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- 上海
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- 2025年07月14日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
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-20
- 保质期：
2年
- 英文名：
pSilencer 1.0-U6
- 库存：
100
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格：
干粉/液体
基本信息
名称：pSilencer 1.0-U6哺乳干扰质粒
别称: pSilencer 1.0-U6
质粒属性
质粒简介
pSilencer 1.0-U6是一个哺乳干扰RNA表达质粒。
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported 3292 bp ds-DNA circular SYN 20-DEC-2017
DEFINITION synthetic circular DNA
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..3292
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
rep_origin complement(3..458)
/direction=LEFT
/label=f1 ori
/note="f1 bacteriophage origin of replication; arrow
indicates direction of (+) strand synthesis"
promoter 675..988
/label=U6 promoter
/note="RNA polymerase III promoter for mouse U6 snRNA (Das
et al., 1988)"
misc_feature 990..1091
/label=MCS
rep_origin complement(1545..2133)
/direction=LEFT
/label=ori
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
CDS complement(2304..3164)
/codon_start=1
/gene="bla"
/product="beta-lactamase"
/label=AmpR
/note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and
related antibiotics"
/translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW
EPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
LIKHW"
promoter complement(3165..3269)
/gene="bla"
/label=AmpR promoter
ORIGIN
1 ctaaattgta agcgttaata ttttgttaaa attcgcgtta aatttttgtt aaatcagctc
61 attttttaac caataggccg aaatcggcaa aatcccttat aaatcaaaag aatagaccga
121 gatagggttg agtgttgttc cagtttggaa caagagtcca ctattaaaga acgtggactc
181 caacgtcaaa gggcgaaaaa ccgtctatca gggcgatggc ccactacgtg aaccatcacc
241 ctaatcaagt tttttggggt cgaggtgccg taaagcacta aatcggaacc ctaaagggag
301 cccccgattt agagcttgac ggggaaagcc ggcgaacgtg gcgagaaagg aagggaagaa
361 agcgaaagga gcgggcgcta gggcgctggc aagtgtagcg gtcacgctgc gcgtaaccac
421 cacacccgcc gcgcttaatg cgccgctaca gggcgcgtcc cattcgccat tcaggctgcg
481 caactgttgg gaagggcgat cggtgcgggc ctcttcgcta ttacgccagc tggcgaaagg
541 gggatgtgct gcaaggcgat taagttgggt aacgccaggg ttttcccagt cacgacgttg
601 taaaacgacg gccagtgagc gcgcgtaata cgactcacta tagggcgaat tgggtacccg
661 ctctagaact agtggatccg acgccgccat ctctaggccc gcgccggccc cctcgcacag
721 acttgtggga gaagctcggc tactcccctg ccccggttaa tttgcatata atatttccta
781 gtaactatag aggcttaatg tgcgataaaa gacagataat ctgttctttt taatactagc
841 tacattttac atgataggct tggatttcta taagagatac aaatactaaa ttattatttt
901 aaaaaacagc acaaaaggaa actcacccta actgtaaagt aattgtgtgt tttgagacta
961 taaatatccc ttggagaaaa gccttgtttg ggccccccct cgaggtcgac ggtatcgata
1021 agcttgatat cgaattcctg cagcccgggg gatccactag ttctagagcg gccgccaccg
1081 cggtggagct ccagcttttg ttccctttag tgagggttaa ttgcgcgctt ggcgtaatca
1141 tggtcatagc tgtttcctgt gtgaaattgt tatccgctca caattccaca caacatacga
1201 gccggaagca taaagtgtaa agcctggggt gcctaatgag tgagctaact cacattaatt
