- ￥100 - 1000
- Xybio
- 上海
- P0318
- 2026年04月17日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20
- 保质期：
2年
- 英文名：
NM_005028.5;PI5P4KA;PIP5K2A;PIP5KII-
- 库存：
100
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格：
干粉/液体
名称：pCaspase切割酶基因质粒
别称: NM_005028.5;PI5P4KA;PIP5K2A;PIP5KII-
启动子：无
复制子: pUC
原核抗性: Amp
筛选标记：无
克隆菌株: DH5a
培养条件: 37度
| 5'测序引物: | M13R |
|---|---|
| 3'测序引物: | M13F |
| 备注: | 1221bp |
质粒属性
载体宿主：大肠杆菌
载体用途：PCR模板
基因种属：人
基因类型：cDNA
原核抗性：Amp
真核抗性：
荧光蛋白：
质粒简介
pBluescriptR-PIP4K2A人源基因模板质粒
质粒图谱
质粒序列：详询
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
| P4054/pCMV-SPORT6-MINA人源基因质粒 |
| P4055/pCMV-SPORT6-PRKACB人源基因质粒 |
| P4056/pCMV-SPORT6-FAM107A人源基因质粒 |
| P4057/pCMV-SPORT6-NOV（1点突变）人源基因质粒 |
| P4058/pCMV-SPORT6-AIMP2人源基因质粒 |
| P4059/pCMV-SPORT6-CYSTM1人源基因质粒 |
| P4060/pCMV-SPORT6-TMEM159（1点突变）人源基因质粒 |
| P4061/pCMV-SPORT6-MT3人源基因质粒 |
| P4062/pCMV-SPORT6-NIP7人源基因质粒 |
| P4063/pCMV-SPORT6-BTBD10(617-1284bp）人源基因质粒 |
| P4064/pCMV-SPORT6-CALM1人源基因质粒 |
| P4065/pCMV-SPORT6-DAD1人源基因质粒 |
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文献和实验生物发光（bioluminescence）是指生物体发光或生物体提取物在实验室中发光的现象。生物发光成像是一种研究技术，它使用来自自然物种的荧光素酶或这些酶的改良荧光素酶来跟踪细胞或动物内部的生物过程。荧光素酶通常编码在报告基因中，该报告基因被引入到感兴趣的细胞或动物中。感光相机(CCD)检测到的光子数代表了所选生物过程的变化。 实验原理： 利用转基因技术，将荧光素酶基因连接于启动子下游，稳定整合到质粒内，再通过原核显微注射的方法，使其整合到小鼠受精卵基因组中下，并稳定遗传给后代。使荧
【求助】请教大家一个关于报告基因质粒瞬时转染与报告基因表达的问题，问题比较长，谢谢
lsdcfhyj 想请教大家，在我研究的信号转导通路中，转录因子要形成二聚体转移到核内与调控序列结合启动后续目的基因的表达，报告基因质粒含转录因子调控序列和荧光素酶基因，我在想如果用瞬时转染的话，那么质粒只在细胞质之中，并未整合到核基因组中，转录因子又必须是要转入核内与调控序列结合启动荧光素酶表达的，那瞬时转染质粒的细胞能用于报告基因分析吗？ woxingwosu 用瞬时转染是可以用来做报告基因分析的，这类的例子不在
【求助】用于检测双荧光素酶报告基因的细胞究竟是应该同时转染两种质粒呢还是只需一个质粒上面同时含两种荧光素酶报告基因？谢谢
lsdcfhyj 向大家请教关于双荧光素酶报告基因检测系统与单荧光素酶报告基因检测系统的问题，两者的区别我基本清楚了，只是我没弄清楚用于检测的细胞究竟是应该同时转染两种质粒（分别含虫荧光素酶报告基因和海肾荧光素酶报告基因）呢还是只需一个质粒上面同时含两种荧光素酶报告基因？还有一个问题是如果是要转染两种质粒的话，是只需在含虫荧光素酶基因质粒中插入所要检测的调控元件基因，还是两种质粒中的荧光素酶基因前都要插入调控元件？谢谢 msniu
