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- 上海
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- 2025年07月13日
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- 详细信息
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- 技术资料
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-20
- 保质期：
2年
- 英文名：
pTRE3G
- 库存：
100
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格：
干粉/液体
基本信息
名称：pTRE3G哺乳调控质粒
别称: pTRE3G
质粒属性
质粒简介
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported 3431 bp ds-DNA circular SYN 05-SEP-2016
DEFINITION synthetic circular DNA
ACCESSION .
VERSION .
KEYWORDS Untitled 5
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 3431)
AUTHORS .
TITLE Direct Submission
JOURNAL Exported Monday, September 5, 2016 from SnapGene Viewer 3.1.4
http://www.miaolingbio.com
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..3431
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
promoter 4..382
/note="TRE3G promoter"
/note="3rd-generation Tet-responsive promoter that can be
activated by binding of Tet-On(R) 3G"
protein_bind 12..30
/gene="tetO"
/bound_moiety="tetracycline repressor TetR"
/note="tet operator"
/note="bacterial operator O2 for the tetR and tetA genes"
protein_bind 48..66
/gene="tetO"
/bound_moiety="tetracycline repressor TetR"
/note="tet operator"
/note="bacterial operator O2 for the tetR and tetA genes"
protein_bind 84..102
/gene="tetO"
/bound_moiety="tetracycline repressor TetR"
/note="tet operator"
/note="bacterial operator O2 for the tetR and tetA genes"
protein_bind 120..138
/gene="tetO"
/bound_moiety="tetracycline repressor TetR"
/note="tet operator"
/note="bacterial operator O2 for the tetR and tetA genes"
protein_bind 156..174
/gene="tetO"
/bound_moiety="tetracycline repressor TetR"
/note="tet operator"
/note="bacterial operator O2 for the tetR and tetA genes"
protein_bind 192..210
/gene="tetO"
/bound_moiety="tetracycline repressor TetR"
/note="tet operator"
/note="bacterial operator O2 for the tetR and tetA genes"
protein_bind 228..246
/gene="tetO"
/bound_moiety="tetracycline repressor TetR"
/note="tet operator"
/note="bacterial operator O2 for the tetR and tetA genes"
intron 583..648
/note="small t intron"
/note="simian virus 40 (SV40) small t antigen intron"
CDS 778..798
/codon_start=1
/product="nuclear localization signal of SV40 large T
antigen"
/note="SV40 NLS"
/translation="PKKKRKV"
polyA_signal 1223..1344
/note="SV40 poly(A) signal"
/note="SV40 polyadenylation signal"
rep_origin complement(1601..2189)
/direction=LEFT
/note="ori"
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
CDS complement(2360..3220)
/codon_start=1
/gene="bla"
/product="beta-lactamase"
/note="AmpR"
/note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and
related antibiotics"
/translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW
EPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
LIKHW"
promoter complement(3221..3325)
/gene="bla"
/note="AmpR promoter"
ORIGIN
1 ctcgagttta ctccctatca gtgatagaga acgtatgaag agtttactcc ctatcagtga
61 tagagaacgt atgcagactt tactccctat cagtgataga gaacgtataa ggagtttact
