggattagcag agcgaggtat
         1621 gtaggcggtg ctacagagtt cttgaagtgg tggcctaact acggctacac tagaagaaca
         1681 gtatttggta tctgcgctct gctgaagcca gttaccttcg gaaaaagagt tggtagctct
         1741 tgatccggca aacaaaccac cgctggtagc ggtggttttt ttgtttgcaa gcagcagatt
         1801 acgcgcagaa aaaaaggatc tcaagaagat cctttgatct tttctacggg gtctgacgct
         1861 cagtggaacg aaaactcacg ttaagggatt ttggtcatga gattatcaaa aaggatcttc
         1921 acctagatcc ttttaaatta aaaatgaagt tttaaatcaa tctaaagtat atatgagtaa
         1981 acttggtctg acagttacca atgcttaatc agtgaggcac ctatctcagc gatctgtcta
         2041 tttcgttcat ccatagttgc ctgactcccc gtcgtgtaga taactacgat acgggagggc
         2101 ttaccatctg gccccagtgc tgcaatgata ccgcgagacc cacgctcacc ggctccagat
         2161 ttatcagcaa taaaccagcc agccggaagg gccgagcgca gaagtggtcc tgcaacttta
         2221 tccgcctcca tccagtctat taattgttgc cgggaagcta gagtaagtag ttcgccagtt
         2281 aatagtttgc gcaacgttgt tgccattgct acaggcatcg tggtgtcacg ctcgtcgttt
         2341 ggtatggctt cattcagctc cggttcccaa cgatcaaggc gagttacatg atcccccatg
         2401 ttgtgcaaaa aagcggttag ctccttcggt cctccgatcg ttgtcagaag taagttggcc
         2461 gcagtgttat cactcatggt tatggcagca ctgcataatt ctcttactgt catgccatcc
         2521 gtaagatgct tttctgtgac tggtgagtac tcaaccaagt cattctgaga atagcgtatg
         2581 cggcgaccga gttgctcttg cccggcgtca atacgggata ataccgcgcc acatagcaga
         2641 actttaaaag tgctcatcat tggaaaacgt tcttcggggc gaaaactctc aaggatctta
         2701 ccgctgttga gatccagttc gatgtaaccc actcgtgcac ccaactgatc ttcagcatct
         2761 tttactttca ccagcgtttc tgggtgagca aaaacaggaa ggcaaaatgc cgcaaaaaag
         2821 ggaataaggg cgacacggaa atgttgaata ctcatactct tcctttttca atattattga
         2881 agcatttatc agggttattg tctcatgagc ggatacatat ttgaatgtat ttagaaaaat
         2941 aaacaaatag gggttccgcg cacatttccc cgaaaagtgc cacctgacgt ctaagaaacc
         3001 attattatca tgacattaac ctataaaaat aggcgtatca cgaggccctt tcgtctcgcg
         3061 cgtttcggtg atgacggtga aaacctctga cacatgcagc tcccggagac ggtcacagct
         3121 tgtctgtaag cggatgccgg gagcagacaa gcccgtcagg gcgcgtcagc gggtgttggc
         3181 gggtgtcggg gctggcttaa ctatgcggca tcagagcaga ttgtactgag agtgcaccat
         3241 tcgacgctct cccttatgcg actcctgcat taggaagcag cccagtagta ggttgaggcc
         3301 gttgagcacc gccgccgcaa ggaatggtgc atgcaaggag atggcgccca acagtccccc
         3361 ggccacgggg cctgccacca tacccacgcc gaaacaagcg ctcatgagcc cgaagtggcg
         3421 agcccgatct tccccatcgg tgatgtcggc gatataggcg ccagcaaccg cacctgtggc
         3481 gccggtgatg ccggccacga tgcgtccggc gtagaggatc tggctagcga tgaccctgct
         3541 gattggttcg ctgaccattt ccgggtgcgg gacggcgtta ccagaaactc agaaggttcg
         3601 tccaaccaaa ccgactctgg cggcagttta cgagagagat gatagggtct gcttcagtaa
         3661 gccagatgct acacaattag gcttgtacat actgtcgtta gaacgcggct acaattaata
         3721 cataacctta tgtatcatac acatacg
    //

