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2年
- 英文名：
pFastBacHTB
- 库存：
100
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格：
干粉/液体
基本信息
名称：pFastBacHTB昆虫胞内质粒
别称: pFastBacHTB
质粒属性
质粒简介
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported 4857 bp ds-DNA circular SYN 09-SEP-2016
DEFINITION synthetic circular DNA
ACCESSION .
VERSION .
KEYWORDS Untitled
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 4857)
AUTHORS .
TITLE Direct Submission
JOURNAL Exported Friday, September 9, 2016 from SnapGene Viewer 3.1.4
http://www.miaolingbio.com
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..4857
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
rep_origin 2..457
/direction=RIGHT
/note="f1 ori"
/note="f1 bacteriophage origin of replication; arrow
indicates direction of (+) strand synthesis"
promoter 484..588
/gene="bla"
/note="AmpR promoter"
CDS 589..1449
/codon_start=1
/gene="bla"
/product="beta-lactamase"
/note="AmpR"
/note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and
related antibiotics"
/translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW
EPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
LIKHW"
rep_origin 1620..2208
/direction=RIGHT
/note="ori"
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
mobile_element 2511..2735
/mobile_element_type="transposon:Tn7"
/note="Tn7R"
/note="mini-Tn7 element (right end of the Tn7 transposon)"
CDS complement(2802..3335)
/codon_start=1
/gene="aacC1"
/product="gentamycin acetyltransferase"
/note="GmR"
/note="confers resistance to gentamycin"
/translation="MLRSSNDVTQQGSRPKTKLGGSSMGIIRTCRLGPDQVKSMRAALD
LFGREFGDVATYSQHQPDSDYLGNLLRSKTFIALAAFDQEAVVGALAAYVLPRFEQPRS
EIYIYDLAVSGEHRRQGIATALINLLKHEANALGAYVIYVQADYGDDPAVALYTKLGIR
EEVMHFDIDPSTAT"
promoter complement(3524..3552)
/gene="intI1 (promoter lies within the coding sequence)"
/note="Pc promoter"
/note="class 1 integron promoter"
promoter 3904..3995
/gene="polh from Autographa californica"
/note="polyhedrin promoter"
/note="promoter for the baculovirus polyhedrin gene"
CDS 4062..4079
/codon_start=1
/product="6xHis affinity tag"
/note="6xHis"
/translation="HHHHHH"
CDS 4101..4121
/codon_start=1
/product="tobacco etch virus (TEV) protease recognition and
cleavage site"
/note="TEV site"
/translation="ENLYFQG"
polyA_signal 4347..4481
/note="SV40 poly(A) signal"
/note="SV40 polyadenylation signal"
mobile_element 4510..4675
/mobile_element_type="transposon:Tn7"
/note="Tn7L"
/note="mini-Tn7 element (left end of the Tn7 transposon)"
ORIGIN
1 gacgcgccct gtagcggcgc attaagcgcg gcgggtgtgg tggttacgcg cagcgtgacc
61 gctacacttg ccagcgccct agcgcccgct cctttcgctt tcttcccttc ctttctcgcc
121 acgttcgccg gctttccccg tcaagctcta aatcgggggc tccctttagg gttccgattt
181 agtgctttac ggcacctcga ccccaaaaaa cttgattagg gtgatggttc acgtagtggg
241 ccatcgccct gatagacggt ttttcgccct ttgacgttgg agtccacgtt ctttaatagt
