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- Xybio
- 上海
- P0802
- 2025年07月12日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20
- 保质期：
2年
- 英文名：
p5921
- 库存：
100
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格：
干粉/液体
名称：p5921念珠菌类质粒
别称: p5921
| 质粒分类: | 其他宿主载体；白色念珠菌表达质粒 |
|---|---|
| 克隆菌株: | DH5a |
| 培养条件: | 37度 |
质粒属性
| 质粒宿主： | 丝状真菌 |
|---|---|
| 质粒用途： | 蛋白表达 |
| 片段类型： | |
| 片段物种： | |
| 原核抗性： | Amp |
| 筛选标记： | URA3 |
| 荧光标记： |
质粒简介
p5921质粒由上海烜雅生物科技有限公司提供
质粒图谱
质粒序列：详询
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
| P4124/pECMV-3×FLAG-SCAMP5人源基因质粒 |
| P4125/pECMV-3×FLAG-SCAMP4人源基因质粒 |
| P4126/pECMV-3×FLAG-SLC26A1人源基因质粒 |
| P4127/pECMV-3×FLAG-SOD2人源基因质粒 |
| P4128/pECMV-3×FLAG-STX5人源基因质粒 |
| P4129/pECMV-3×FLAG-FAM3A人源基因质粒 |
| P4130/pECMV-3×FLAG-GLIPR1L1人源基因质粒 |
| P4131/pECMV-3×FLAG-DDIT4人源基因质粒 |
| P4132/pECMV-3×FLAG-ABHD4人源基因质粒 |
| P4133/pECMV-3×FLAG-CD69人源基因质粒 |
| P4134/pECMV-3×FLAG-ING5人源基因质粒 |
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文献和实验E.coli 的乳糖操纵子(元)含Z、Y及A三个结构基因,分别编码半乳糖苷酶、透酶和乙酰基转移酶,此外还有一个操纵序列O、一个启动子序列P及一个调节基因I.I基因编码一种阻遏蛋白,后者与O序列结合,使操纵子(元)受阻遏而处于关闭状态. 在启动序列P上游还有一个分解(代谢)物基因激活蛋白(CAP)结合位点.由P序列、O序列和CAP结合位点共同构成lac操纵子的调控区,三个酶的编码基因即由同一调控区调节,实现基因产物的协调表达 。 在没有乳糖存在时,lac操纵子(元)处于阻遏
克隆了转基因水稻的外源基因旁侧序列。先用小量法提取转基因水稻的总DNA，总DNA用10倍过量的限制内切酶进行过夜酶切，酶切片段进行自连接，然后根据工程质粒的T-DNA区设计2对反向引物，进行套式PCR扩增旁侧序列。建立了适合于处理大量材料的克隆转基因水稻中外源基因旁侧序列的技术体系。在1周内克隆了35个转基因水稻株系中外源基因的旁侧序列，长度在300～750bp之间。I-PCR法快速、高效、稳定，操作相对简单，花费少，PCR引物设计比较方便。 1.3.2 P-PCR P-PCR是由Jones
病毒分类 classification of viruses
法，此外还有其他一些分类法等。除昆虫以外的无脊椎动物病毒由于寄主的多样性，还有许多没有充分地研究，至今还无定论的。植物病毒的分类由 ICNV（现在称为 ICPV）的植物病毒分会提出以下四项为指标分类试行方案：（ 1）在植物寄主内的动态；（ 2）病毒质粒的性状；（ 3）病毒质粒的成份；（ 4）与传播媒介的关系。此外还有霉菌类的青霉病毒（ Penicillium virus）等的真菌噬菌体（ My cophage）、曲霉病毒（ Aspergillus virus）等．关于细菌噬菌体方面，在同一植物病毒分科会上提出各以核酸
