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pCS2+鱼类表达质粒

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  • ¥100 - 1000
  • Xybio
  • 上海
  • P0313
  • 2025年07月09日
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      -20

    • 保质期

      2年

    • 英文名

      pCS2+

    • 库存

      100

    • 供应商

      上海烜雅生物科技有限公司

    • 规格

      干粉/液体

    基本信息
    名称:pCS2+鱼类表达质粒
    别称: pCS2+
    启动子: CMV
    复制子: pUC
    终止子: SV40 poly(A) signal
    质粒分类: 哺乳动物表达载体;广宿主载体;体外表达载体
    质粒大小: 4095bp
    原核抗性: Amp
    克隆菌株: DH5a
    培养条件: 37度
    表达宿主: 原核细胞、哺乳动物、非洲爪蟾、鸟类、斑马鱼
    培养条件: 参考相关文献
    5'测序引物: SP6 fwd(MCS1)、T3 fwd(MCS2)
    3'测序引物: EBV rev(MCS1)、SV40 polyA rev(MCS2)


    质粒属性
    载体宿主: 哺乳细胞,鱼类
    载体用途: 蛋白表达
    基因种属: 空载体
    基因类型: ORF
    原核抗性: Amp
    筛选标记:  
    荧光蛋白:


    质粒简介
       pCS2+载体能够在多种细胞中进行高水平的瞬表达,pCS2+载体同时也能进行体外转录和翻译。

    质粒图谱
    产品细节图片1 产品细节图片2

    质粒序列
    LOCUS       Exported                4095 bp ds-DNA     circular SYN 06-SEP-2016
    DEFINITION  synthetic circular DNA
    ACCESSION   .
    VERSION     .
    KEYWORDS    pCS2+
    SOURCE      synthetic DNA construct
      ORGANISM  synthetic DNA construct
    REFERENCE   1  (bases 1 to 4095)
      AUTHORS   .
      TITLE     Direct Submission
      JOURNAL   Exported Saturday, September 10, 2016 from SnapGene Viewer 3.1.4
                http://www.miaolingbio.com
    FEATURES             Location/Qualifiers
         source          1..4095
                         /organism="synthetic DNA construct"
                         /mol_type="other DNA"
         promoter        35..53
                         /note="SP6 promoter"
                         /note="promoter for bacteriophage SP6 RNA polymerase"
         promoter        complement(122..139)
                         /note="T7 promoter"
                         /note="promoter for bacteriophage T7 RNA polymerase"
         polyA_signal    144..278
                         /note="SV40 poly(A) signal"
                         /note="SV40 polyadenylation signal"
         promoter        complement(391..409)
                         /note="T3 promoter"
                         /note="promoter for bacteriophage T3 RNA polymerase"
         primer_bind     complement(430..446)
                         /note="M13 rev"
                         /note="common sequencing primer, one of multiple similar 
                         variants"
         protein_bind    454..470
                         /bound_moiety="lac repressor encoded by lacI"
                         /note="lac operator"
                         /note="The lac repressor binds to the lac operator to 
                         inhibit transcription in E. coli. This inhibition can be 
                         relieved by adding lactose or 
                         isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside (IPTG)."
         promoter        complement(478..508)
                         /note="lac promoter"
                         /note="promoter for the E. coli lac operon"
         protein_bind    523..544
                         /bound_moiety="E. coli catabolite activator protein"
                         /note="CAP binding site"
                         /note="CAP binding activates transcription in the presence 
                         of cAMP."
         rep_origin      complement(832..1420)
                         /direction=LEFT
                         /note="pUC ori"
                         /note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of 
                         replication"
         CDS             complement(1591..2451)
                         /codon_start=1
                         /gene="bla"
                         /product="beta-lactamase"
                         /note="AmpR"
                         /note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and
                         related antibiotics"
                         /translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
                         ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
                         PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW
                         EPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
                         LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
                         LIKHW"
         promoter        complement(2452..2556)
                         /gene="bla"
                         /note="AmpR promoter"
         rep_origin      complement(2582..3037)
                         /direction=LEFT
                         /note="f1 ori"
                         /note="f1 bacteriophage origin of replication; arrow 
                         indicates direction of (+) strand synthesis"
         promoter        3111..4095
                         /note="CMV IE94 promoter"
                         /note="enhancer/promoter region of simian cytomegalovirus 
                         major immediate early transcription unit IE94"
    ORIGIN
            1 cgccattctg cctggggacg tcggagcaag cttgatttag gtgacactat agaatacaag
           61 ctacttgttc tttttgcagg atcccatcga ttcgaattca aggcctctcg agcctctaga
          121 actatagtga gtcgtattac gtagatccag acatgataag atacattgat gagtttggac