301 ggactcttgt tccaaactgg aacaacactc aaccctatct cggtctattc ttttgattta
361 taagggattt tgccgatttc ggcctattgg ttaaaaaatg agctgattta acaaaaattt
421 aacgcgaatt ttaacaaaat attaacgttt acaatttcag gtggcacttt tcggggaaat
481 gtgcgcggaa cccctatttg tttatttttc taaatacatt caaatatgta tccgctcatg
541 agacaataac cctgataaat gcttcaataa tattgaaaaa ggaagagtat gagtattcaa
601 catttccgtg tcgcccttat tccctttttt gcggcatttt gccttcctgt ttttgctcac
661 ccagaaacgc tggtgaaagt aaaagatgct gaagatcagt tgggtgcacg agtgggttac
721 atcgaactgg atctcaacag cggtaagatc cttgagagtt ttcgccccga agaacgtttt
781 ccaatgatga gcacttttaa agttctgcta tgtggcgcgg tattatcccg tattgacgcc
841 gggcaagagc aactcggtcg ccgcatacac tattctcaga atgacttggt tgagtactca
901 ccagtcacag aaaagcatct tacggatggc atgacagtaa gagaattatg cagtgctgcc
961 ataaccatga gtgataacac tgcggccaac ttacttctga caacgatcgg aggaccgaag
1021 gagctaaccg cttttttgca caacatgggg gatcatgtaa ctcgccttga tcgttgggaa
1081 ccggagctga atgaagccat accaaacgac gagcgtgaca ccacgatgcc tgtagcaatg
1141 gcaacaacgt tgcgcaaact attaactggc gaactactta ctctagcttc ccggcaacaa
1201 ttaatagact ggatggaggc ggataaagtt gcaggaccac ttctgcgctc ggcccttccg
1261 gctggctggt ttattgctga taaatctgga gccggtgagc gtgggtctcg cggtatcatt
1321 gcagcactgg ggccagatgg taagccctcc cgtatcgtag ttatctacac gacggggagt
1381 caggcaacta tggatgaacg aaatagacag atcgctgaga taggtgcctc actgattaag
1441 cattggtaac tgtcagacca agtttactca tatatacttt agattgattt aaaacttcat
1501 ttttaattta aaaggatcta ggtgaagatc ctttttgata atctcatgac caaaatccct
1561 taacgtgagt tttcgttcca ctgagcgtca gaccccgtag aaaagatcaa aggatcttct
1621 tgagatcctt tttttctgcg cgtaatctgc tgcttgcaaa caaaaaaacc accgctacca
1681 gcggtggttt gtttgccgga tcaagagcta ccaactcttt ttccgaaggt aactggcttc
1741 agcagagcgc agataccaaa tactgtcctt ctagtgtagc cgtagttagg ccaccacttc
1801 aagaactctg tagcaccgcc tacatacctc gctctgctaa tcctgttacc agtggctgct
1861 gccagtggcg ataagtcgtg tcttaccggg ttggactcaa gacgatagtt accggataag
1921 gcgcagcggt cgggctgaac ggggggttcg tgcacacagc ccagcttgga gcgaacgacc
1981 tacaccgaac tgagatacct acagcgtgag cattgagaaa gcgccacgct tcccgaaggg
2041 agaaaggcgg acaggtatcc ggtaagcggc agggtcggaa caggagagcg cacgagggag
2101 cttccagggg gaaacgcctg gtatctttat agtcctgtcg ggtttcgcca cctctgactt
2161 gagcgtcgat ttttgtgatg ctcgtcaggg gggcggagcc tatggaaaaa cgccagcaac
2221 gcggcctttt tacggttcct ggccttttgc tggccttttg ctcacatgtt ctttcctgcg
2281 ttatcccctg attctgtgga taaccgtatt accgcctttg agtgagctga taccgctcgc
2341 cgcagccgaa cgaccgagcg cagcgagtca gtgagcgagg aagcggaaga gcgcctgatg
2401 cggtattttc tccttacgca tctgtgcggt atttcacacc gcagaccagc cgcgtaacct
2461 ggcaaaatcg gttacggttg agtaataaat ggatgccctg cgtaagcggg tgtgggcgga
2521 caataaagtc ttaaactgaa caaaatagat ctaaactatg acaataaagt cttaaactag
2581 acagaatagt tgtaaactga aatcagtcca gttatgctgt gaaaaagcat actggacttt
2641 tgttatggct aaagcaaact cttcattttc tgaagtgcaa attgcccgtc gtattaaaga
2701 ggggcgtggc caagggcatg gtaaagacta tattcgcggc gttgtgacaa tttaccgaac
