- ￥100 - 1000
- Xybio
- 上海
- P0192
- 2025年07月13日
9 年钻石会员
企业认证
相关产品推荐更多 >
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20
- 保质期：
2年
- 英文名：
NM_010049.3;AA607882;AI662710;AW5550
- 库存：
100
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格：
干粉/液体
基本信息
名称：pSV2-DHFR哺乳质粒
别称: NM_010049.3;AA607882;AI662710;AW5550
质粒属性
质粒简介
pSV2-DHFR载体含有的是小鼠的DHFR基因，同时该载体是哺乳动物细胞和大肠杆菌穿梭质粒，在DHFR细胞系中，可以通过甲氨蝶呤对转染的细胞进行筛选。
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported 4976 bp ds-DNA circular SYN 27-DEC-2018
DEFINITION synthetic circular DNA
KEYWORDS pSV2-DHFR
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 4976)
AUTHORS Triple Threat
TITLE Direct Submission
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..4976
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
promoter 10..339
/note="SV40 promoter"
/note="SV40 enhancer and early promoter"
rep_origin 190..325
/note="SV40 ori"
/note="SV40 origin of replication"
CDS 438..1001
/codon_start=1
/gene="Mus musculus Dhfr"
/product="mouse dihydrofolate reductase"
/note="DHFR"
/translation="MVRPLNCIVAVSQNMGIGKNGDLPWPPLRNEFKYFQRMTTTSSVE
GKQNLVIMGRKTWFSIPEKNRPLKDRINIVLSRELKEPPRGAHFLAKSLDDALRLIEQP
ELASKVDMVWIVGGSSVYQEAMNQPGHLRLFVTRIMQEFESDTFFPEIDLGKYKLLPEY
PGVLSEVQEEKGIKYKFEVYEKKD"
intron 1158..1223
/note="small t intron"
/note="simian virus 40 (SV40) small t antigen intron"
CDS 1353..1373
/codon_start=1
/product="nuclear localization signal of SV40 large T
antigen"
/note="SV40 NLS"
/translation="PKKKRKV"
polyA_signal 1798..1932
/note="SV40 poly(A) signal"
/note="SV40 polyadenylation signal"
promoter 2785..2889
/gene="bla"
/note="AmpR promoter"
CDS 2890..3750
/codon_start=1
/gene="bla"
/product="beta-lactamase"
/note="AmpR"
/note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and
related antibiotics"
/translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRVDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW
EPELNEAIPNDERDTTMPAAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
LIKHW"
rep_origin 3921..4509
/direction=RIGHT
/note="ori"
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
misc_feature 4695..4835
/note="bom"
/note="basis of mobility region from pBR322"
ORIGIN
1 ctgtggaatg tgtgtcagtt agggtgtgga aagtccccag gctccccagc aggcagaagt
61 atgcaaagca tgcatctcaa ttagtcagca accaggtgtg gaaagtcccc aggctcccca
121 gcaggcagaa gtatgcaaag catgcatctc aattagtcag caaccatagt cccgccccta
181 actccgccca tcccgcccct aactccgccc agttccgccc attctccgcc ccatggctga
241 ctaatttttt ttatttatgc agaggccgag gccgcctcgg cctctgagct attccagaag