          181 aaaccacaac tagaatgcag tgaaaaaaat gctttatttg tgaaatttgt gatgctattg
          241 ctttatttgt aaccattata agctgcaata aacaagttaa caacaacaat tgcattcatt
          301 ttatgtttca ggttcagggg gaggtgtggg aggtttttta attcgcggcc gcggcgccaa
          361 tgcattgggc ccggtaccca gcttttgttc cctttagtga gggttaattg cgcgcttggc
          421 gtaatcatgg tcatagctgt ttcctgtgtg aaattgttat ccgctcacaa ttccacacaa
          481 catacgagcc ggaagcataa agtgtaaagc ctggggtgcc taatgagtga gctaactcac
          541 attaattgcg ttgcgctcac tgcccgcttt ccagtcggga aacctgtcgt gccagctgca
          601 ttaatgaatc ggccaacgcg cggggagagg cggtttgcgt attgggcgct cttccgcttc
          661 ctcgctcact gactcgctgc gctcggtcgt tcggctgcgg cgagcggtat cagctcactc
          721 aaaggcggta atacggttat ccacagaatc aggggataac gcaggaaaga acatgtgagc
          781 aaaaggccag caaaaggcca ggaaccgtaa aaaggccgcg ttgctggcgt ttttccatag
          841 gctccgcccc cctgacgagc atcacaaaaa tcgacgctca agtcagaggt ggcgaaaccc
          901 gacaggacta taaagatacc aggcgtttcc ccctggaagc tccctcgtgc gctctcctgt
          961 tccgaccctg ccgcttaccg gatacctgtc cgcctttctc ccttcgggaa gcgtggcgct
         1021 ttctcatagc tcacgctgta ggtatctcag ttcggtgtag gtcgttcgct ccaagctggg
         1081 ctgtgtgcac gaaccccccg ttcagcccga ccgctgcgcc ttatccggta actatcgtct
         1141 tgagtccaac ccggtaagac acgacttatc gccactggca gcagccactg gtaacaggat
         1201 tagcagagcg aggtatgtag gcggtgctac agagttcttg aagtggtggc ctaactacgg
         1261 ctacactaga aggacagtat ttggtatctg cgctctgctg aagccagtta ccttcggaaa
         1321 aagagttggt agctcttgat ccggcaaaca aaccaccgct ggtagcggtg gtttttttgt
         1381 ttgcaagcag cagattacgc gcagaaaaaa aggatctcaa gaagatcctt tgatcttttc
         1441 tacggggtct gacgctcagt ggaacgaaaa ctcacgttaa gggattttgg tcatgagatt
         1501 atcaaaaagg atcttcacct agatcctttt aaattaaaaa tgaagtttta aatcaatcta
         1561 aagtatatat gagtaaactt ggtctgacag ttaccaatgc ttaatcagtg aggcacctat
         1621 ctcagcgatc tgtctatttc gttcatccat agttgcctga ctccccgtcg tgtagataac
         1681 tacgatacgg gagggcttac catctggccc cagtgctgca atgataccgc gagacccacg
         1741 ctcaccggct ccagatttat cagcaataaa ccagccagcc ggaagggccg agcgcagaag
         1801 tggtcctgca actttatccg cctccatcca gtctattaat tgttgccggg aagctagagt
         1861 aagtagttcg ccagttaata gtttgcgcaa cgttgttgcc attgctacag gcatcgtggt
         1921 gtcacgctcg tcgtttggta tggcttcatt cagctccggt tcccaacgat caaggcgagt
         1981 tacatgatcc cccatgttgt gcaaaaaagc ggttagctcc ttcggtcctc cgatcgttgt
         2041 cagaagtaag ttggccgcag tgttatcact catggttatg gcagcactgc ataattctct
         2101 tactgtcatg ccatccgtaa gatgcttttc tgtgactggt gagtactcaa ccaagtcatt
         2161 ctgagaatag tgtatgcggc gaccgagttg ctcttgcccg gcgtcaatac gggataatac
         2221 cgcgccacat agcagaactt taaaagtgct catcattgga aaacgttctt cggggcgaaa
         2281 actctcaagg atcttaccgc tgttgagatc cagttcgatg taacccactc gtgcacccaa
         2341 ctgatcttca gcatctttta ctttcaccag cgtttctggg tgagcaaaaa caggaaggca
         2401 aaatgccgca aaaaagggaa taagggcgac acggaaatgt tgaatactca tactcttcct
         2461 ttttcaatat tattgaagca tttatcaggg ttattgtctc atgagcggat acatatttga
         2521 atgtatttag aaaaataaac aaataggggt tccgcgcaca tttccccgaa aagtgccacc
         2581 taaattgtaa gcgttaatat tttgttaaaa ttcgcgttaa atttttgtta aatcagctca
         2641 ttttttaacc aataggccga aatcggcaaa atcccttata aatcaaaaga atagaccgag
         2701 atagggttga gtgttgttcc agtttggaac aagagtccac tattaaagaa cgtggactcc
         2761 aacgtcaaag ggcgaaaaac cgtctatcag ggcgatggcc cactacgtga accatcaccc
         2821 taatcaagtt ttttggggtc gaggtgccgt aaagcactaa atcggaaccc taaagggagc
         2881 ccccgattta gagcttgacg gggaaagccg gcgaacgtgg cgagaaagga agggaagaaa
         2941 gcgaaaggag cgggcgctag ggcgctggca agtgtagcgg tcacgctgcg cgtaaccacc
         3001 acacccgccg cgcttaatgc gccgctacag ggcgcgtccc attcgccatt caggctgcgc
         3061 aactgttggg aagggcgatc ggtgcgggcc tcttcgctat tacgccagtc gaccatagcc
         3121 aattcaatat ggcgtatatg gactcatgcc aattcaatat ggtggatctg gacctgtgcc
         3181 aattcaatat ggcgtatatg gactcgtgcc aattcaatat ggtggatctg gaccccagcc
         3241 aattcaatat ggcggacttg gcaccatgcc aattcaatat ggcggacttg gcactgtgcc
         3301 aactggggag gggtctactt ggcacggtgc caagtttgag gaggggtctt ggccctgtgc
         3361 caagtccgcc atattgaatt ggcatggtgc caataatggc ggccatattg gctatatgcc
         3421 aggatcaata tataggcaat atccaatatg gccctatgcc aatatggcta ttggccaggt
         3481 tcaatactat gtattggccc tatgccatat agtattccat atatgggttt tcctattgac
         3541 gtagatagcc cctcccaatg ggcggtccca tataccatat atggggcttc ctaataccgc
         3601 ccatagccac tcccccattg acgtcaatgg tctctatata tggtctttcc tattgacgtc
         3661 atatgggcgg tcctattgac gtatatggcg cctcccccat tgacgtcaat tacggtaaat
         3721 ggcccgcctg gctcaatgcc cattgacgtc aataggacca cccaccattg acgtcaatgg
         3781 gatggctcat tgcccattca tatccgttct cacgccccct attgacgtca atgacggtaa
         3841 atggcccact tggcagtaca tcaatatcta ttaatagtaa cttggcaagt acattactat
         3901 tggaaggacg ccagggtaca ttggcagtac tcccattgac gtcaatggcg gtaaatggcc
         3961 cgcgatggct gccaagtaca tccccattga cgtcaatggg gaggggcaat gacgcaaatg
         4021 ggcgttccat tgacgtaaat gggcggtagg cgtgcctaat gggaggtcta tataagcaat
         4081 gctcgtttag ggaac
    //
     