2761 aactccgcgg ccgggaagcc gatctcggct tgaacgaatt gttaggtggc ggtacttggg
2821 tcgatatcaa agtgcatcac ttcttcccgt atgcccaact ttgtatagag agccactgcg
2881 ggatcgtcac cgtaatctgc ttgcacgtag atcacataag caccaagcgc gttggcctca
2941 tgcttgagga gattgatgag cgcggtggca atgccctgcc tccggtgctc gccggagact
3001 gcgagatcat agatatagat ctcactacgc ggctgctcaa acctgggcag aacgtaagcc
3061 gcgagagcgc caacaaccgc ttcttggtcg aaggcagcaa gcgcgatgaa tgtcttacta
3121 cggagcaagt tcccgaggta atcggagtcc ggctgatgtt gggagtaggt ggctacgtct
3181 ccgaactcac gaccgaaaag atcaagagca gcccgcatgg atttgacttg gtcagggccg
3241 agcctacatg tgcgaatgat gcccatactt gagccaccta actttgtttt agggcgactg
3301 ccctgctgcg taacatcgtt gctgctgcgt aacatcgttg ctgctccata acatcaaaca
3361 tcgacccacg gcgtaacgcg cttgctgctt ggatgcccga ggcatagact gtacaaaaaa
3421 acagtcataa caagccatga aaaccgccac tgcgccgtta ccaccgctgc gttcggtcaa
3481 ggttctggac cagttgcgtg agcgcatacg ctacttgcat tacagtttac gaaccgaaca
3541 ggcttatgtc aactgggttc gtgccttcat ccgtttccac ggtgtgcgtc acccggcaac
3601 cttgggcagc agcgaagtcg aggcatttct gtcctggctg gcgaacgagc gcaaggtttc
3661 ggtctccacg catcgtcagg cattggcggc cttgctgttc ttctacggca aggtgctgtg
3721 cacggatctg ccctggcttc aggagatcgg aagacctcgg ccgtcgcggc gcttgccggt
3781 ggtgctgacc ccggatgaag tggttcgcat cctcggtttt ctggaaggcg agcatcgttt
3841 gttcgcccag gactctagct atagttctag tggttggcta cgtatactcc ggaatattaa
3901 tagatcatgg agataattaa aatgataacc atctcgcaaa taaataagta ttttactgtt
3961 ttcgtaacag ttttgtaata aaaaaaccta taaatattcc ggattattca taccgtccca
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4381 aaagcaatag catcacaaat ttcacaaata aagcattttt ttcactgcat tctagttgtg
4441 gtttgtccaa actcatcaat gtatcttatc atgtctggat ctgatcactg atatcgccta
4501 ggagatccga accagataag tgaaatctag ttccaaacta ttttgtcatt tttaattttc
4561 gtattagctt acgacgctac acccagttcc catctatttt gtcactcttc cctaaataat
4621 ccttaaaaac tccatttcca cccctcccag ttcccaacta ttttgtccgc ccacagcggg
4681 gcatttttct tcctgttatg tttttaatca aacatcctgc caactccatg tgacaaaccg
4741 tcatcttcgg ctactttttc tctgtcacag aatgaaaatt tttctgtcat ctcttcgtta
4801 ttaatgtttg taattgactg aatatcaacg cttatttgca gcctgaatgg cgaatgg
//
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
名称：pFastBacHTB昆虫胞内质粒
别称: pFastBacHTB
| 启动子: | PH |
|---|---|
| 复制子: | pUC |
| 终止子: | SV40 poly(A) signal |
| 质粒分类: | 广宿主系列，昆虫细胞载体 |
| 质粒大小: | 4857bp |
| 质粒标签: | N-His；N-TEV |
| 原核抗性: | Amp |
| 筛选标记: | Gen |
| 克隆菌株: | DH5a |
| 培养条件: | 37度 |
| 表达宿主: | 昆虫细胞 |
| 诱导方式: | 无须诱导，瞬时表达 |
| 5'测序引物: | pFastbac-F: TATTCCGGATTATTCATACC |
| 3'测序引物: | pFastBac-R: ACAAATGTGGTATGGCTGA |
质粒属性
| 载体宿主： | 昆虫细胞 |
|---|---|
| 载体用途： | 蛋白表达 |
| 基因种属： | 空载体 |
| 基因类型： | ORF |
| 原核抗性： | Amp |
| 筛选标记： | |
| 荧光蛋白： |
质粒简介
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported 4857 bp ds-DNA circular SYN 09-SEP-2016
DEFINITION synthetic circular DNA
ACCESSION .
VERSION .
KEYWORDS Untitled
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 4857)
AUTHORS .