301 tagtgaggag gcttttttgg aggcctaggc ttttgcaaaa agcttggggg gggggacagc
361 tcagggctgc gatttcgcgc caaacttgac ggcaatccta gcgtgaaggc tggtaggatt
421 ttatccccgc tgccatcatg gttcgaccat tgaactgcat cgtcgccgtg tcccaaaata
481 tggggattgg caagaacgga gacctaccct ggcctccgct caggaacgag ttcaagtact
541 tccaaagaat gaccacaacc tcttcagtgg aaggtaaaca gaatctggtg attatgggta
601 ggaaaacctg gttctccatt cctgagaaga atcgaccttt aaaggacaga attaatatag
661 ttctcagtag agaactcaaa gaaccaccac gaggagctca ttttcttgcc aaaagtttgg
721 atgatgcctt aagacttatt gaacaaccgg aattggcaag taaagtagac atggtttgga
781 tagtcggagg cagttctgtt taccaggaag ccatgaatca accaggccac ctcagactct
841 ttgtgacaag gatcatgcag gaatttgaaa gtgacacgtt tttcccagaa attgatttgg
901 ggaaatataa acttctccca gaatacccag gcgtcctctc tgaggtccag gaggaaaaag
961 gcatcaagta taagtttgaa gtctacgaga agaaagacta acaggaagat gctttcaagt
1021 tctctgctcc cctcctaaag ctatgcattt ttataagacc atgggacttt tgctggcttt
1081 agatctttgt gaaggaacct tacttctgtg gtgtgacata attggacaaa ctacctacag
1141 agatttaaag ctctaaggta aatataaaat ttttaagtgt ataatgtgtt aaactactga
1201 ttctaattgt ttgtgtattt tagattccaa cctatggaac tgatgaatgg gagcagtggt
1261 ggaatgcctt taatgaggaa aacctgtttt gctcagaaga aatgccatct agtgatgatg
1321 aggctactgc tgactctcaa cattctactc ctccaaaaaa gaagagaaag gtagaagacc
1381 ccaaggactt tccttcagaa ttgctaagtt ttttgagtca tgctgtgttt agtaatagaa
1441 ctcttgcttg ctttgctatt tacaccacaa aggaaaaagc tgcactgcta tacaagaaaa
1501 ttatggaaaa atattctgta acctttataa gtaggcataa cagttataat cataacatac
1561 tgttttttct tactccacac aggcatagag tgtctgctat taataactat gctcaaaaat
1621 tgtgtacctt tagcttttta atttgtaaag gggttaataa ggaatatttg atgtatagtg
1681 ccttgactag agatcataat cagccatacc acatttgtag aggttttact tgctttaaaa
1741 aacctcccac acctccccct gaacctgaaa cataaaatga atgcaattgt tgttgttaac
1801 ttgtttattg cagcttataa tggttacaaa taaagcaata gcatcacaaa tttcacaaat
1861 aaagcatttt tttcactgca ttctagttgt ggtttgtcca aactcatcaa tgtatcttat
1921 catgtctgga tccccaggaa gctcctctgt gtcctcataa accctaacct cctctacttg
1981 agaggacatt ccaatcatag gctgcccatc caccctctgt gtcctcctgt taattaggtc
2041 acttaacaaa aaggaaattg ggtaggggtt tttcacagac cgctttctaa gggtaatttt
2101 aaaatatctg ggaagtccct tccactgctg tgttccagaa gtgttggtaa acagcccaca
2161 aatgtcaaca gcagaaacat acaagctgtc agctttgcac aagggcccaa caccctgctc
2221 atcaagaagc actgtggttg ctgtgttagt aatgtgcaaa acaggaggca cattttcccc
2281 acctgtgtag gttccaaaat atctagtgtt ttcattttta cttggatcag gaacccagca
2341 ctccactgga taagcattat ccttatccaa aacagccttg tggtcagtgt tcatctgctg
2401 actgtcaact gtagcatttt ttggggttac agtttgagca ggatatttgg tcctgtagtt
