- ￥1280
- Frdbio
- MCC0026
- 2025年08月09日
企业认证
相关产品推荐更多 >
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-80
- 规格：
100ul*10
ER2566感受态细胞
| 产品编号 |
产品名称 |
规格 |
| MCC0026 |
ER2566感受态细胞 |
100μl*10 |
保存条件：-80℃。
1.产品简介：
本产品是采用大肠杆菌ER2566感受态细胞菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞。是NEB公司开发的具有超高转化效率的蛋白表达原核菌株，能够有效抑制表达的异源蛋白在大肠杆菌体内的降解。
基因型：F-λ-fhuA2[lon]ompTlacZ::T7genegalsulA11Δ(mcrC-mrr)114::IS10R(mcr-73::miniTn10-TetS)2R(zgb-210::Tn10)
(TetS)endA1[dcm]
特点：1．Lac启动子启动下游T7RNA聚合酶的表达，可用于T7启动子表达载体(如pET系列)的高水平蛋白表达。2．fhuA2赋予ER2566菌株对噬菌体T1的抗性。3．lon和ompT蛋白酶缺陷菌株，能够有效防止表达的异源目的蛋白在细菌体内的降解。4．Δ(mcrC-mrr)114，mcr-73突变的存在使ER2566菌株无法对外源DNA进行标记、限制，提高了外源甲基化DNA的转化效率。pUC19质粒检测，转化效率可达108cfu/μg DNA。
2.使用说明：
1．取100 μl感受态细胞置于冰浴中融化。
2．待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入目的DNA（根据实际情况加入适量的DNA，通常100 μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA所饱和），用移液器轻轻吹打混匀，冰浴30min。
3．42℃热击45sec，然后快速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3min，该过程不要摇动离心管。
4．每个离心管中加入450 μl无菌的SOC或LB培养基（不含抗生素），混匀后置于37℃摇床， 150 rpm振荡培养45～60min使菌体复苏。
5．根据实验需求，取适量已转化的感受态细胞，加到含相应抗生素的SOC或LB固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于37℃直至液体被吸收，倒置培养，37℃培养12~16h。
3.注意事项：
1．刚化冻的细胞转化效率最高，避免反复化冻。
2．质粒质量和浓度等的差异会使转化效率有所下降。
*本试剂仅供实验室研究使用
风险提示：丁香通仅作为第三方平台，为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全，合理判断，谨慎选购商品，商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品，请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验的衍生物，不携带有些野生分离株含有的EcoRI或其它II型限制系统。 注意： 已证实，克隆实验中mcr 和mrr 位点可减少哺乳动物(8,9,11,14)和植物(9,15)甲基化序列的回收量。一般说来，从含有甲胞嘧啶有机体中克隆基因组DNA时，明智之举是使用无Mcr 和Mrr系统的菌种[如NEB 10-beta 感受态细胞(NEB #C3019)、NEB表达感受态细胞(NEB #C2523)或者T7 表达感受态细胞(NEB #C2566)]。这些有机体包括所有哺乳动物和高等植物，以及许多原核
的试管中，挑选新鲜的大肠杆菌ER2738单菌落，37℃、230r/min振荡培养过夜，将2m1ER2738培养液转入20m1 LB溶液中继续培养50min，然后37℃、100r/min振荡培养15min，即成为感受态细胞。加入噬菌体后，继续37℃、100r/min培养10min，再转到37℃、230r/min的条件下继续培养4．5h，培养物于4℃、8 000r/min离心15min，取上清液加入1/6体积的PEG―NaCl于4℃沉淀过夜。将溶液于4℃、10 000 r/min离心20min，弃
IMPACT™-TWIN 蛋白纯化系统，可以不用任何蛋白酶，表达N-Cys的蛋白，一步过柱纯化。
即可将目的蛋白与融合蛋白(内含肽与几丁质结合蛋白)分离。 可介导蛋白质的体外连接、标记和环化。 应用IPTG诱导的T7启动子可使蛋白高水平表达并可对其进行有效调控，有助表达有细胞毒性的蛋白。 IMPACT-TWIN系统包含成分: 三种pTWIN E.coli表达载体：pTWIN1, pTWIN2, pTWIN-MBP1 几丁质珠：与表达的融合蛋白具有亲和性，用于蛋白纯化。（结合容量=2 mg/ml） E.coli菌株 ER2566 兔抗CBD（Chitin Binding
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