    质粒菌株产品操作说明书
    一、扩增流程
             收到产品后,请先根据产品管壁标签来判断产品形式,并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
             1、质粒干粉(常温运输,存于-20度,90天保质期,请务必转化挑单克隆培养,不要直接使用和测序)
                  收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒;
                  1100μl 感受态于冰上解冻10min,加入2μl质粒,再冰浴30min后,42热激60s,不要搅动,再冰浴2min;(从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作)
                  加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡37培养45min
                  6000rpm离心5min,仅留100μl上清液重悬细菌沉淀,并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;(可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布,可以比传统涂布方法获得更多转化子)
                  将平板正向培养1h,再倒置37培养14h。如果要求是30度则培养20h
    (菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态,要先转克隆感受态,重提质粒后再导入表达感受态)
                  挑取单菌落至LB液体培养基中,加入对应抗生素,220rpm震荡培养14h,根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
            2、甘油菌种(冰袋运输,存于-80,保质期90天,请务必划线挑单克隆培养)
                  四区划线后挑单菌落培养,酵母菌需要先液体复苏再四区划线,再挑单菌落液体培养。
            3、穿刺菌种(冰袋运输,存于4,保质期7天)
                  穿刺接种,液体培养后四区划线,再挑单菌落液体培养。
            4、菌落平板(冰袋运输,存于4,保质期7天)
                  直接挑取单菌落至液体培养基中。
            5、液体质粒(冰袋运输,存于-20,保质期90天)
                  单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
            6、滤纸质粒(常温运输,存于-20度,90天保质期,请务必转化挑单克隆培养,不要直接使用和测序)
                  收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中,加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min,吸取5ul质粒转化,离心全涂。

    二、转化图片
    产品细节图片2
    产品细节图片3
    P0314/pTrc-Taq聚合酶基因质粒
    P1152/pAKTaq聚合酶基因质粒
    P1411/pET-KOD聚合酶基因质粒
    P0315/pET22b-KOD聚合酶基因质粒
    P0776/pKOD-3聚合酶基因质粒
    P1407/pET16B.Pfu聚合酶基因质粒
    P1758/pECMV-3×FLAG-T7 RNA polymerase聚合酶基因质粒
    P1775/T7opt in pCAGGS(T7 RNA polymerase)聚合酶基因质粒
    P3218/pCAG-T7pol聚合酶基因质粒
    P2140/DCT.VV.Orf170聚合酶基因质粒
    P2637/pK19mobSacB-T7 polymerase聚合酶基因质粒
     

     

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    图标文献和实验
    相关实验
    • 手把手教你如何查找质粒图谱

      ,TaKaRa,有木有;pGM-T,天根,有木有;一些表达载体,使用最广泛的,pET 系列,Novagen 公司(默克)的;有双 MCS 的 Duet 系列载体,Novagen 的;毕赤酵母表达质粒 pPIC3.5k,pPIC9k,pPICZA,pPICZaA 等等,都是 invitrogen 的;另外一些 pYES 酿酒酵母表达系统,也是 invitrogen 的,因此知道常见的质粒是哪个公司的,去他们公司网站上肯定可以找到该质粒的相关信息。在他们公司主页搜索栏直接搜索质粒名称,得到质粒序列,图谱什么的

    • 如何查找质粒图谱

      数据库 方法三:一些重要试剂公司网页 其实也是一些网站,因为这些网站除了得到质粒图谱等信息,还可以得到关于质粒使用方面的信息,因此单独拿出来做一个分类。现在很多质粒,特别是应用比较广泛的质粒都一些公司商业化的质粒,基本是由一个质粒你就会联想到一个公司的名字。 比如简单的,克隆载体pMD18-T,TaKaRa,有木有;pGM-T,天根,有木有; 一些表达载体,使用最广泛的,pET系列,Novagen公司(默克)的;有双MCS的Duet系列载体,Novagen的;毕赤酵母表达质粒

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      基化酶活性 (e)仅有外切核酸酶活性,甲基化酶活性由另外一种酶提供 5.下面有关限制酶的叙述哪些是正确的?( ) (a)限制酶是外切酶而不是内切酶 (b)限制酶在特异序列(识别位点)对DNA进行切割 (c)同一种限制酶切割DNA时留下的末端序列总是相同的 (d)一些限制酶在识别位点内稍有不同的点切割双链DNA,产生黏末端 (e)一些限制酶在识别位点内相同的位置切割双链DNA,产生平末端 6.第一个被分离的Ⅱ酶是: ( ) (a)EcoK (b)HindⅢ (c)HindⅡ (d)EcoB

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