2461 tgctaacaca ccctgcagct ccaaaggttc cccaccaaca gcaaaaaaat gaaaatttga
2521 cccttgaatg ggttttccag caccattttc atgagttttt tgtgtccctg aatgcaagtt
2581 taacatagca gttaccccaa taacctcagt tttaacagta acagcttccc acatcaaaat
2641 atttccacag gttaagtcct catttaaatt aggcaaagga attcttgaag acgaaagggc
2701 ctcgtgatac gcctattttt ataggttaat gtcatgataa taatggtttc ttagacgtca
2761 ggtggcactt ttcggggaaa tgtgcgcgga acccctattt gtttattttt ctaaatacat
2821 tcaaatatgt atccgctcat gagacaataa ccctgataaa tgcttcaata atattgaaaa
2881 aggaagagta tgagtattca acatttccgt gtcgccctta ttcccttttt tgcggcattt
2941 tgccttcctg tttttgctca cccagaaacg ctggtgaaag taaaagatgc tgaagatcag
3001 ttgggtgcac gagtgggtta catcgaactg gatctcaaca gcggtaagat ccttgagagt
3061 tttcgccccg aagaacgttt tccaatgatg agcactttta aagttctgct atgtggcgcg
3121 gtattatccc gtgttgacgc cgggcaagag caactcggtc gccgcataca ctattctcag
3181 aatgacttgg ttgagtactc accagtcaca gaaaagcatc ttacggatgg catgacagta
3241 agagaattat gcagtgctgc cataaccatg agtgataaca ctgcggccaa cttacttctg
3301 acaacgatcg gaggaccgaa ggagctaacc gcttttttgc acaacatggg ggatcatgta
3361 actcgccttg atcgttggga accggagctg aatgaagcca taccaaacga cgagcgtgac
3421 accacgatgc ctgcagcaat ggcaacaacg ttgcgcaaac tattaactgg cgaactactt
3481 actctagctt cccggcaaca attaatagac tggatggagg cggataaagt tgcaggacca
3541 cttctgcgct cggcccttcc ggctggctgg tttattgctg ataaatctgg agccggtgag
3601 cgtgggtctc gcggtatcat tgcagcactg gggccagatg gtaagccctc ccgtatcgta
3661 gttatctaca cgacggggag tcaggcaact atggatgaac gaaatagaca gatcgctgag
3721 ataggtgcct cactgattaa gcattggtaa ctgtcagacc aagtttactc atatatactt
3781 tagattgatt taaaacttca tttttaattt aaaaggatct aggtgaagat cctttttgat
3841 aatctcatga ccaaaatccc ttaacgtgag ttttcgttcc actgagcgtc agaccccgta
3901 gaaaagatca aaggatcttc ttgagatcct ttttttctgc gcgtaatctg ctgcttgcaa
3961 acaaaaaaac caccgctacc agcggtggtt tgtttgccgg atcaagagct accaactctt
4021 tttccgaagg taactggctt cagcagagcg cagataccaa atactgtcct tctagtgtag
4081 ccgtagttag gccaccactt caagaactct gtagcaccgc ctacatacct cgctctgcta
4141 atcctgttac cagtggctgc tgccagtggc gataagtcgt gtcttaccgg gttggactca
4201 agacgatagt taccggataa ggcgcagcgg tcgggctgaa cggggggttc gtgcacacag
4261 cccagcttgg agcgaacgac ctacaccgaa ctgagatacc tacagcgtga gctatgagaa
4321 agcgccacgc ttcccgaagg gagaaaggcg gacaggtatc cggtaagcgg cagggtcgga
4381 acaggagagc gcacgaggga gcttccaggg ggaaacgcct ggtatcttta tagtcctgtc
4441 gggtttcgcc acctctgact tgagcgtcga tttttgtgat gctcgtcagg ggggcggagc
4501 ctatggaaaa acgccagcaa cgcggccttt ttacggttcc tggccttttg ctggcctttt
4561 gctcacatgt tctttcctgc gttatcccct gattctgtgg ataaccgtat taccgccttt