121 ccctatcagt gatagagaac gtatgaccag tttactccct atcagtgata gagaacgtat
181 ctacagttta ctccctatca gtgatagaga acgtatatcc agtttactcc ctatcagtga
241 tagagaacgt ataagcttta ggcgtgtacg gtgggcgcct ataaaagcag agctcgttta
301 gtgaaccgtc agatcgcctg gagcaattcc acaacacttt tgtcttatac caactttccg
361 taccacttcc taccctcgta aagtcgacac cggggcccag atctatcgat cggccggata
421 tcacgcgtca tatggctagc ctgcagggat ccaatgtaac tgtattcagc gatgacgaaa
481 ttcttagcta ttgtaatact ctagaggatc tttgtgaagg aaccttactt ctgtggtgtg
541 acataattgg acaaactacc tacagagatt taaagctcta aggtaaatat aaaattttta
601 agtgtataat gtgttaaact actgattcta attgtttgtg tattttagat tccaacctat
661 ggaactgatg aatgggagca gtggtggaat gcctttaatg aggaaaacct gttttgctca
721 gaagaaatgc catctagtga tgatgaggct actgctgact ctcaacattc tactcctcca
781 aaaaagaaga gaaaggtaga agaccccaag gactttcctt cagaattgct aagttttttg
841 agtcatgctg tgtttagtaa tagaactctt gcttgctttg ctatttacac cacaaaggaa
901 aaagctgcac tgctatacaa gaaaattatg gaaaaatatt ctgtaacctt tataagtagg
961 cataacagtt ataatcataa catactgttt tttcttactc cacacaggca tagagtgtct
1021 gctattaata actatgctca aaaattgtgt acctttagct ttttaatttg taaaggggtt
1081 aataaggaat atttgatgta tagtgccttg actagagatc ataatcagcc ataccacatt
1141 tgtagaggtt ttacttgctt taaaaaacct cccacacctc cccctgaacc tgaaacataa
1201 aatgaatgca attgttgttg ttaacttgtt tattgcagct tataatggtt acaaataaag
1261 caatagcatc acaaatttca caaataaagc atttttttca ctgcattcta gttgtggttt
1321 gtccaaactc atcaatgtat cttatcatgt ctgcggctct agagctgcat taatgaatcg
1381 gccaacgcgc ggggagaggc ggtttgcgta ttgggcgctc ttccgcttcc tcgctcactg
1441 actcgctgcg ctcggtcgtt cggctgcggc gagcggtatc agctcactca aaggcggtaa
1501 tacggttatc cacagaatca ggggataacg caggaaagaa catgtgagca aaaggccagc
1561 aaaaggccag gaaccgtaaa aaggccgcgt tgctggcgtt tttccatagg ctccgccccc
1621 ctgacgagca tcacaaaaat cgacgctcaa gtcagaggtg gcgaaacccg acaggactat
1681 aaagatacca ggcgtttccc cctggaagct ccctcgtgcg ctctcctgtt ccgaccctgc
1741 cgcttaccgg atacctgtcc gcctttctcc cttcgggaag cgtggcgctt tctcatagct
1801 cacgctgtag gtatctcagt tcggtgtagg tcgttcgctc caagctgggc tgtgtgcacg
1861 aaccccccgt tcagcccgac cgctgcgcct tatccggtaa ctatcgtctt gagtccaacc
1921 cggtaagaca cgacttatcg ccactggcag cagccactgg taacaggatt agcagagcga
1981 ggtatgtagg cggtgctaca gagttcttga agtggtggcc taactacggc tacactagaa
2041 gaacagtatt tggtatctgc gctctgctga agccagttac cttcggaaaa agagttggta
2101 gctcttgatc cggcaaacaa accaccgctg gtagcggtgg tttttttgtt tgcaagcagc
2161 agattacgcg cagaaaaaaa ggatctcaag aagatccttt gatcttttct acggggtctg
2221 acgctcagtg gaacgaaaac tcacgttaag ggattttggt catgagatta tcaaaaagga
2281 tcttcaccta gatcctttta aattaaaaat gaagttttaa atcaatctaa agtatatatg
2341 agtaaacttg gtctgacagt taccaatgct taatcagtga ggcacctatc tcagcgatct
2401 gtctatttcg ttcatccata gttgcctgac tccccgtcgt gtagataact acgatacggg
2461 agggcttacc atctggcccc agtgctgcaa tgataccgcg agacccacgc tcaccggctc
2521 cagatttatc agcaataaac cagccagccg gaagggccga gcgcagaagt ggtcctgcaa
2581 ctttatccgc ctccatccag tctattaatt gttgccggga agctagagta agtagttcgc
2641 cagttaatag tttgcgcaac gttgttgcca ttgctacagg catcgtggtg tcacgctcgt
