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- Xybio
- 上海
- P3007
- 2025年07月13日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20
- 保质期：
2年
- 英文名：
Plasmid#55173
- 库存：
100
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格：
干粉/液体
基本信息
名称：Pveg枯草启动子质粒
别称: Plasmid#55173
启动子：veg
复制子: pUC
原核抗性: Chl
克隆菌株: DH5a
培养条件: 37度
质粒属性
载体宿主：大肠杆菌
载体用途：蛋白表达
基因种属：人
基因类型：Promoter
原核抗性：Chl
真核抗性：
荧光蛋白：
质粒简介
Pveg枯草启动子质粒
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported 2307 bp ds-DNA circular SYN 10-JUL-2018
DEFINITION synthetic circular DNA
ACCESSION .
VERSION .
KEYWORDS Pveg
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 2307)
AUTHORS .
TITLE Direct Submission
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..2307
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
terminator 2..59
/note="his operon terminator"
/note="This putative transcriptin terminator from the E.
coli his operon has a 2-bp deletion introduced during
synthesis. Its efficiency has not been determined."
rep_origin complement(254..842)
/direction=LEFT
/note="ori"
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
terminator 1025..1119
/note="lambda t0 terminator"
/note="transcription terminator from phage lambda"
CDS complement(1140..1799)
/codon_start=1
/gene="cat"
/product="chloramphenicol acetyltransferase"
/note="Chl"
/note="confers resistance to chloramphenicol"
/translation="MEKKITGYTTVDISQWHRKEHFEAFQSVAQCTYNQTVQLDITAFL
KTVKKNKHKFYPAFIHILARLMNAHPEFRMAMKDGELVIWDSVHPCYTVFHEQTETFSS
LWSEYHDDFRQFLHIYSQDVACYGENLAYFPKGFIENMFFVSANPWVSFTSFDLNVANM
DNFFAPVFTMGKYYTQGDKVLMPLAIQVHHAVCDGFHVGRMLNELQQYCDEWQGGA"
terminator 1983..2026
/note="bacterial terminator"
/note="putative bacterial transcription terminator"
misc_feature 2029..2050
/note="BioBrick prefix"
/note="BioBrick prefix for parts that do not start with
""ATG"""
misc_feature 2051..2302
/note="veg promoter"
ORIGIN
1 gtccggcaaa aaagggcaag gtgtcaccac cctgcccttt ttctttaaaa ccgaaaagat
61 tacttcgcgt tatgcaggct tcctcgctca ctgactcgct gcgctcggtc gttcggctgc
121 ggcgagcggt atcagctcac tcaaaggcgg taatacggtt atccacagaa tcaggggata
181 acgcaggaaa gaacatgtga gcaaaaggcc agcaaaaggc caggaaccgt aaaaaggccg
241 cgttgctggc gtttttccac aggctccgcc cccctgacga gcatcacaaa aatcgacgct
301 caagtcagag gtggcgaaac ccgacaggac tataaagata ccaggcgttt ccccctggaa
361 gctccctcgt gcgctctcct gttccgaccc tgccgcttac cggatacctg tccgcctttc
421 tcccttcggg aagcgtggcg ctttctcata gctcacgctg taggtatctc agttcggtgt
481 aggtcgttcg ctccaagctg ggctgtgtgc acgaaccccc cgttcagccc gaccgctgcg
541 ccttatccgg taactatcgt cttgagtcca acccggtaag acacgactta tcgccactgg
601 cagcagccac tggtaacagg attagcagag cgaggtatgt aggcggtgct acagagttct
661 tgaagtggtg gcctaactac ggctacacta gaagaacagt atttggtatc tgcgctctgc
721 tgaagccagt taccttcgga aaaagagttg gtagctcttg atccggcaaa caaaccaccg
781 ctggtagcgg tggttttttt gtttgcaagc agcagattac gcgcagaaaa aaaggatctc
841 aagaagatcc tttgatcttt tctacggggt ctgacgctca gtggaacgaa aactcacgtt
901 aagggatttt ggtcatgaga ttatcaaaaa ggatcttcac ctagatcctt ttaaattaaa
961 aatgaagttt taaatcaatc taaagtatat atgagtaaac ttggtctgac agctcgaggc
1021 ttggattctc accaataaaa aacgcccggc ggcaaccgag cgttctgaac aaatccagat