1261 gcgttgcgct cactgcccgc tttccagtcg ggaaacctgt cgtgccagct gcattaatga
1321 atcggccaac gcgcggggag aggcggtttg cgtattgggc gctcttccgc ttcctcgctc
1381 actgactcgc tgcgctcggt cgttcggctg cggcgagcgg tatcagctca ctcaaaggcg
1441 gtaatacggt tatccacaga atcaggggat aacgcaggaa agaacatgtg agcaaaaggc
1501 cagcaaaagg ccaggaaccg taaaaaggcc gcgttgctgg cgtttttcca taggctccgc
1561 ccccctgacg agcatcacaa aaatcgacgc tcaagtcaga ggtggcgaaa cccgacagga
1621 ctataaagat accaggcgtt tccccctgga agctccctcg tgcgctctcc tgttccgacc
1681 ctgccgctta ccggatacct gtccgccttt ctcccttcgg gaagcgtggc gctttctcat
1741 agctcacgct gtaggtatct cagttcggtg taggtcgttc gctccaagct gggctgtgtg
1801 cacgaacccc ccgttcagcc cgaccgctgc gccttatccg gtaactatcg tcttgagtcc
1861 aacccggtaa gacacgactt atcgccactg gcagcagcca ctggtaacag gattagcaga
1921 gcgaggtatg taggcggtgc tacagagttc ttgaagtggt ggcctaacta cggctacact
1981 agaagaacag tatttggtat ctgcgctctg ctgaagccag ttaccttcgg aaaaagagtt
2041 ggtagctctt gatccggcaa acaaaccacc gctggtagcg gtggtttttt tgtttgcaag
2101 cagcagatta cgcgcagaaa aaaaggatct caagaagatc ctttgatctt ttctacgggg
2161 tctgacgctc agtggaacga aaactcacgt taagggattt tggtcatgag attatcaaaa
2221 aggannttca cctagatcct tttaaattaa aaatgaagtt ttaaatcaat ctaaagtata
2281 tatgagtaaa cttggtctga cagttaccaa tgcttaatca gtgaggcacc tatctcagcg
2341 atctgtctat ttcgttcatc catagttgcc tgactccccg tcgtgtagat aactacgata
2401 cgggagggct taccatctgg ccccagtgct gcaatgatac cgcgagaccc acgctcaccg
2461 gctccagatt tatcagcaat aaaccagcca gccggaaggg ccgagcgcag aagtggtcct
2521 gcaactttat ccgcctccat ccagtctatt aattgttgcc gggaagctag agtaagtagt
2581 tcgccagtta atagtttgcg caacgttgtt gccattgcta caggcatcgt ggtgtcacgc
2641 tcgtcgtttg gtatggcttc attcagctcc ggttcccaac gatcaaggcg agttacatga
2701 tcccccatgt tgtgcaaaaa agcggttagc tccttcggtc ctccgatcgt tgtcagaagt
2761 aagttggccg cagtgttatc actcatggtt atggcagcac tgcataattc tcttactgtc
2821 atgccatccg taagatgctt ttctgtgact ggtgagtact caaccaagtc attctgagaa
2881 tagtgtatgc ggcgaccgag ttgctcttgc ccggcgtcaa tacgggataa taccgcgcca
2941 catagcagaa ctttaaaagt gctcatcatt ggaaaacgtt cttcggggcg aaaactctca
3001 aggatcttac cgctgttgag atccagttcg atgtaaccca ctcgtgcacc caactgatct
3061 tcagcatctt ttactttcac cagcgtttct gggtgagcaa aaacaggaag gcaaaatgcc
3121 gcaaaaaagg gaataagggc gacacggaaa tgttgaatac tcatactctt cctttttcaa
3181 tattattgaa gcatttatca gggttattgt ctcatgagcg gatacatatt tgaatgtatt
3241 tagaaaaata aacaaatagg ggttccgcgc acatttcccc gaaaagtgcc ac
//
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
名称：pSilencer 1.0-U6哺乳干扰质粒
别称: pSilencer 1.0-U6
| 启动子: | U6 |
|---|---|
| 复制子: | pUC |
| 原核抗性: | Amp |
| 克隆菌株: | DH5a |
| 培养条件: | 37度 |
质粒属性
| 载体宿主： | 哺乳细胞 |
|---|---|
| 载体用途： | 干扰沉默 |
| 基因种属： | 空载体 |
| 基因类型： | shRNA |
| 原核抗性： | Amp |
| 真核抗性： | Puro |
| 荧光蛋白： |
质粒简介
pSilencer 1.0-U6是一个哺乳干扰RNA表达质粒。
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported 3292 bp ds-DNA circular SYN 20-DEC-2017
DEFINITION synthetic circular DNA
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..3292
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