2701 cgtttggtat ggcttcattc agctccggtt cccaacgatc aaggcgagtt acatgatccc
2761 ccatgttgtg caaaaaagcg gttagctcct tcggtcctcc gatcgttgtc agaagtaagt
2821 tggccgcagt gttatcactc atggttatgg cagcactgca taattctctt actgtcatgc
2881 catccgtaag atgcttttct gtgactggtg agtactcaac caagtcattc tgagaatagt
2941 gtatgcggcg accgagttgc tcttgcccgg cgtcaatacg ggataatacc gcgccacata
3001 gcagaacttt aaaagtgctc atcattggaa aacgttcttc ggggcgaaaa ctctcaagga
3061 tcttaccgct gttgagatcc agttcgatgt aacccactcg tgcacccaac tgatcttcag
3121 catcttttac tttcaccagc gtttctgggt gagcaaaaac aggaaggcaa aatgccgcaa
3181 aaaagggaat aagggcgaca cggaaatgtt gaatactcat actcttcctt tttcaatatt
3241 attgaagcat ttatcagggt tattgtctca tgagcggata catatttgaa tgtatttaga
3301 aaaataaaca aataggggtt ccgcgcacat ttccccgaaa agtgccacct gacgtctaag
3361 aaaccattat tatcatgaca ttaacctata aaaataggcg tatcacgagg ccctttcgtc
3421 ttcaagaatt c
//
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
名称：pTRE3G哺乳调控质粒
别称: pTRE3G
| 启动子: | TRE3G |
|---|---|
| 复制子: | pUC |
| 终止子: | SV40 poly(A) signal |
| 质粒分类: | 哺乳细胞，四环素调控系统载体 |
| 质粒大小: | 3431bp |
| 原核抗性: | Amp |
| 克隆菌株: | DH5a |
| 培养条件: | 37度 |
| 表达宿主: | 哺乳细胞 |
| 诱导方式: | 四环素诱导 |
| 5'测序引物: | 根据序列设计引物 |
| 3'测序引物: | 根据序列设计引物 |
质粒属性
| 载体宿主： | 哺乳细胞 |
|---|---|
| 载体用途： | 蛋白表达 |
| 基因种属： | 空载体 |
| 基因类型： | ORF |
| 原核抗性： | Amp |
| 真核抗性： | |
| 荧光蛋白： |
质粒简介
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported 3431 bp ds-DNA circular SYN 05-SEP-2016
DEFINITION synthetic circular DNA
ACCESSION .
VERSION .
KEYWORDS Untitled 5
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 3431)
AUTHORS .
TITLE Direct Submission
JOURNAL Exported Monday, September 5, 2016 from SnapGene Viewer 3.1.4
http://www.miaolingbio.com
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..3431
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
promoter 4..382
/note="TRE3G promoter"
/note="3rd-generation Tet-responsive promoter that can be
activated by binding of Tet-On(R) 3G"
protein_bind 12..30
/gene="tetO"
/bound_moiety="tetracycline repressor TetR"
/note="tet operator"
/note="bacterial operator O2 for the tetR and tetA genes"
protein_bind 48..66
/gene="tetO"
/bound_moiety="tetracycline repressor TetR"
/note="tet operator"
/note="bacterial operator O2 for the tetR and tetA genes"
protein_bind 84..102
/gene="tetO"
/bound_moiety="tetracycline repressor TetR"
/note="tet operator"
/note="bacterial operator O2 for the tetR and tetA genes"
protein_bind 120..138
/gene="tetO"
/bound_moiety="tetracycline repressor TetR"
/note="tet operator"
/note="bacterial operator O2 for the tetR and tetA genes"
protein_bind 156..174
/gene="tetO"
/bound_moiety="tetracycline repressor TetR"
/note="tet operator"
/note="bacterial operator O2 for the tetR and tetA genes"
protein_bind 192..210
/gene="tetO"
/bound_moiety="tetracycline repressor TetR"
/note="tet operator"
/note="bacterial operator O2 for the tetR and tetA genes"
protein_bind 228..246
/gene="tetO"
/bound_moiety="tetracycline repressor TetR"
/note="tet operator"
/note="bacterial operator O2 for the tetR and tetA genes"
intron 583..648
/note="small t intron"
/note="simian virus 40 (SV40) small t antigen intron"