4621 gagtgagctg ataccgctcg ccgcagccga acgaccgagc gcagcgagtc agtgagcgag
4681 gaagcggaag agcgcctgat gcggtatttt ctccttacgc atctgtgcgg tatttcacac
4741 cgcatatggt gcactctcag tacaatctgc tctgatgccg catagttaag ccagtataca
4801 ctccgctatc gctacgtgac tgggtcatgg ctgcgccccg acacccgcca acacccgctg
4861 acgcgccctg acgggcttgt ctgctcccgg catccgctta cagacaagct gtgaccgtct
4921 ccgggagctg catgtgtcag aggttttcac cgtcatcacc gaaacgcgcg aggcag
//
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
名称：pSV2-DHFR哺乳质粒
别称: NM_010049.3;AA607882;AI662710;AW5550
| 启动子: | SV40 |
|---|---|
| 复制子: | pMB1 |
| 终止子: | SV40 poly(A) signal |
| 质粒分类: | 哺乳细胞载体;蛋白过表达质粒 |
| 质粒大小: | 4976bp |
| 原核抗性: | Amp |
| 筛选标记: | MTX |
| 克隆菌株: | DH5a |
| 培养条件: | 37度 |
| 表达宿主: | 哺乳细胞 |
| 培养条件: | 37℃，有氧，LB |
| 5'测序引物: | SV40pro-F: TATTTATGCAGAGGCCGAGG |
| 3'测序引物: | SV40pA-R: GAAATTTGTGATGCTATTGC |
质粒属性
| 载体宿主： | 哺乳细胞 |
|---|---|
| 载体用途： | 蛋白表达 |
| 基因种属： | 小鼠 |
| 基因类型： | ORF |
| 原核抗性： | Amp |
| 真核抗性： | |
| 荧光蛋白： |
质粒简介
pSV2-DHFR载体含有的是小鼠的DHFR基因，同时该载体是哺乳动物细胞和大肠杆菌穿梭质粒，在DHFR细胞系中，可以通过甲氨蝶呤对转染的细胞进行筛选。
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported 4976 bp ds-DNA circular SYN 27-DEC-2018
DEFINITION synthetic circular DNA
KEYWORDS pSV2-DHFR
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 4976)
AUTHORS Triple Threat
TITLE Direct Submission
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..4976
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
promoter 10..339
/note="SV40 promoter"
/note="SV40 enhancer and early promoter"
rep_origin 190..325
/note="SV40 ori"
/note="SV40 origin of replication"
CDS 438..1001
/codon_start=1
/gene="Mus musculus Dhfr"
/product="mouse dihydrofolate reductase"
/note="DHFR"
/translation="MVRPLNCIVAVSQNMGIGKNGDLPWPPLRNEFKYFQRMTTTSSVE
GKQNLVIMGRKTWFSIPEKNRPLKDRINIVLSRELKEPPRGAHFLAKSLDDALRLIEQP
ELASKVDMVWIVGGSSVYQEAMNQPGHLRLFVTRIMQEFESDTFFPEIDLGKYKLLPEY
PGVLSEVQEEKGIKYKFEVYEKKD"
intron 1158..1223
/note="small t intron"
/note="simian virus 40 (SV40) small t antigen intron"
CDS 1353..1373
/codon_start=1
/product="nuclear localization signal of SV40 large T
antigen"
/note="SV40 NLS"
/translation="PKKKRKV"
polyA_signal 1798..1932
/note="SV40 poly(A) signal"
/note="SV40 polyadenylation signal"
promoter 2785..2889
/gene="bla"
/note="AmpR promoter"
CDS 2890..3750
/codon_start=1
/gene="bla"
/product="beta-lactamase"
/note="AmpR"
/note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and
related antibiotics"
/translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRVDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW
EPELNEAIPNDERDTTMPAAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
LIKHW"
rep_origin 3921..4509
/direction=RIGHT
/note="ori"
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
misc_feature 4695..4835
/note="bom"
/note="basis of mobility region from pBR322"
ORIGIN
1 ctgtggaatg tgtgtcagtt agggtgtgga aagtccccag gctccccagc aggcagaagt
61 atgcaaagca tgcatctcaa ttagtcagca accaggtgtg gaaagtcccc aggctcccca
121 gcaggcagaa gtatgcaaag catgcatctc aattagtcag caaccatagt cccgccccta
181 actccgccca tcccgcccct aactccgccc agttccgccc attctccgcc ccatggctga
241 ctaatttttt ttatttatgc agaggccgag gccgcctcgg cctctgagct attccagaag
301 tagtgaggag gcttttttgg aggcctaggc ttttgcaaaa agcttggggg gggggacagc
361 tcagggctgc gatttcgcgc caaacttgac ggcaatccta gcgtgaaggc tggtaggatt
421 ttatccccgc tgccatcatg gttcgaccat tgaactgcat cgtcgccgtg tcccaaaata
481 tggggattgg caagaacgga gacctaccct ggcctccgct caggaacgag ttcaagtact
541 tccaaagaat gaccacaacc tcttcagtgg aaggtaaaca gaatctggtg attatgggta
601 ggaaaacctg gttctccatt cctgagaaga atcgaccttt aaaggacaga attaatatag
661 ttctcagtag agaactcaaa gaaccaccac gaggagctca ttttcttgcc aaaagtttgg
721 atgatgcctt aagacttatt gaacaaccgg aattggcaag taaagtagac atggtttgga
781 tagtcggagg cagttctgtt taccaggaag ccatgaatca accaggccac ctcagactct
841 ttgtgacaag gatcatgcag gaatttgaaa gtgacacgtt tttcccagaa attgatttgg
901 ggaaatataa acttctccca gaatacccag gcgtcctctc tgaggtccag gaggaaaaag
961 gcatcaagta taagtttgaa gtctacgaga agaaagacta acaggaagat gctttcaagt
1021 tctctgctcc cctcctaaag ctatgcattt ttataagacc atgggacttt tgctggcttt
1081 agatctttgt gaaggaacct tacttctgtg gtgtgacata attggacaaa ctacctacag
1141 agatttaaag ctctaaggta aatataaaat ttttaagtgt ataatgtgtt aaactactga
1201 ttctaattgt ttgtgtattt tagattccaa cctatggaac tgatgaatgg gagcagtggt
1261 ggaatgcctt taatgaggaa aacctgtttt gctcagaaga aatgccatct agtgatgatg
1321 aggctactgc tgactctcaa cattctactc ctccaaaaaa gaagagaaag gtagaagacc
1381 ccaaggactt tccttcagaa ttgctaagtt ttttgagtca tgctgtgttt agtaatagaa
1441 ctcttgcttg ctttgctatt tacaccacaa aggaaaaagc tgcactgcta tacaagaaaa
1501 ttatggaaaa atattctgta acctttataa gtaggcataa cagttataat cataacatac
1561 tgttttttct tactccacac aggcatagag tgtctgctat taataactat gctcaaaaat
1621 tgtgtacctt tagcttttta atttgtaaag gggttaataa ggaatatttg atgtatagtg
1681 ccttgactag agatcataat cagccatacc acatttgtag aggttttact tgctttaaaa
1741 aacctcccac acctccccct gaacctgaaa cataaaatga atgcaattgt tgttgttaac
1801 ttgtttattg cagcttataa tggttacaaa taaagcaata gcatcacaaa tttcacaaat
1861 aaagcatttt tttcactgca ttctagttgt ggtttgtcca aactcatcaa tgtatcttat
