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- 上海
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- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
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-20
- 保质期：
2年
- 英文名：
pGAPZA
- 库存：
100
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格：
干粉/液体
基本信息
名称：pGAPZA毕赤酵母质粒
别称: pGAPZA
质粒属性
质粒简介
甘油醛-3-磷酸脱氢酶（GAPDH）的酶在许多生物细胞中包括毕赤酵母，稳定高水平表达。最近，GAPDH蛋白编码基因启动子（GAP）被深入研究，并在毕赤酵母中能够高水表达重组蛋白，这取决于使用的碳源（Waterham等人，，1997）。GAP启动子（PGAP）的重组蛋白表达水平略高于AOX1启动子。
pGAPZ A，B，和C载体（2.9 KB）和pGAPZα，B，和C（3.1 KB）载体使用GAP启动子在毕赤酵母中稳定表达重组蛋白。重组蛋白表达为为带有C-末端myc抗原表位和C端His标签的融合蛋白。此外，pGAPZα表达的融合蛋白在N-端带有酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）的α-因子分泌信号肽。这两个系列的载体都提供三个不同读码框的载体，以方便克隆的带有C-端标签和/或N-末端分泌信号肽的载体中。这些载体是基于显性选择标记，Zeocin（博莱霉素）的筛选标记可以同时使用于毕赤酵母和大肠杆菌。
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported 2884 bp ds-DNA circular SYN 10-SEP-2016
DEFINITION synthetic circular DNA
ACCESSION .
VERSION .
KEYWORDS Untitled 8
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 2884)
AUTHORS .
TITLE Direct Submission
JOURNAL Exported Saturday, September 10, 2016 from SnapGene Viewer 3.1.4
http://www.miaolingbio.com
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..2884
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
promoter 7..483
/note="GAP promoter"
/note="promoter for Pichia pastoris
glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase"
CDS 564..593
/codon_start=1
/product="Myc (human c-Myc oncogene) epitope tag"
/note="Myc"
/translation="EQKLISEEDL"
CDS 609..626
/codon_start=1
/product="6xHis affinity tag"
/note="6xHis"
/translation="HHHHHH"
terminator 705..951
/gene="Pichia pastoris AOX1"
/note="AOX1 terminator"
/note="transcription terminator for AOX1"
promoter 966..1377
/gene="S. cerevisiae TEF1"
/note="TEF1 promoter"
/note="promoter for EF-1-alpha"
promoter 1384..1431
/note="EM7 promoter"
/note="synthetic bacterial promoter "
CDS 1450..1824
/codon_start=1
/gene="Sh ble from Streptoalloteichus hindustanus"
/product="antibiotic-binding protein"
/note="BleoR"
/note="confers resistance to bleomycin, phleomycin, and
Zeocin(TM)"
/translation="MAKLTSAVPVLTARDVAGAVEFWTDRLGFSRDFVEDDFAGVVRDD
VTLFISAVQDQVVPDNTLAWVWVRGLDELYAEWSEVVSTNFRDASGPAMTEIGEQPWGR
EFALRDPAGNCVHFVAEEQD"
terminator 1890..2137
/gene="S. cerevisiae CYC1"
/note="CYC1 terminator"
/note="transcription terminator for CYC1"
rep_origin complement(2212..2800)
/direction=LEFT
/note="ori"
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
ORIGIN
1 agatcttttt tgtagaaatg tcttggtgtc ctcgtccaat caggtagcca tctctgaaat
61 atctggctcc gttgcaactc cgaacgacct gctggcaacg taaaattctc cggggtaaaa