CDS 778..798
/codon_start=1
/product="nuclear localization signal of SV40 large T
antigen"
/note="SV40 NLS"
/translation="PKKKRKV"
polyA_signal 1223..1344
/note="SV40 poly(A) signal"
/note="SV40 polyadenylation signal"
rep_origin complement(1601..2189)
/direction=LEFT
/note="ori"
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
CDS complement(2360..3220)
/codon_start=1
/gene="bla"
/product="beta-lactamase"
/note="AmpR"
/note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and
related antibiotics"
/translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
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EPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
LIKHW"
promoter complement(3221..3325)
/gene="bla"
/note="AmpR promoter"
ORIGIN
1 ctcgagttta ctccctatca gtgatagaga acgtatgaag agtttactcc ctatcagtga
61 tagagaacgt atgcagactt tactccctat cagtgataga gaacgtataa ggagtttact
121 ccctatcagt gatagagaac gtatgaccag tttactccct atcagtgata gagaacgtat
181 ctacagttta ctccctatca gtgatagaga acgtatatcc agtttactcc ctatcagtga
241 tagagaacgt ataagcttta ggcgtgtacg gtgggcgcct ataaaagcag agctcgttta
301 gtgaaccgtc agatcgcctg gagcaattcc acaacacttt tgtcttatac caactttccg
361 taccacttcc taccctcgta aagtcgacac cggggcccag atctatcgat cggccggata
421 tcacgcgtca tatggctagc ctgcagggat ccaatgtaac tgtattcagc gatgacgaaa
481 ttcttagcta ttgtaatact ctagaggatc tttgtgaagg aaccttactt ctgtggtgtg
541 acataattgg acaaactacc tacagagatt taaagctcta aggtaaatat aaaattttta
601 agtgtataat gtgttaaact actgattcta attgtttgtg tattttagat tccaacctat
661 ggaactgatg aatgggagca gtggtggaat gcctttaatg aggaaaacct gttttgctca
721 gaagaaatgc catctagtga tgatgaggct actgctgact ctcaacattc tactcctcca
781 aaaaagaaga gaaaggtaga agaccccaag gactttcctt cagaattgct aagttttttg
841 agtcatgctg tgtttagtaa tagaactctt gcttgctttg ctatttacac cacaaaggaa
901 aaagctgcac tgctatacaa gaaaattatg gaaaaatatt ctgtaacctt tataagtagg
961 cataacagtt ataatcataa catactgttt tttcttactc cacacaggca tagagtgtct
1021 gctattaata actatgctca aaaattgtgt acctttagct ttttaatttg taaaggggtt
1081 aataaggaat atttgatgta tagtgccttg actagagatc ataatcagcc ataccacatt
1141 tgtagaggtt ttacttgctt taaaaaacct cccacacctc cccctgaacc tgaaacataa
1201 aatgaatgca attgttgttg ttaacttgtt tattgcagct tataatggtt acaaataaag
1261 caatagcatc acaaatttca caaataaagc atttttttca ctgcattcta gttgtggttt
1321 gtccaaactc atcaatgtat cttatcatgt ctgcggctct agagctgcat taatgaatcg
1381 gccaacgcgc ggggagaggc ggtttgcgta ttgggcgctc ttccgcttcc tcgctcactg
1441 actcgctgcg ctcggtcgtt cggctgcggc gagcggtatc agctcactca aaggcggtaa
1501 tacggttatc cacagaatca ggggataacg caggaaagaa catgtgagca aaaggccagc
1561 aaaaggccag gaaccgtaaa aaggccgcgt tgctggcgtt tttccatagg ctccgccccc
1621 ctgacgagca tcacaaaaat cgacgctcaa gtcagaggtg gcgaaacccg acaggactat
1681 aaagatacca ggcgtttccc cctggaagct ccctcgtgcg ctctcctgtt ccgaccctgc
1741 cgcttaccgg atacctgtcc gcctttctcc cttcgggaag cgtggcgctt tctcatagct
1801 cacgctgtag gtatctcagt tcggtgtagg tcgttcgctc caagctgggc tgtgtgcacg
1861 aaccccccgt tcagcccgac cgctgcgcct tatccggtaa ctatcgtctt gagtccaacc
1921 cggtaagaca cgacttatcg ccactggcag cagccactgg taacaggatt agcagagcga