1921 catgtctgga tccccaggaa gctcctctgt gtcctcataa accctaacct cctctacttg
1981 agaggacatt ccaatcatag gctgcccatc caccctctgt gtcctcctgt taattaggtc
2041 acttaacaaa aaggaaattg ggtaggggtt tttcacagac cgctttctaa gggtaatttt
2101 aaaatatctg ggaagtccct tccactgctg tgttccagaa gtgttggtaa acagcccaca
2161 aatgtcaaca gcagaaacat acaagctgtc agctttgcac aagggcccaa caccctgctc
2221 atcaagaagc actgtggttg ctgtgttagt aatgtgcaaa acaggaggca cattttcccc
2281 acctgtgtag gttccaaaat atctagtgtt ttcattttta cttggatcag gaacccagca
2341 ctccactgga taagcattat ccttatccaa aacagccttg tggtcagtgt tcatctgctg
2401 actgtcaact gtagcatttt ttggggttac agtttgagca ggatatttgg tcctgtagtt
2461 tgctaacaca ccctgcagct ccaaaggttc cccaccaaca gcaaaaaaat gaaaatttga
2521 cccttgaatg ggttttccag caccattttc atgagttttt tgtgtccctg aatgcaagtt
2581 taacatagca gttaccccaa taacctcagt tttaacagta acagcttccc acatcaaaat
2641 atttccacag gttaagtcct catttaaatt aggcaaagga attcttgaag acgaaagggc
2701 ctcgtgatac gcctattttt ataggttaat gtcatgataa taatggtttc ttagacgtca
2761 ggtggcactt ttcggggaaa tgtgcgcgga acccctattt gtttattttt ctaaatacat
2821 tcaaatatgt atccgctcat gagacaataa ccctgataaa tgcttcaata atattgaaaa
2881 aggaagagta tgagtattca acatttccgt gtcgccctta ttcccttttt tgcggcattt
2941 tgccttcctg tttttgctca cccagaaacg ctggtgaaag taaaagatgc tgaagatcag
3001 ttgggtgcac gagtgggtta catcgaactg gatctcaaca gcggtaagat ccttgagagt
3061 tttcgccccg aagaacgttt tccaatgatg agcactttta aagttctgct atgtggcgcg
3121 gtattatccc gtgttgacgc cgggcaagag caactcggtc gccgcataca ctattctcag
3181 aatgacttgg ttgagtactc accagtcaca gaaaagcatc ttacggatgg catgacagta
3241 agagaattat gcagtgctgc cataaccatg agtgataaca ctgcggccaa cttacttctg
3301 acaacgatcg gaggaccgaa ggagctaacc gcttttttgc acaacatggg ggatcatgta
3361 actcgccttg atcgttggga accggagctg aatgaagcca taccaaacga cgagcgtgac
3421 accacgatgc ctgcagcaat ggcaacaacg ttgcgcaaac tattaactgg cgaactactt
3481 actctagctt cccggcaaca attaatagac tggatggagg cggataaagt tgcaggacca
3541 cttctgcgct cggcccttcc ggctggctgg tttattgctg ataaatctgg agccggtgag
3601 cgtgggtctc gcggtatcat tgcagcactg gggccagatg gtaagccctc ccgtatcgta
3661 gttatctaca cgacggggag tcaggcaact atggatgaac gaaatagaca gatcgctgag
3721 ataggtgcct cactgattaa gcattggtaa ctgtcagacc aagtttactc atatatactt
3781 tagattgatt taaaacttca tttttaattt aaaaggatct aggtgaagat cctttttgat
3841 aatctcatga ccaaaatccc ttaacgtgag ttttcgttcc actgagcgtc agaccccgta
3901 gaaaagatca aaggatcttc ttgagatcct ttttttctgc gcgtaatctg ctgcttgcaa
3961 acaaaaaaac caccgctacc agcggtggtt tgtttgccgg atcaagagct accaactctt
4021 tttccgaagg taactggctt cagcagagcg cagataccaa atactgtcct tctagtgtag