121 cttaaatgtg gagtaatgga accagaaacg tctcttccct tctctctcct tccaccgccc
181 gttaccgtcc ctaggaaatt ttactctgct ggagagcttc ttctacggcc cccttgcagc
241 aatgctcttc ccagcattac gttgcgggta aaacggaggt cgtgtacccg acctagcagc
301 ccagggatgg aaaagtcccg gccgtcgctg gcaataatag cgggcggacg catgtcatga
361 gattattgga aaccaccaga atcgaatata aaaggcgaac acctttccca attttggttt
421 ctcctgaccc aaagacttta aatttaattt atttgtccct atttcaatca attgaacaac
481 tatttcgaaa cgaggaattc acgtggccca gccggccgtc tcggatcggt acctcgagcc
541 gcggcggccg ccagcttggg cccgaacaaa aactcatctc agaagaggat ctgaatagcg
601 ccgtcgacca tcatcatcat catcattgag ttttagcctt agacatgact gttcctcagt
661 tcaagttggg cacttacgag aagaccggtc ttgctagatt ctaatcaaga ggatgtcaga
721 atgccatttg cctgagagat gcaggcttca tttttgatac ttttttattt gtaacctata
781 tagtatagga ttttttttgt cattttgttt cttctcgtac gagcttgctc ctgatcagcc
841 tatctcgcag ctgatgaata tcttgtggta ggggtttggg aaaatcattc gagtttgatg
901 tttttcttgg tatttcccac tcctcttcag agtacagaag attaagtgag accttcgttt
961 gtgcggatcc cccacacacc atagcttcaa aatgtttcta ctcctttttt actcttccag
1021 attttctcgg actccgcgca tcgccgtacc acttcaaaac acccaagcac agcatactaa
1081 attttccctc tttcttcctc tagggtgtcg ttaattaccc gtactaaagg tttggaaaag
1141 aaaaaagaga ccgcctcgtt tctttttctt cgtcgaaaaa ggcaataaaa atttttatca
1201 cgtttctttt tcttgaaatt ttttttttta gtttttttct ctttcagtga cctccattga
1261 tatttaagtt aataaacggt cttcaatttc tcaagtttca gtttcatttt tcttgttcta
1321 ttacaacttt ttttacttct tgttcattag aaagaaagca tagcaatcta atctaagggc
1381 ggtgttgaca attaatcatc ggcatagtat atcggcatag tataatacga caaggtgagg
1441 aactaaacca tggccaagtt gaccagtgcc gttccggtgc tcaccgcgcg cgacgtcgcc
1501 ggagcggtcg agttctggac cgaccggctc gggttctccc gggacttcgt ggaggacgac
1561 ttcgccggtg tggtccggga cgacgtgacc ctgttcatca gcgcggtcca ggaccaggtg
1621 gtgccggaca acaccctggc ctgggtgtgg gtgcgcggcc tggacgagct gtacgccgag
1681 tggtcggagg tcgtgtccac gaacttccgg gacgcctccg ggccggccat gaccgagatc
1741 ggcgagcagc cgtgggggcg ggagttcgcc ctgcgcgacc cggccggcaa ctgcgtgcac
1801 ttcgtggccg aggagcagga ctgacacgtc cgacggcggc ccacgggtcc caggcctcgg
1861 agatccgtcc cccttttcct ttgtcgatat catgtaatta gttatgtcac gcttacattc
1921 acgccctccc cccacatccg ctctaaccga aaaggaagga gttagacaac ctgaagtcta
1981 ggtccctatt tattttttta tagttatgtt agtattaaga acgttattta tatttcaaat
2041 ttttcttttt tttctgtaca gacgcgtgta cgcatgtaac attatactga aaaccttgct
2101 tgagaaggtt ttgggacgct cgaaggcttt aatttgcaag ctggagacca acatgtgagc
2161 aaaaggccag caaaaggcca ggaaccgtaa aaaggccgcg ttgctggcgt ttttccatag
2221 gctccgcccc cctgacgagc atcacaaaaa tcgacgctca agtcagaggt ggcgaaaccc
2281 gacaggacta taaagatacc aggcgtttcc ccctggaagc tccctcgtgc gctctcctgt
2341 tccgaccctg ccgcttaccg gatacctgtc cgcctttctc ccttcgggaa gcgtggcgct