1081 ggagttctga ggtcattact ggatctatca acaggagtcc aagcgagctc gatatcaaat
1141 tacgccccgc cctgccactc atcgcagtac tgttgtaatt cattaagcat tctgccgaca
1201 tggaagccat cacaaacggc atgatgaacc tgaatcgcca gcggcatcag caccttgtcg
1261 ccttgcgtat aatatttgcc catggtgaaa acgggggcga agaagttgtc catattggcc
1321 acgtttaaat caaaactggt gaaactcacc cagggattgg ctgagacgaa aaacatattc
1381 tcaataaacc ctttagggaa ataggccagg ttttcaccgt aacacgccac atcttgcgaa
1441 tatatgtgta gaaactgccg gaaatcgtcg tggtattcac tccagagcga tgaaaacgtt
1501 tcagtttgct catggaaaac ggtgtaacaa gggtgaacac tatcccatat caccagctca
1561 ccgtctttca ttgccatacg aaattccgga tgagcattca tcaggcgggc aagaatgtga
1621 ataaaggccg gataaaactt gtgcttattt ttctttacgg tctttaaaaa ggccgtaata
1681 tccagctgaa cggtctggtt ataggtacat tgagcaactg actgaaatgc ctcaaaatgt
1741 tctttacgat gccattggga tatatcaacg gtggtatatc cagtgatttt tttctccatt
1801 ttagcttcct tagctcctga aaatctcgat aactcaaaaa atacgcccgg tagtgatctt
1861 atttcattat ggtgaaagtt ggaacctctt acgtgcccga tcaactcgag tgccacctga
1921 cgtctaagaa accattatta tcatgacatt aacctataaa aataggcgta tcacgaggca
1981 gaatttcaga taaaaaaaat ccttagcttt cgctaaggat gatttctgga attcgcggcc
2041 gcttctagag ggagttctga gaattggtat gccttataag tccaattaac agttgaaaac
2101 ctgcatagga gagctatgcg ggttttttat tttacataat gatacataat ttaccgaaac
2161 ttgcggaaca taattgagga atcatagaat tttgtcaaaa taattttatt gacaacgtct
2221 tattaacgtt gatataattt aaattttatt tgacaaaaat gggctcgtgt tgtacaataa
2281 atgtagttac tagtagcggc cgctgca
//
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
名称：Pveg枯草启动子质粒
别称: Plasmid#55173
启动子：veg
复制子: pUC
原核抗性: Chl
克隆菌株: DH5a
培养条件: 37度
质粒属性
载体宿主：大肠杆菌
载体用途：蛋白表达
基因种属：人
基因类型：Promoter
原核抗性：Chl
真核抗性：
荧光蛋白：
质粒简介
Pveg枯草启动子质粒
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported 2307 bp ds-DNA circular SYN 10-JUL-2018
DEFINITION synthetic circular DNA
ACCESSION .
VERSION .
KEYWORDS Pveg
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 2307)
AUTHORS .
TITLE Direct Submission
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..2307
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
terminator 2..59
/note="his operon terminator"
/note="This putative transcriptin terminator from the E.
coli his operon has a 2-bp deletion introduced during
synthesis. Its efficiency has not been determined."
rep_origin complement(254..842)
/direction=LEFT
/note="ori"
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
terminator 1025..1119
/note="lambda t0 terminator"
/note="transcription terminator from phage lambda"
CDS complement(1140..1799)
/codon_start=1
/gene="cat"
/product="chloramphenicol acetyltransferase"
/note="Chl"
/note="confers resistance to chloramphenicol"
/translation="MEKKITGYTTVDISQWHRKEHFEAFQSVAQCTYNQTVQLDITAFL
KTVKKNKHKFYPAFIHILARLMNAHPEFRMAMKDGELVIWDSVHPCYTVFHEQTETFSS
LWSEYHDDFRQFLHIYSQDVACYGENLAYFPKGFIENMFFVSANPWVSFTSFDLNVANM
DNFFAPVFTMGKYYTQGDKVLMPLAIQVHHAVCDGFHVGRMLNELQQYCDEWQGGA"
terminator 1983..2026
/note="bacterial terminator"
/note="putative bacterial transcription terminator"
misc_feature 2029..2050
/note="BioBrick prefix"
/note="BioBrick prefix for parts that do not start with
""ATG"""
misc_feature 2051..2302
/note="veg promoter"
ORIGIN
1 gtccggcaaa aaagggcaag gtgtcaccac cctgcccttt ttctttaaaa ccgaaaagat