TITLE Direct Submission
JOURNAL Exported Friday, September 9, 2016 from SnapGene Viewer 3.1.4
http://www.miaolingbio.com
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..4857
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
rep_origin 2..457
/direction=RIGHT
/note="f1 ori"
/note="f1 bacteriophage origin of replication; arrow
indicates direction of (+) strand synthesis"
promoter 484..588
/gene="bla"
/note="AmpR promoter"
CDS 589..1449
/codon_start=1
/gene="bla"
/product="beta-lactamase"
/note="AmpR"
/note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and
related antibiotics"
/translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW
EPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
LIKHW"
rep_origin 1620..2208
/direction=RIGHT
/note="ori"
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
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EEVMHFDIDPSTAT"
promoter complement(3524..3552)
/gene="intI1 (promoter lies within the coding sequence)"
/note="Pc promoter"
/note="class 1 integron promoter"
promoter 3904..3995
/gene="polh from Autographa californica"
/note="polyhedrin promoter"
/note="promoter for the baculovirus polyhedrin gene"
CDS 4062..4079
/codon_start=1
/product="6xHis affinity tag"
/note="6xHis"
/translation="HHHHHH"
CDS 4101..4121
/codon_start=1
/product="tobacco etch virus (TEV) protease recognition and
cleavage site"
/note="TEV site"
/translation="ENLYFQG"
polyA_signal 4347..4481
/note="SV40 poly(A) signal"
/note="SV40 polyadenylation signal"
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ORIGIN
1 gacgcgccct gtagcggcgc attaagcgcg gcgggtgtgg tggttacgcg cagcgtgacc
61 gctacacttg ccagcgccct agcgcccgct cctttcgctt tcttcccttc ctttctcgcc
121 acgttcgccg gctttccccg tcaagctcta aatcgggggc tccctttagg gttccgattt
181 agtgctttac ggcacctcga ccccaaaaaa cttgattagg gtgatggttc acgtagtggg
241 ccatcgccct gatagacggt ttttcgccct ttgacgttgg agtccacgtt ctttaatagt
301 ggactcttgt tccaaactgg aacaacactc aaccctatct cggtctattc ttttgattta
361 taagggattt tgccgatttc ggcctattgg ttaaaaaatg agctgattta acaaaaattt
421 aacgcgaatt ttaacaaaat attaacgttt acaatttcag gtggcacttt tcggggaaat
481 gtgcgcggaa cccctatttg tttatttttc taaatacatt caaatatgta tccgctcatg
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721 atcgaactgg atctcaacag cggtaagatc cttgagagtt ttcgccccga agaacgtttt
781 ccaatgatga gcacttttaa agttctgcta tgtggcgcgg tattatcccg tattgacgcc
841 gggcaagagc aactcggtcg ccgcatacac tattctcaga atgacttggt tgagtactca
901 ccagtcacag aaaagcatct tacggatggc atgacagtaa gagaattatg cagtgctgcc
961 ataaccatga gtgataacac tgcggccaac ttacttctga caacgatcgg aggaccgaag
1021 gagctaaccg cttttttgca caacatgggg gatcatgtaa ctcgccttga tcgttgggaa
1081 ccggagctga atgaagccat accaaacgac gagcgtgaca ccacgatgcc tgtagcaatg
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1261 gctggctggt ttattgctga taaatctgga gccggtgagc gtgggtctcg cggtatcatt
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1441 cattggtaac tgtcagacca agtttactca tatatacttt agattgattt aaaacttcat
1501 ttttaattta aaaggatcta ggtgaagatc ctttttgata atctcatgac caaaatccct
1561 taacgtgagt tttcgttcca ctgagcgtca gaccccgtag aaaagatcaa aggatcttct