2401 ttctcaatgc tcacgctgta ggtatctcag ttcggtgtag gtcgttcgct ccaagctggg
2461 ctgtgtgcac gaaccccccg ttcagcccga ccgctgcgcc ttatccggta actatcgtct
2521 tgagtccaac ccggtaagac acgacttatc gccactggca gcagccactg gtaacaggat
2581 tagcagagcg aggtatgtag gcggtgctac agagttcttg aagtggtggc ctaactacgg
2641 ctacactaga aggacagtat ttggtatctg cgctctgctg aagccagtta ccttcggaaa
2701 aagagttggt agctcttgat ccggcaaaca aaccaccgct ggtagcggtg gtttttttgt
2761 ttgcaagcag cagattacgc gcagaaaaaa aggatctcaa gaagatcctt tgatcttttc
2821 tacggggtct gacgctcagt ggaacgaaaa ctcacgttaa gggattttgg tcatgcatga
2881 gatc
//
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
名称：pGAPZA毕赤酵母质粒
别称: pGAPZA
| 启动子: | GAP |
|---|---|
| 复制子: | pUC |
| 终止子: | AOX1 TT |
| 质粒分类: | 酵母系列，毕赤酵母表达载体 |
| 质粒大小: | 2884bp |
| 质粒标签: | C-Myc, C-His |
| 原核抗性: | Zeo |
| 筛选标记: | Zeo |
| 克隆菌株: | DH5a |
| 培养条件: | 37度 |
| 表达宿主: | 酵母细胞 |
| 培养条件: | 28℃，YPD |
| 诱导方式: | 无须诱导，瞬时表达 |
| 5'测序引物: | pGAP-F:GTCCCTATTTCAATCAATTGAA |
| 3'测序引物: | AOX3:GGCAAATGGCATTCTGACAT |
质粒属性
| 载体宿主： | 酵母菌 |
|---|---|
| 载体用途： | 蛋白表达 |
| 基因种属： | 空载体 |
| 基因类型： | ORF |
| 原核抗性： | Zeo |
| 筛选标记： | Zeo |
| 荧光蛋白： |
甘油醛-3-磷酸脱氢酶（GAPDH）的酶在许多生物细胞中包括毕赤酵母，稳定高水平表达。最近，GAPDH蛋白编码基因启动子（GAP）被深入研究，并在毕赤酵母中能够高水表达重组蛋白，这取决于使用的碳源（Waterham等人，，1997）。GAP启动子（PGAP）的重组蛋白表达水平略高于AOX1启动子。
pGAPZ A，B，和C载体（2.9 KB）和pGAPZα，B，和C（3.1 KB）载体使用GAP启动子在毕赤酵母中稳定表达重组蛋白。重组蛋白表达为为带有C-末端myc抗原表位和C端His标签的融合蛋白。此外，pGAPZα表达的融合蛋白在N-端带有酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）的α-因子分泌信号肽。这两个系列的载体都提供三个不同读码框的载体，以方便克隆的带有C-端标签和/或N-末端分泌信号肽的载体中。这些载体是基于显性选择标记，Zeocin（博莱霉素）的筛选标记可以同时使用于毕赤酵母和大肠杆菌。
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported 2884 bp ds-DNA circular SYN 10-SEP-2016
DEFINITION synthetic circular DNA
ACCESSION .
VERSION .
KEYWORDS Untitled 8
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 2884)
AUTHORS .
TITLE Direct Submission
JOURNAL Exported Saturday, September 10, 2016 from SnapGene Viewer 3.1.4
http://www.miaolingbio.com
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..2884
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
promoter 7..483
/note="GAP promoter"
/note="promoter for Pichia pastoris
glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase"
CDS 564..593
/codon_start=1
/product="Myc (human c-Myc oncogene) epitope tag"
/note="Myc"
/translation="EQKLISEEDL"
CDS 609..626
/codon_start=1
/product="6xHis affinity tag"
/note="6xHis"
/translation="HHHHHH"
terminator 705..951
/gene="Pichia pastoris AOX1"
/note="AOX1 terminator"
/note="transcription terminator for AOX1"
promoter 966..1377
/gene="S. cerevisiae TEF1"
/note="TEF1 promoter"
/note="promoter for EF-1-alpha"
promoter 1384..1431
/note="EM7 promoter"