1981 ggtatgtagg cggtgctaca gagttcttga agtggtggcc taactacggc tacactagaa
2041 gaacagtatt tggtatctgc gctctgctga agccagttac cttcggaaaa agagttggta
2101 gctcttgatc cggcaaacaa accaccgctg gtagcggtgg tttttttgtt tgcaagcagc
2161 agattacgcg cagaaaaaaa ggatctcaag aagatccttt gatcttttct acggggtctg
2221 acgctcagtg gaacgaaaac tcacgttaag ggattttggt catgagatta tcaaaaagga
2281 tcttcaccta gatcctttta aattaaaaat gaagttttaa atcaatctaa agtatatatg
2341 agtaaacttg gtctgacagt taccaatgct taatcagtga ggcacctatc tcagcgatct
2401 gtctatttcg ttcatccata gttgcctgac tccccgtcgt gtagataact acgatacggg
2461 agggcttacc atctggcccc agtgctgcaa tgataccgcg agacccacgc tcaccggctc
2521 cagatttatc agcaataaac cagccagccg gaagggccga gcgcagaagt ggtcctgcaa
2581 ctttatccgc ctccatccag tctattaatt gttgccggga agctagagta agtagttcgc
2641 cagttaatag tttgcgcaac gttgttgcca ttgctacagg catcgtggtg tcacgctcgt
2701 cgtttggtat ggcttcattc agctccggtt cccaacgatc aaggcgagtt acatgatccc
2761 ccatgttgtg caaaaaagcg gttagctcct tcggtcctcc gatcgttgtc agaagtaagt
2821 tggccgcagt gttatcactc atggttatgg cagcactgca taattctctt actgtcatgc
2881 catccgtaag atgcttttct gtgactggtg agtactcaac caagtcattc tgagaatagt
2941 gtatgcggcg accgagttgc tcttgcccgg cgtcaatacg ggataatacc gcgccacata
3001 gcagaacttt aaaagtgctc atcattggaa aacgttcttc ggggcgaaaa ctctcaagga
3061 tcttaccgct gttgagatcc agttcgatgt aacccactcg tgcacccaac tgatcttcag
3121 catcttttac tttcaccagc gtttctgggt gagcaaaaac aggaaggcaa aatgccgcaa
3181 aaaagggaat aagggcgaca cggaaatgtt gaatactcat actcttcctt tttcaatatt
3241 attgaagcat ttatcagggt tattgtctca tgagcggata catatttgaa tgtatttaga
3301 aaaataaaca aataggggtt ccgcgcacat ttccccgaaa agtgccacct gacgtctaag
3361 aaaccattat tatcatgaca ttaacctata aaaataggcg tatcacgagg ccctttcgtc
3421 ttcaagaatt c
//
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
| P2798/pENTR223-POGLUT1（3点突变）人源基因质粒 |
| P2799/pENTR223-UBA6-G7T人源基因质粒 |
| P2800/pENTR223-GABPB1-A784G人源基因质粒 |
| P2801/pENTR223-FGFR1OP（2点突变）人源基因质粒 |
| P2802/pENTR223-TRPV5人源基因质粒 |
| P2804/pENTR223-TENT5C（1同义突变）人源基因质粒 |
| P2805/pENTR223-MCM7人源基因质粒 |
| P2806/pENTR223-RASSF8人源基因质粒 |
| P2807/pENTR223-NSDHL（1同义突变）人源基因质粒 |
| P2808/pENTR223-CD46人源基因质粒 |
| P2809/pENTR223-ZSCAN9人源基因质粒 |
| P2810/pENTR223-PPME1人源基因质粒 |
| P2811/pENTR223-MBOAT2（244-1296bp）人源基因质粒 |
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文献和实验相关实验
1、质粒的概念 质粒（Plasmid）是一种存在于细菌、酵母等微生物细胞中的小型环状双链 DNA 分子，能够独立于宿主染色体进行自我复制，并通常携带对宿主生存非必需但具有特定功能的基因（如抗生素抗性基因）。质粒是分子生物学和基因工程中最重要的工具之一。 质粒根据其用途可以分为多种不同的类型，如用于保存序列信息的克隆质粒（如：pUC 系列质粒），用于表达蛋白的质粒（如哺乳动物细胞表达所用的 pcDNA3.1 系列质粒），用于基因编辑的质粒（如哺乳动物细胞基因编辑所用的 espCas9-2A
将克隆化基因插入合适载体后导入大肠杆菌用于表达大量蛋白质的方法一般称为原核表达。这种方法在蛋白纯化、定位及功能分析等方面都有应用。大肠杆菌用于表达重组蛋白有以下特点： 易于生长和控制；用于细菌培养的材料不及哺乳动物细胞系统的材料昂贵；有各种各样的大肠杆菌菌株及与之匹配的具各种特性的质粒可供选择。但是，在大肠杆菌中表达的蛋白由于缺少修饰和糖基化、磷酸化等翻译后加工，常形成包涵体而影响表达蛋白的生物学活性及构象。 表达载体在基因工程中具有十分重要的作用，原核表达载体通常为质粒，典型的表达
1、优越的灵敏度，比Westernbloting灵敏度高1000倍以上；2、内源性低，哺乳动物无内源性表达；3、荧光素酶检测不受细胞内其他物质影响；4、发光检测，检测方便；5、灵敏度高，10‐20摩尔荧光素酶分子；6、检测范围广，大于7个数量级。四、主要应用领域1、潜在启动子/启动子核心区域检测；2、潜在增强子/抑制子等调控子核心元件检测；3、启动子区可能的转录因子结合位点检测；4、启动子/增强子与转录因子的相互作用；5、病毒/细胞相互作用；6、药物等化学诱导因素对启动子活性的调节（抑制或增强
pTRE3G哺乳调控质粒
￥100 - 1000
