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- 技术资料
- 库存:
100
- 英文名:
p201N Cas9
- 保质期:
90天
- 供应商:
优利科(上海)生命科学有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
质粒干粉
产品名称:p201N Cas9质粒
别称:Plasmid#59175
产品规格:质粒干粉
有效期:90天,请尽快转化。
保存温度:一般在-20℃,置于-80℃保存时间更长。
运输方式:常温运输,1周内。
应用领域:科研
复制子:
感受态:Stbl3
培养温度:37度
质粒宿主:植物
质粒用途:基因敲除
注意事项:转化前请准确查找该质粒相应的抗性、感受态和培养温度。(请向客服QQ索要质粒信息目录)


使用说明:
1、收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl无菌水溶解质粒,室温放置1min;
2、从-80℃冰箱中取出相应的感受态,置于冰盒上解冻,并做好标记;
3、取2μl质粒加至100μl感受态中,冰浴30min;
4、42℃热激90s,再冰浴2min;
5、加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡培养45min;
6、6000rpm离心5min,仅留100ul上清混匀菌体沉淀;
7、混匀后的菌液加至对应抗性的LB平板上,倒入适量玻璃珠,涂匀液体;
8、将平板正向培养1h,再倒置培养12h~16h;
9、挑取单克隆菌落至对应抗性的LB液体培养基中,震荡培养12h~16h,根据实验需要提取质粒。
| pFUPI AoT5Cyp猫头鹰猴基因质粒 |
| pPH37酵母基因质粒 |
| pET28a-PPK大肠基因质粒 |
| pTXB1-Tn5大肠基因质粒 |
| pAX01-PPK大肠基因质粒 |
| pMA2775大肠基因质粒 |
| pdnaKp-EGFP大肠启动子质粒 |
| pcDNA-4mtD3cpv基因质粒 |
| pBAV1k-T5-LUX基因质粒 |
| pTE-10M0X其它基因质粒 |
| pSR58.6蓝藻基因质粒 |
| pTA7002-avrPto番茄基因质粒 |
| pE6c荧光基因质粒 |
| pSK+KanaRpsL抗性基因质粒 |
| pCY 3010-07抗性基因质粒 |
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文献和实验CRISPR/Cas9 是一种强大的基因组编辑工具,今天我们介绍 CRISPR/Cas9 系统操作。以下操作说明是基于作者冰糖个人实验室操作,仅供参考。 质粒介绍我们使用的是 Feng Zhang 实验室的系统的 pX330 质粒,如下图所示: 酶切系统 37 ℃, 3 hr;Run 1% gel,回收。Elute 到 50 mL H2O。我们利用 BbsI 消化载体形成粘末端,以利于下游 oligo 退火产物的连接;酶切时请充分,且绝对不能加 CIP 处理
-like (N-terminal RNase H fold) domain and the HNH(McrA-like) domain, each responsible for cleavage of one strand ofthe duplex DNA molecule. Therefore, there are two different versionsof Cas9 that can be used for genome modifi cation, the wildtype Cas9
1、质粒的概念 质粒(Plasmid)是一种存在于细菌、酵母等微生物细胞中的小型环状双链 DNA 分子,能够独立于宿主染色体进行自我复制,并通常携带对宿主生存非必需但具有特定功能的基因(如抗生素抗性基因)。质粒是分子生物学和基因工程中最重要的工具之一。 质粒根据其用途可以分为多种不同的类型,如用于保存序列信息的克隆质粒(如:pUC 系列质粒),用于表达蛋白的质粒(如哺乳动物细胞表达所用的 pcDNA3.1 系列质粒),用于基因编辑的质粒(如哺乳动物细胞基因编辑所用的 espCas9-2A