4081 ccgtagttag gccaccactt caagaactct gtagcaccgc ctacatacct cgctctgcta
4141 atcctgttac cagtggctgc tgccagtggc gataagtcgt gtcttaccgg gttggactca
4201 agacgatagt taccggataa ggcgcagcgg tcgggctgaa cggggggttc gtgcacacag
4261 cccagcttgg agcgaacgac ctacaccgaa ctgagatacc tacagcgtga gctatgagaa
4321 agcgccacgc ttcccgaagg gagaaaggcg gacaggtatc cggtaagcgg cagggtcgga
4381 acaggagagc gcacgaggga gcttccaggg ggaaacgcct ggtatcttta tagtcctgtc
4441 gggtttcgcc acctctgact tgagcgtcga tttttgtgat gctcgtcagg ggggcggagc
4501 ctatggaaaa acgccagcaa cgcggccttt ttacggttcc tggccttttg ctggcctttt
4561 gctcacatgt tctttcctgc gttatcccct gattctgtgg ataaccgtat taccgccttt
4621 gagtgagctg ataccgctcg ccgcagccga acgaccgagc gcagcgagtc agtgagcgag
4681 gaagcggaag agcgcctgat gcggtatttt ctccttacgc atctgtgcgg tatttcacac
4741 cgcatatggt gcactctcag tacaatctgc tctgatgccg catagttaag ccagtataca
4801 ctccgctatc gctacgtgac tgggtcatgg ctgcgccccg acacccgcca acacccgctg
4861 acgcgccctg acgggcttgt ctgctcccgg catccgctta cagacaagct gtgaccgtct
4921 ccgggagctg catgtgtcag aggttttcac cgtcatcacc gaaacgcgcg aggcag
//
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
| P1954/pENTR223-OCIAD2人源基因质粒 |
| P1955/pENTR223-MPC1人源基因质粒 |
| P1956/pENTR223-S100A16人源基因质粒 |
| P1957/pENTR223-LOC79015人源基因质粒 |
| P1959/pENTR223-MRPS33人源基因质粒 |
| P1960/pENTR223-GPR65人源基因质粒 |
| P1961/pENTR223-SSR3人源基因质粒 |
| P1962/pENTR223-TMEM87A人源基因质粒 |
| P1963/pENTR223-CSRP3人源基因质粒 |
| P1964/pENTR223-RPS4X人源基因质粒 |
| P1965/pENTR223-DENR人源基因质粒 |
| P1966/pENTR223-C1orf158人源基因质粒 |
风险提示：丁香通仅作为第三方平台，为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全，合理判断，谨慎选购商品，商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品，请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验相关实验
GENETICS：用于检测哺乳动物细胞中 DNA-蛋白质交联质粒修复的简单、快速的定量分析
该方法的目的是提供灵活，快速和定量的技术来检测哺乳动物细胞系中DNA-蛋白质交联（DPC）修复的动力学。该测定不是全局测定异种生物诱导的或自发的染色体DPC去除的去除，而是检查在质粒DNA底物内的一个位点处特异性引入的均匀的，化学定义的损伤的修复。这种方法避免了放射性物质的使用，并且不依赖昂贵的或高度专业化的技术。相反，它依赖于标准的重组DNA程序和广泛可用的实时定量聚合酶链式反应（qPCR）仪器。考虑到所用策略的固有灵活性，可以改变交联蛋白的大小以及化学连接的性质和连接位点的精确 DNA
细胞系等，该细胞有一定自发转化倾向，一般在转染前一天接种细胞，接种密度为2×104 /cm2 ,用含10%胎牛血清的DMEM液，37℃、5%CO2 培养，待细胞占50～70%瓶底面积时，用于转染试验。 (3)DNA-磷酸钙沉淀物的制备 ①将供体细胞DNA和PSV2-neo质粒载体DNA用TE配制成40mg/L的DNA溶液，同时向供体细胞DNA液200μl中加入带基因neo质粒DNA液(20mg/L)220μl和2×HBS 250μl(PSV2-neo为1～2mg/L的使用量)。 ②取500μl上述
【求助】【求助】积分换质粒，急求pIRES2-EGFP，pBudCE4.1
？ lwjssry 应该不会吧，我做酶切鉴定的，应该是对的，但就是死活连不上 kaige88 这样，是否酶切不够好？祝快点连上！呵呵。。。。。 ruthyhx 您好， 我急用这个质粒pbudce4.1，我可以交换其他东西，我有pires2-egfp，pCI-dhfr等。急盼！ 本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴
pSV2-DHFR哺乳质粒
￥100 - 1000