/note="synthetic bacterial promoter "
CDS 1450..1824
/codon_start=1
/gene="Sh ble from Streptoalloteichus hindustanus"
/product="antibiotic-binding protein"
/note="BleoR"
/note="confers resistance to bleomycin, phleomycin, and
Zeocin(TM)"
/translation="MAKLTSAVPVLTARDVAGAVEFWTDRLGFSRDFVEDDFAGVVRDD
VTLFISAVQDQVVPDNTLAWVWVRGLDELYAEWSEVVSTNFRDASGPAMTEIGEQPWGR
EFALRDPAGNCVHFVAEEQD"
terminator 1890..2137
/gene="S. cerevisiae CYC1"
/note="CYC1 terminator"
/note="transcription terminator for CYC1"
rep_origin complement(2212..2800)
/direction=LEFT
/note="ori"
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
ORIGIN
1 agatcttttt tgtagaaatg tcttggtgtc ctcgtccaat caggtagcca tctctgaaat
61 atctggctcc gttgcaactc cgaacgacct gctggcaacg taaaattctc cggggtaaaa
121 cttaaatgtg gagtaatgga accagaaacg tctcttccct tctctctcct tccaccgccc
181 gttaccgtcc ctaggaaatt ttactctgct ggagagcttc ttctacggcc cccttgcagc
241 aatgctcttc ccagcattac gttgcgggta aaacggaggt cgtgtacccg acctagcagc
301 ccagggatgg aaaagtcccg gccgtcgctg gcaataatag cgggcggacg catgtcatga
361 gattattgga aaccaccaga atcgaatata aaaggcgaac acctttccca attttggttt
421 ctcctgaccc aaagacttta aatttaattt atttgtccct atttcaatca attgaacaac
481 tatttcgaaa cgaggaattc acgtggccca gccggccgtc tcggatcggt acctcgagcc
541 gcggcggccg ccagcttggg cccgaacaaa aactcatctc agaagaggat ctgaatagcg
601 ccgtcgacca tcatcatcat catcattgag ttttagcctt agacatgact gttcctcagt
661 tcaagttggg cacttacgag aagaccggtc ttgctagatt ctaatcaaga ggatgtcaga
721 atgccatttg cctgagagat gcaggcttca tttttgatac ttttttattt gtaacctata
781 tagtatagga ttttttttgt cattttgttt cttctcgtac gagcttgctc ctgatcagcc
841 tatctcgcag ctgatgaata tcttgtggta ggggtttggg aaaatcattc gagtttgatg
901 tttttcttgg tatttcccac tcctcttcag agtacagaag attaagtgag accttcgttt
961 gtgcggatcc cccacacacc atagcttcaa aatgtttcta ctcctttttt actcttccag
1021 attttctcgg actccgcgca tcgccgtacc acttcaaaac acccaagcac agcatactaa
1081 attttccctc tttcttcctc tagggtgtcg ttaattaccc gtactaaagg tttggaaaag
1141 aaaaaagaga ccgcctcgtt tctttttctt cgtcgaaaaa ggcaataaaa atttttatca
1201 cgtttctttt tcttgaaatt ttttttttta gtttttttct ctttcagtga cctccattga
1261 tatttaagtt aataaacggt cttcaatttc tcaagtttca gtttcatttt tcttgttcta
1321 ttacaacttt ttttacttct tgttcattag aaagaaagca tagcaatcta atctaagggc
1381 ggtgttgaca attaatcatc ggcatagtat atcggcatag tataatacga caaggtgagg
1441 aactaaacca tggccaagtt gaccagtgcc gttccggtgc tcaccgcgcg cgacgtcgcc
1501 ggagcggtcg agttctggac cgaccggctc gggttctccc gggacttcgt ggaggacgac
1561 ttcgccggtg tggtccggga cgacgtgacc ctgttcatca gcgcggtcca ggaccaggtg
1621 gtgccggaca acaccctggc ctgggtgtgg gtgcgcggcc tggacgagct gtacgccgag
1681 tggtcggagg tcgtgtccac gaacttccgg gacgcctccg ggccggccat gaccgagatc