    质粒菌株产品操作说明书
    一、扩增流程
             收到产品后,请先根据产品管壁标签来判断产品形式,并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
             1、质粒干粉(常温运输,存于-20度,90天保质期,请务必转化挑单克隆培养,不要直接使用和测序)
                  收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒;
                  1100μl 感受态于冰上解冻10min,加入2μl质粒,再冰浴30min后,42热激60s,不要搅动,再冰浴2min;(从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作)
                  加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡37培养45min
                  6000rpm离心5min,仅留100μl上清液重悬细菌沉淀,并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;(可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布,可以比传统涂布方法获得更多转化子)
                  将平板正向培养1h,再倒置37培养14h。如果要求是30度则培养20h
    (菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态,要先转克隆感受态,重提质粒后再导入表达感受态)
                  挑取单菌落至LB液体培养基中,加入对应抗生素,220rpm震荡培养14h,根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
            2、甘油菌种(冰袋运输,存于-80,保质期90天,请务必划线挑单克隆培养)
                  四区划线后挑单菌落培养,酵母菌需要先液体复苏再四区划线,再挑单菌落液体培养。
            3、穿刺菌种(冰袋运输,存于4,保质期7天)
                  穿刺接种,液体培养后四区划线,再挑单菌落液体培养。
            4、菌落平板(冰袋运输,存于4,保质期7天)
                  直接挑取单菌落至液体培养基中。
            5、液体质粒(冰袋运输,存于-20,保质期90天)
                  单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
            6、滤纸质粒(常温运输,存于-20度,90天保质期,请务必转化挑单克隆培养,不要直接使用和测序)
                  收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中,加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min,吸取5ul质粒转化,离心全涂。

    二、转化图片
    产品细节图片3
    产品细节图片4
    P4346/pECMV-3×FLAG-LGALS3BP人源基因质粒
    P4347/pECMV-3×FLAG-CPT1A人源基因质粒
    P4348/pECMV-3×FLAG-CDH16(1同义突变)人源基因质粒
    P4349/pECMV-3×FLAG-CDK5人源基因质粒
    P4350/pECMV-3×FLAG-CLPB人源基因质粒
    P4351/pECMV-3×FLAG-DECR2人源基因质粒
    P4352/pECMV-3×FLAG-DHRS1人源基因质粒
    P4353/pECMV-3×FLAG-EIF2S2人源基因质粒
    P4354/pECMV-3×FLAG-EMC2人源基因质粒
    P4355/pECMV-3×FLAG-ERP27人源基因质粒
     

     

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