rep_origin complement(3..458)
/direction=LEFT
/label=f1 ori
/note="f1 bacteriophage origin of replication; arrow
indicates direction of (+) strand synthesis"
promoter 675..988
/label=U6 promoter
/note="RNA polymerase III promoter for mouse U6 snRNA (Das
et al., 1988)"
misc_feature 990..1091
/label=MCS
rep_origin complement(1545..2133)
/direction=LEFT
/label=ori
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
CDS complement(2304..3164)
/codon_start=1
/gene="bla"
/product="beta-lactamase"
/label=AmpR
/note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and
related antibiotics"
/translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW
EPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
LIKHW"
promoter complement(3165..3269)
/gene="bla"
/label=AmpR promoter
ORIGIN
1 ctaaattgta agcgttaata ttttgttaaa attcgcgtta aatttttgtt aaatcagctc
61 attttttaac caataggccg aaatcggcaa aatcccttat aaatcaaaag aatagaccga
121 gatagggttg agtgttgttc cagtttggaa caagagtcca ctattaaaga acgtggactc
181 caacgtcaaa gggcgaaaaa ccgtctatca gggcgatggc ccactacgtg aaccatcacc
241 ctaatcaagt tttttggggt cgaggtgccg taaagcacta aatcggaacc ctaaagggag
301 cccccgattt agagcttgac ggggaaagcc ggcgaacgtg gcgagaaagg aagggaagaa
361 agcgaaagga gcgggcgcta gggcgctggc aagtgtagcg gtcacgctgc gcgtaaccac
421 cacacccgcc gcgcttaatg cgccgctaca gggcgcgtcc cattcgccat tcaggctgcg
481 caactgttgg gaagggcgat cggtgcgggc ctcttcgcta ttacgccagc tggcgaaagg
541 gggatgtgct gcaaggcgat taagttgggt aacgccaggg ttttcccagt cacgacgttg
601 taaaacgacg gccagtgagc gcgcgtaata cgactcacta tagggcgaat tgggtacccg
661 ctctagaact agtggatccg acgccgccat ctctaggccc gcgccggccc cctcgcacag
721 acttgtggga gaagctcggc tactcccctg ccccggttaa tttgcatata atatttccta
781 gtaactatag aggcttaatg tgcgataaaa gacagataat ctgttctttt taatactagc
841 tacattttac atgataggct tggatttcta taagagatac aaatactaaa ttattatttt
901 aaaaaacagc acaaaaggaa actcacccta actgtaaagt aattgtgtgt tttgagacta
961 taaatatccc ttggagaaaa gccttgtttg ggccccccct cgaggtcgac ggtatcgata
1021 agcttgatat cgaattcctg cagcccgggg gatccactag ttctagagcg gccgccaccg
1081 cggtggagct ccagcttttg ttccctttag tgagggttaa ttgcgcgctt ggcgtaatca
1141 tggtcatagc tgtttcctgt gtgaaattgt tatccgctca caattccaca caacatacga
1201 gccggaagca taaagtgtaa agcctggggt gcctaatgag tgagctaact cacattaatt
1261 gcgttgcgct cactgcccgc tttccagtcg ggaaacctgt cgtgccagct gcattaatga
1321 atcggccaac gcgcggggag aggcggtttg cgtattgggc gctcttccgc ttcctcgctc
1381 actgactcgc tgcgctcggt cgttcggctg cggcgagcgg tatcagctca ctcaaaggcg
1441 gtaatacggt tatccacaga atcaggggat aacgcaggaa agaacatgtg agcaaaaggc
1501 cagcaaaagg ccaggaaccg taaaaaggcc gcgttgctgg cgtttttcca taggctccgc
1561 ccccctgacg agcatcacaa aaatcgacgc tcaagtcaga ggtggcgaaa cccgacagga
1621 ctataaagat accaggcgtt tccccctgga agctccctcg tgcgctctcc tgttccgacc
1681 ctgccgctta ccggatacct gtccgccttt ctcccttcgg gaagcgtggc gctttctcat
1741 agctcacgct gtaggtatct cagttcggtg taggtcgttc gctccaagct gggctgtgtg
1801 cacgaacccc ccgttcagcc cgaccgctgc gccttatccg gtaactatcg tcttgagtcc