1741 ggcgagcagc cgtgggggcg ggagttcgcc ctgcgcgacc cggccggcaa ctgcgtgcac
1801 ttcgtggccg aggagcagga ctgacacgtc cgacggcggc ccacgggtcc caggcctcgg
1861 agatccgtcc cccttttcct ttgtcgatat catgtaatta gttatgtcac gcttacattc
1921 acgccctccc cccacatccg ctctaaccga aaaggaagga gttagacaac ctgaagtcta
1981 ggtccctatt tattttttta tagttatgtt agtattaaga acgttattta tatttcaaat
2041 ttttcttttt tttctgtaca gacgcgtgta cgcatgtaac attatactga aaaccttgct
2101 tgagaaggtt ttgggacgct cgaaggcttt aatttgcaag ctggagacca acatgtgagc
2161 aaaaggccag caaaaggcca ggaaccgtaa aaaggccgcg ttgctggcgt ttttccatag
2221 gctccgcccc cctgacgagc atcacaaaaa tcgacgctca agtcagaggt ggcgaaaccc
2281 gacaggacta taaagatacc aggcgtttcc ccctggaagc tccctcgtgc gctctcctgt
2341 tccgaccctg ccgcttaccg gatacctgtc cgcctttctc ccttcgggaa gcgtggcgct
2401 ttctcaatgc tcacgctgta ggtatctcag ttcggtgtag gtcgttcgct ccaagctggg
2461 ctgtgtgcac gaaccccccg ttcagcccga ccgctgcgcc ttatccggta actatcgtct
2521 tgagtccaac ccggtaagac acgacttatc gccactggca gcagccactg gtaacaggat
2581 tagcagagcg aggtatgtag gcggtgctac agagttcttg aagtggtggc ctaactacgg
2641 ctacactaga aggacagtat ttggtatctg cgctctgctg aagccagtta ccttcggaaa
2701 aagagttggt agctcttgat ccggcaaaca aaccaccgct ggtagcggtg gtttttttgt
2761 ttgcaagcag cagattacgc gcagaaaaaa aggatctcaa gaagatcctt tgatcttttc
2821 tacggggtct gacgctcagt ggaacgaaaa ctcacgttaa gggattttgg tcatgcatga
2881 gatc
//
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
| P0263/pVSV-G逆毒包装质粒 |
| P0400/pUMVC逆转录包装质粒 |
| P1692/pCEP4-tat逆转录包装质粒 |
| P1676/pLVML-3×FLAG-MCS-IRES-Puro慢病毒表达质粒 |
| P2951/pLVML-3×HA-MCS-IRES-Puro慢病毒表达质粒 |
| P2952/pLVML-Myc-MCS-IRES-Puro慢病毒表达质粒 |
| P0247/pLVX-Puro慢病毒表达质粒 |
| P0249/pLVX-IRES-Puro慢病毒表达质粒 |
| P0250/pLVX-IRES-ZsGreen1慢病毒表达质粒 |
| P0363/pLVX-IRES-Neo慢病毒表达质粒 |
| P0424/pLVX-IRES-mCherry慢病毒表达质粒 |
| P0729/pLVX-IRES-tdTomato慢病毒表达质粒 |
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文献和实验相关实验
的酿酒酵母的分泌信号—α交配因子(α-factor)引导序列已经成功地引导了几种外源蛋白的分泌。分泌表达载体主要有：pPIC9，pPIC9K，pHIL-S1，pPICZα A，pYAM75P等。胞内表达载体主要有：pHIL-D2，pA0815，pPIC3K，pPICZ，pHWO10，pGAPZ， pGAPZa(Invitrogen)，pPIC3.5K等。工程菌株Y11430，MG1003，GS115 (AOX1)，KM71，SMD1168。毕赤酵母宿主菌常用的有GS115和KM71两种，都具有
和加工后能够由胞内转移至胞外，将成熟的蛋白质分泌到细胞外。 pGAP系列表达载体 美国 Invitrogen公司的产品 pGAeZ和 pGAPza，是一种无需甲醇诱导而能表达外源蛋 白的毕赤酵母载体。pGAP系列是典型的组成型酵母表达载体，为穿梭型表达载体，能在大肠杆菌和酵母中进行遗传复制。是以毕赤酵母中磷酸甘油酸脱氢酶(GAP)基因启动子作为外源基因启动子，该启动子是组成型表达的，所以不存在诱导的问题，在以葡萄糖为碳源的培养基上就可以表达。通过利用美洲小长尾猴重组a-1,3半乳糖转移
的时间里，他们用一个4L的发酵罐连续完成了几个周期的生产。在这种发酵方式中，大部分碳源由山梨醇提供，减少了总的甲醇消耗，因而效率大大提高。 最近，一种无需甲醇诱导而能组成性表达外源蛋白的毕赤酵母载体pCAPZ和pGAPZa已经构建成功，组成性表达的蛋白量与该蛋白对酵母菌的毒性有关。研究发现它们常能生产比诱导型载体pPICZ和pPICZa更高的外源蛋白。这些载体均利用了编码甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)基因的启动子。Doring等分别用pGAPZB和pPICZB来生产兔肾肽转运
pGAPZA毕赤酵母质粒
￥100 - 1000