1621 tgagatcctt tttttctgcg cgtaatctgc tgcttgcaaa caaaaaaacc accgctacca
1681 gcggtggttt gtttgccgga tcaagagcta ccaactcttt ttccgaaggt aactggcttc
1741 agcagagcgc agataccaaa tactgtcctt ctagtgtagc cgtagttagg ccaccacttc
1801 aagaactctg tagcaccgcc tacatacctc gctctgctaa tcctgttacc agtggctgct
1861 gccagtggcg ataagtcgtg tcttaccggg ttggactcaa gacgatagtt accggataag
1921 gcgcagcggt cgggctgaac ggggggttcg tgcacacagc ccagcttgga gcgaacgacc
1981 tacaccgaac tgagatacct acagcgtgag cattgagaaa gcgccacgct tcccgaaggg
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2401 cggtattttc tccttacgca tctgtgcggt atttcacacc gcagaccagc cgcgtaacct
2461 ggcaaaatcg gttacggttg agtaataaat ggatgccctg cgtaagcggg tgtgggcgga
2521 caataaagtc ttaaactgaa caaaatagat ctaaactatg acaataaagt cttaaactag
2581 acagaatagt tgtaaactga aatcagtcca gttatgctgt gaaaaagcat actggacttt
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2701 ggggcgtggc caagggcatg gtaaagacta tattcgcggc gttgtgacaa tttaccgaac
2761 aactccgcgg ccgggaagcc gatctcggct tgaacgaatt gttaggtggc ggtacttggg
2821 tcgatatcaa agtgcatcac ttcttcccgt atgcccaact ttgtatagag agccactgcg
2881 ggatcgtcac cgtaatctgc ttgcacgtag atcacataag caccaagcgc gttggcctca
2941 tgcttgagga gattgatgag cgcggtggca atgccctgcc tccggtgctc gccggagact
3001 gcgagatcat agatatagat ctcactacgc ggctgctcaa acctgggcag aacgtaagcc
3061 gcgagagcgc caacaaccgc ttcttggtcg aaggcagcaa gcgcgatgaa tgtcttacta
3121 cggagcaagt tcccgaggta atcggagtcc ggctgatgtt gggagtaggt ggctacgtct
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3241 agcctacatg tgcgaatgat gcccatactt gagccaccta actttgtttt agggcgactg
3301 ccctgctgcg taacatcgtt gctgctgcgt aacatcgttg ctgctccata acatcaaaca
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质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
| P4262/pCMV-SPORT6-CST3人源基因质粒 |
| P4264/pCMV-SPORT6-C1QTNF6人源基因质粒 |
| P4265/pCMV-SPORT6-PYCR2人源基因质粒 |
| P4269/pCMV-SPORT6-TOR3A人源基因质粒 |
| P4272/pCMV-SPORT6-ACKR2人源基因质粒 |
| P4273/pCMV-SPORT6-NKAP（1点突变）人源基因质粒 |
| P4275/pCMV-SPORT6-RTKN人源基因质粒 |
| P4276/pCMV-SPORT6-SLC22A17人源基因质粒 |
| P4278/pCMV-SPORT6-TNFRSF21（428-1968bp）人源基因质粒 |
| P4279/pCMV-SPORT6-EBAG9人源基因质粒 |
| P4280/pCMV-SPORT6-APH1A人源基因质粒 |
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文献和实验相关实验
-GFP 等）以及其他应用的质粒。根据质粒的拷贝数不同，又可以分为高拷贝质粒（质粒可以在细胞内复制成几百个拷贝）和低拷贝质粒（质粒在细胞内只有＜20 个拷贝）。质粒的拷贝数通常受到复制子的调控。 质粒上通常会带有多种元件，例如，复制起始位点（ORI），抗性基因，多克隆位点，启动子，终止子，标签序列等等。质粒上至少要带有复制位点（ORI），否则无法进行复制；除了一些特殊质粒（如 minicircle plasmid）之外，绝大多数质粒都带有抗性基因，用于抗生素筛选。多克隆位点可以通过酶切，酶连或者同源
一. 植物遗传转化的方法 植物遗传转化技术可分为两大类：一类是直接基因转移技术，包括基因枪法、原生质体法、脂质体法、花粉管通道法、电激转化法、PEG介导转化方法等，其中基因枪转化法是代表。另一类是生物介导的转化方法，主要有农杆菌介导和病毒介导两种转化方法，其中农杆菌介导的转化方法操作简便、成本低、转化率高，广泛应用于双子叶植物的遗传转化。二.农杆菌介导的基因转化方法 （一）农杆菌的Ti质粒与T-DNA 的整合机制几乎所有双子叶植物都容易受到土壤农杆菌感染，而产生根瘤。它是一种革兰氏阴性土壤杆菌
Nature：哈佛大学董民团队利用昆虫细胞全基因组 CRISPR 筛选，揭示杀虫毒素受体
细菌蛋白毒素是很多致病菌的主要武器，例如白喉毒素，炭疽毒素，肉毒杆菌毒素等等。近年来，全基因组 CRISPR/Cas9 筛选技术在哺乳动物细胞上得到广泛应用，成为研究这些针对人和动物的毒素和病原菌的主要实验方法。昆虫是地球上种类最繁多的动物，在整个生态链上起到至关重要的作用。在自然界中，存在许多专门靶向昆虫的细菌蛋白毒素， 有些已经被广泛地应用于农业害虫防治 。 现有的 CRISPR-Cas9 筛选技术依赖针对哺乳动物细胞的慢病毒转染系统，不适用在昆虫细胞上，大大限制了人们对针对昆虫的蛋白
pFastBacHTB昆虫胞内质粒
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