1861 aacccggtaa gacacgactt atcgccactg gcagcagcca ctggtaacag gattagcaga
1921 gcgaggtatg taggcggtgc tacagagttc ttgaagtggt ggcctaacta cggctacact
1981 agaagaacag tatttggtat ctgcgctctg ctgaagccag ttaccttcgg aaaaagagtt
2041 ggtagctctt gatccggcaa acaaaccacc gctggtagcg gtggtttttt tgtttgcaag
2101 cagcagatta cgcgcagaaa aaaaggatct caagaagatc ctttgatctt ttctacgggg
2161 tctgacgctc agtggaacga aaactcacgt taagggattt tggtcatgag attatcaaaa
2221 aggannttca cctagatcct tttaaattaa aaatgaagtt ttaaatcaat ctaaagtata
2281 tatgagtaaa cttggtctga cagttaccaa tgcttaatca gtgaggcacc tatctcagcg
2341 atctgtctat ttcgttcatc catagttgcc tgactccccg tcgtgtagat aactacgata
2401 cgggagggct taccatctgg ccccagtgct gcaatgatac cgcgagaccc acgctcaccg
2461 gctccagatt tatcagcaat aaaccagcca gccggaaggg ccgagcgcag aagtggtcct
2521 gcaactttat ccgcctccat ccagtctatt aattgttgcc gggaagctag agtaagtagt
2581 tcgccagtta atagtttgcg caacgttgtt gccattgcta caggcatcgt ggtgtcacgc
2641 tcgtcgtttg gtatggcttc attcagctcc ggttcccaac gatcaaggcg agttacatga
2701 tcccccatgt tgtgcaaaaa agcggttagc tccttcggtc ctccgatcgt tgtcagaagt
2761 aagttggccg cagtgttatc actcatggtt atggcagcac tgcataattc tcttactgtc
2821 atgccatccg taagatgctt ttctgtgact ggtgagtact caaccaagtc attctgagaa
2881 tagtgtatgc ggcgaccgag ttgctcttgc ccggcgtcaa tacgggataa taccgcgcca
2941 catagcagaa ctttaaaagt gctcatcatt ggaaaacgtt cttcggggcg aaaactctca
3001 aggatcttac cgctgttgag atccagttcg atgtaaccca ctcgtgcacc caactgatct
3061 tcagcatctt ttactttcac cagcgtttct gggtgagcaa aaacaggaag gcaaaatgcc
3121 gcaaaaaagg gaataagggc gacacggaaa tgttgaatac tcatactctt cctttttcaa
3181 tattattgaa gcatttatca gggttattgt ctcatgagcg gatacatatt tgaatgtatt
3241 tagaaaaata aacaaatagg ggttccgcgc acatttcccc gaaaagtgcc ac
//
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。
二、转化图片
| P4571/pCMV-SPORT6-PEX10人源基因质粒 |
| P4572/pCMV-SPORT6-F12人源基因质粒 |
| P4573/pCMV-SPORT6-FAM160B2人源基因质粒 |
| P4574/pCMV-SPORT6-C3orf49人源基因质粒 |
| P4575/pCMV-SPORT6-UNC50人源基因质粒 |
| P4576/pCMV-SPORT6-TNFRSF6B人源基因质粒 |
| P4577/pCMV-SPORT6-DECR2人源基因质粒 |
| P4578/pCMV-SPORT6-HOMER1人源基因质粒 |
| P4579/pCMV-SPORT6-PCCB人源基因质粒 |
| P4580/pCMV-SPORT6-ASB9人源基因质粒 |
| P4581/pCMV-SPORT6-PPM1D人源基因质粒 |
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文献和实验相关实验
U6 vector, nucleotide overhangs to the EcoR I and Apa I restriction sites are added to the 5' and 3' end of the DNA oligonucleotides, respectively (Figure 2). In contrast, for cloning into the pSilencer 2.0-U6, 2.1-U6, 3.0-H1, or 3.1-H1 vectors
a 9-nucleotide spacer (TTCAAGAGA), although other spacers can be designed. 5-6 T's are added to the 3' end of the oligonucleotide. In addition, for cloning into the pSilencer 1.0-U6 vector, nucleotide overhangs to the Eco R I and Apa I restriction sites
. 5-6 T's are added to the 3' end of the oligonucleotide. In addition, for cloning into the pSilencer 1.0-U6 vector, nucleotide overhangs to the EcoR I and Apa I restriction sites are added to the 5' and 3' end of the DNA oligonucleotides, respectively
pSilencer 1.0-U6哺乳干扰质粒
￥100 - 1000
