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- Xybio
- 上海
- P1918
- 2025年07月07日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20
- 保质期：
2年
- 英文名：
Plasmid#78577
- 库存：
100
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格：
干粉/液体
名称：PL99链霉菌表达质粒
别称: Plasmid#78577
| 别称: | Plasmid#78577;链霉 |
|---|---|
| 原核抗性: | Apr |
| 克隆菌株: | DH5a |
| 培养条件: | 37度 |
质粒属性
| 载体宿主： | 丝状真菌 |
|---|---|
| 载体用途： | 蛋白表达 |
| 基因种属： | |
| 基因类型： | ORF |
| 原核抗性： | Apr |
| 筛选标记： | |
| 荧光蛋白： |
质粒简介
PL99质粒由上海烜雅生物科技有限公司提供
质粒图谱
质粒序列：详询
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
| P0549/pCDNA3-NR3C1人源基因质粒 |
| P0550/C-Myc人源基因质粒 |
| P0551/SOX2人源基因质粒 |
| P0552/HA-p73α-pCDNA3人源基因质粒 |
| P0553/pEGFP-C3-STING人源基因质粒 |
| P0556/pCDNA3.1(+)-hIAPP人源基因质粒 |
| P0557/pCDNA3.1-adiponetin人源基因质粒 |
| P0560/pCDNA3-FLAG-DHX36人源基因质粒 |
| P0621/pCMV-SGLT1人源基因质粒 |
| P0561/pCMV-FLAG-PDK1人源基因质粒 |
| P0562/pCMV-FLAG-DCLK1人源基因质粒 |
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Nature 子刊：超声波调控肿瘤内细菌的基因表达，助力肿瘤免疫治疗
的生存提供保护，使得肿瘤内的细菌能在其中不断繁殖。 不仅如此，通过基因工程手段还可以对细菌进行改造，以增强其对肿瘤的靶向迁移能力，减少对机体的毒性，大大提高了肿瘤细菌治疗的安全性；更为重要的是，细菌还是优良的基因表达宿主，可将外源基因插入原核表达质粒后导入细菌或整合进入细菌基因组，从而表达抗肿瘤因子以增强其抗肿瘤效果。 为此，近年来基于细菌的靶向给药系统在肿瘤治疗方面的应用受到了科研工作者的广泛关注。随着合成生物学技术的发展与引入，如启动子工程、智能基因线路等，有望大大提高细菌治疗肿瘤的智能
longyue99 各位大虾好 ，试验需要活化和抑制 NF-kB的活性 ，我试着用HBx表达质粒转染增强其活性，用碧云天的BAY 11-7082抑制其活性，用pNF-kB-LUC检测NF-kB的活性变化，均告失败，哪位有其他办法？望不吝赐教 lwjssry BAY 11-7082是肯定可以抑制的，莫非你的试剂有问题？换家公司的试试 lwjssry 还有，你的荧光素酶质粒的插入片段是什么