61 tacttcgcgt tatgcaggct tcctcgctca ctgactcgct gcgctcggtc gttcggctgc
121 ggcgagcggt atcagctcac tcaaaggcgg taatacggtt atccacagaa tcaggggata
181 acgcaggaaa gaacatgtga gcaaaaggcc agcaaaaggc caggaaccgt aaaaaggccg
241 cgttgctggc gtttttccac aggctccgcc cccctgacga gcatcacaaa aatcgacgct
301 caagtcagag gtggcgaaac ccgacaggac tataaagata ccaggcgttt ccccctggaa
361 gctccctcgt gcgctctcct gttccgaccc tgccgcttac cggatacctg tccgcctttc
421 tcccttcggg aagcgtggcg ctttctcata gctcacgctg taggtatctc agttcggtgt
481 aggtcgttcg ctccaagctg ggctgtgtgc acgaaccccc cgttcagccc gaccgctgcg
541 ccttatccgg taactatcgt cttgagtcca acccggtaag acacgactta tcgccactgg
601 cagcagccac tggtaacagg attagcagag cgaggtatgt aggcggtgct acagagttct
661 tgaagtggtg gcctaactac ggctacacta gaagaacagt atttggtatc tgcgctctgc
721 tgaagccagt taccttcgga aaaagagttg gtagctcttg atccggcaaa caaaccaccg
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1501 tcagtttgct catggaaaac ggtgtaacaa gggtgaacac tatcccatat caccagctca
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1621 ataaaggccg gataaaactt gtgcttattt ttctttacgg tctttaaaaa ggccgtaata
1681 tccagctgaa cggtctggtt ataggtacat tgagcaactg actgaaatgc ctcaaaatgt
1741 tctttacgat gccattggga tatatcaacg gtggtatatc cagtgatttt tttctccatt
1801 ttagcttcct tagctcctga aaatctcgat aactcaaaaa atacgcccgg tagtgatctt
1861 atttcattat ggtgaaagtt ggaacctctt acgtgcccga tcaactcgag tgccacctga
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1981 gaatttcaga taaaaaaaat ccttagcttt cgctaaggat gatttctgga attcgcggcc
2041 gcttctagag ggagttctga gaattggtat gccttataag tccaattaac agttgaaaac
2101 ctgcatagga gagctatgcg ggttttttat tttacataat gatacataat ttaccgaaac
2161 ttgcggaaca taattgagga atcatagaat tttgtcaaaa taattttatt gacaacgtct
2221 tattaacgtt gatataattt aaattttatt tgacaaaaat gggctcgtgt tgtacaataa
2281 atgtagttac tagtagcggc cgctgca
//
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
| P4882/pCMV-SPORT6-ACAA1（点突变）人源基因质粒 |
| P3867/pCMV-SPORT6-CBS（1同义突变）人源基因质粒 |
| P3868/pCMV-SPORT6-VPS33A人源基因质粒 |
| P3869/pCMV-SPORT6-SLC38A1（1同义突变）人源基因质粒 |
| P3870/pCMV-SPORT6-SF3A3（1同义突变）人源基因质粒 |
| P3871/pCMV-SPORT6-NCAPD3人源基因质粒 |
| P3872/pCMV-SPORT6-ORC1人源基因质粒 |
| P3873/pCMV-SPORT6-PTPN4人源基因质粒 |
| P3874/pCMV-SPORT6-MAP3K11（1同义突变）人源基因质粒 |
| P3875/pCMV-SPORT6-MED24（2同义突变）人源基因质粒 |
| P3876/pCMV-SPORT6-GPT人源基因质粒 |
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文献和实验相关实验
【求助】关于构建目的基因启动子序列的虫荧光素酶报告基因重组质粒的问题请教
longgyin8341 最近想做虫荧光素酶报告基因，但是从来没有做过，想求院子里高手指教： 我是要观察一种药物是否能作用于细胞内的几种核受体（NFkB，PPAR，ER（目前还不清楚究竟是哪个，需要分别试验））的启动子区域，影响这几个核受体的转录水平，从而影响细胞的一些功能（比如凋亡等）。计划将这三种核受体的启动子区域分别扩增出来，然后与虫荧光素酶（或其他报告基因）构建重组质粒。再分别转染细胞，加入药物处理，观察荧光素酶的活性，以探索药物是否
Marburg遗传背景清楚，是研究枯草芽孢杆菌的标准菌株；AS1作为胞内表达的备用菌株，常用于表达外源蛋白。而胞外蛋白酶缺陷菌株WB800N能有效解决由于枯草芽孢杆菌丰富的蛋白酶导致的蛋白表达产物降解问题。 2 给力的表达载体 大部分的枯草芽孢杆菌不含内源性质粒，并且一般不能识别大肠杆菌中的启动子。最初的枯草芽孢杆菌载体源于金黄色葡萄球菌，其结构不稳定并易丢失。现在普遍使用的质粒载体是由枯草芽孢杆菌隐性质粒与大肠杆菌质粒构成的穿梭载体，可在大肠杆菌中完成基因片段的连接克隆
-GFP 等）以及其他应用的质粒。根据质粒的拷贝数不同，又可以分为高拷贝质粒（质粒可以在细胞内复制成几百个拷贝）和低拷贝质粒（质粒在细胞内只有＜20 个拷贝）。质粒的拷贝数通常受到复制子的调控。 质粒上通常会带有多种元件，例如，复制起始位点（ORI），抗性基因，多克隆位点，启动子，终止子，标签序列等等。质粒上至少要带有复制位点（ORI），否则无法进行复制；除了一些特殊质粒（如 minicircle plasmid）之外，绝大多数质粒都带有抗性基因，用于抗生素筛选。多克隆位点可以通过酶切，酶连或者同源
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