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- Xybio
- 上海
- P0919
- 2025年07月14日
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![pNL2.1[NlucHygro]哺乳报告质粒](https://img1.dxycdn.com/2021/1019/349/5204115578368430153-14.jpg!wh200)
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20
- 保质期：
2年
- 英文名：
Plasmid#21074;大鼠MAP1LC3b
- 库存：
100
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格：
干粉/液体
名称：ptfLC3哺乳自噬质粒
别称: Plasmid#21074;大鼠MAP1LC3b
| 启动子: | CMV |
|---|---|
| 复制子: | pUC |
| 质粒分类: | 哺乳细胞载体：自噬表达质粒 |
| 原核抗性: | Kan |
| 筛选标记: | G418 |
| 克隆菌株: | DH5a |
| 培养条件: | 37度 |
质粒属性
| 载体宿主： | 哺乳细胞 |
|---|---|
| 载体用途： | 信号报告 |
| 基因种属： | 大鼠 |
| 基因类型： | ORF |
| 原核抗性： | Kan |
| 真核抗性： | Neo/G418 |
| 荧光蛋白： |
质粒简介
ptfLC3质粒由上海烜雅生物科技有限公司提供
质粒图谱
质粒序列：详询
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
| P3442/pENTR223-TAF9人源基因质粒 |
| P3443/pENTR223-PMM1人源基因质粒 |
| P3444/pENTR223-TLE6人源基因质粒 |
| P3445/pENTR223-SNAPC1人源基因质粒 |
| P3446/pENTR223-SPRTN（1-731bp）人源基因质粒 |
| P3447/pENTR223-DUSP7（298-1260bp）人源基因质粒 |
| P3448/pENTR223-MRPL57（2点突变）人源基因质粒 |
| P3449/pENTR223-SHISA5人源基因质粒 |
| P3450/pENTR223-PAGE4人源基因质粒 |
| P3451/pENTR223-EMC4人源基因质粒 |
| P3452/pENTR223-PHF20L1人源基因质粒 |
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文献和实验verarzhch 因实验急用，求一点质粒，检验细胞是否发生自噬。RFP-LC3或myc-LC3。谢谢！本人在上海，可购可换。 bzy0222 我有GFP-LC3。 yzg831 我们实验室也有的 喜龙 bzy0222 wrote: 我有GFP-LC3。 请问您的质粒是购自哪里的，能不能
GENETICS：用于检测哺乳动物细胞中 DNA-蛋白质交联质粒修复的简单、快速的定量分析
该方法的目的是提供灵活，快速和定量的技术来检测哺乳动物细胞系中DNA-蛋白质交联（DPC）修复的动力学。该测定不是全局测定异种生物诱导的或自发的染色体DPC去除的去除，而是检查在质粒DNA底物内的一个位点处特异性引入的均匀的，化学定义的损伤的修复。这种方法避免了放射性物质的使用，并且不依赖昂贵的或高度专业化的技术。相反，它依赖于标准的重组DNA程序和广泛可用的实时定量聚合酶链式反应（qPCR）仪器。考虑到所用策略的固有灵活性，可以改变交联蛋白的大小以及化学连接的性质和连接位点的精确 DNA
重磅综述：年发文量近 10000，自噬领域第 4 版研究指南发布
(autophagy) 是一种细胞内的维稳调控机制，通过自噬过程，部分受损的细胞器和功能失调的蛋白质或其他组分可以在溶酶体中降解，参与细胞内结构和功能大分子的循环重构。 图片来源：本文作者 [2]下面，将为大家简要剖析 2021 版自噬指南涉及的具体内容： 第一，命名规则的重申；为了最大程度地减少研究中关于命名法的混淆，该指南提出以下指导原则：通常情况下，使用 ATG1 表示酵母，ULK1 代表哺乳动物。根据酵母基因组数据库 (Saccharomyces Genome Database) 所采用的命名方法，本指南
